肾宁胶囊的制备及质量控制.doc

肾宁胶囊的制备及质量控制肾宁胶囊是在多年临床经验基础上，总结出来的治疗慢性肾病经验处方，由19种中药材精制而成的纯中药制剂。具有补肾健脾，益气利水，活血化瘀的功效，主要用于急、慢性肾小球炎，肾病综合征，各种原因所致的继发性肾脏病，慢性肾功能不全等疾病引起的浮肿、少尿、蛋白尿、血尿、腰痛、腰酸、倦怠、乏力、耳鸣等。本研究确定了处方中主药黄芪、丹参、熟地、山茱萸的薄层色谱定性鉴别方法，为控制本制剂质量并制定更严格的质量控制标准奠定了基础。1 处方及制备1.1 处方 黄芪300g、太子参200g、茯苓200g、白术150g、山药200g、枸杞子150g、 熟地黄200g、白芍150g、山茱萸200g、薏苡仁100g、丹参300g、川芎150g、红花100g、益母草250g、白茅根200g、泽兰150g、白花蛇舌草300g、桑寄生150g、甘草100g。试药：肾宁胶囊3批（本院制剂中心提供，批号20101113为供试品，批号20101206为供试品，批号20110112为供试品）1.2 制法 以上19 味，加水煎煮三次，每次1小时，煎液滤过，70减压浓缩至稠膏，加淀粉适量，干燥，粉碎成细粉，装入胶囊，制成1000粒。每粒装0.4g，含生药2克。2 质量控制2.1 性状 本品为胶囊剂，内容物为浅褐色粉末；气特异，味酸苦。2.2 黄芪鉴别 2.2.1供试品溶液的制备：取本品20粒，除去胶囊，加70%乙醇60ml，加热回流90分钟。滤过，滤液蒸干。加甲醇40ml，超声处理30分钟，滤过，滤液水浴蒸干，加水40ml，用石油醚（60-90）萃取两次，每次20ml，弃去醚液，水液挥发至无醚味，加水饱和正丁醇振摇提取两次，每次20ml，合并提取液，加氨试液振摇提取两次，每次20ml，弃去氨液，正丁醇液蒸干,残渣加甲醇溶解 使成1ml，作为供试品溶液。2.2.2对照品溶液的制备：取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液2.2.3阴性对照品溶液的制备：按处方比例制成不含黄芪的本品，照供试品溶液制备方法制备阴性对照溶液。2.2.4薄层色谱法实验：吸取上述两种溶液各10ul,分别点于同一含羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上,以氯仿醋酸乙酯甲醇水（20：40：22：10），10以下放置后的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10硫酸乙醇溶液，105加热数分钟，至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(图1)。2.3丹参鉴别2.3.1供试品溶液的制备：取本品20粒，除去胶囊，加二氯甲烷30ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加二氯甲烷1ml使溶解，作为供试品溶液。2.3.2对照品溶液的制备：取丹参酮A对照品，加二氯甲烷制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。2.3.3阴性对照品溶液的制备：按处方比例制成不含丹参的本品，照供试品溶液制备方法制备阴性对照溶液。2.3.4薄层色谱法实验：吸取供试品溶液20ul,对照品溶液5 ul，分别点于同一含羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上,以苯醋酸乙酯（19：1）为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的红色斑点。(图2)。2.4熟地鉴别2.4.1供试品溶液的制备：取本品15粒，除去胶囊，加甲醇30ml，温浸，振摇1小时，滤过，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液。2.4.2对照品溶液的制备：取5羟甲基糠醛对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。2.4.3阴性对照品溶液的制备：按处方比例制成不含熟地的本品，照供试品溶液制备方法制备阴性对照溶液。2.4.4薄层色谱法实验：吸取上述两种溶液各5ul，分别点于同一含羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶GF254薄层板上,以石油醚（60-90）醋酸乙酯（1：1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(图3)。2.5 山茱萸鉴别2.5.1供试品溶液的制备：取本品20粒，除去胶囊，加乙醚30ml，加热回流1小时，滤过，滤液低温挥去乙醚，残渣加丙酮1ml使溶解，作为供试品溶液。2.5.2对照品溶液的制备：取熊果酸对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。2.5.3阴性对照品溶液的制备：按处方比例制成不含熟地的本品，照供试品溶液制备方法制备阴性对照溶液。2.5.4薄层色谱法实验：吸取供试品溶液20ul,对照品溶液5 ul，分别点于同一含羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上,以甲苯醋酸乙酯冰醋酸（12：4：0.5）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以30硫酸乙醇溶液，105加热数分钟，至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的紫红色斑点。(图4)。2.6 检查：应符合中国药典2010年版一部附录胶囊剂项下各项规定。3 讨论肾脏疾病，病情复杂，特别是慢性肾病，其病程迁延，但其病机多以脾肾两虚，水湿停留，淤血内阻为多见。方中黄芪、太子参、云苓、焦白术，怀山药、薏米健脾益气，兼可利湿；白芍、枸杞子、熟地、山萸肉、桑寄生补肾益气；红花、川芎、丹参均能活血行瘀,气为血帅,气行则血行,故须活血化瘀药与益气药相伍,以助活血化瘀之力。益母草、泽兰、白花蛇舌草，既可活血祛瘀，又可利水，加用白茅根以增强利水消肿的作用。全方共取