干扰素释放试验ppt课件.ppt

Y 干扰素释放试验的临床应用 1 Y干扰素释放试验 interferon 1releaseassays IGRA是检测结核分枝杆菌 MTB 特异性抗原刺激T细胞产生的Y干扰素 以判断是否存在MTB的感染 IGRAs可弥补PPD试验的不足 目前多个国家已将其用于诊断MTB潜伏感染 1atenttuberculosisinfection LTBI 我国部分医院也已常规开展此项检测 2 3 目前国际上较成熟的IGRAs有2种 1 全血法 采用酶联免疫吸附试验 ELISA 检测全血中致敏T细胞再次受到MTB特异性抗原刺激后释放的1 干扰素水平 称之为全血检测或结核感染T细胞免疫检测 2 细胞法 采用酶联免疫斑点技 ellzymelinkedimmunospotassay ELISPOT 测定在MTB特异性抗原刺激下 外周血单个核细胞中能够释放1一干扰素的效应T细数量 称之为细胞检测或结核感染T细胞检测 上述2种检测方法的原理类似 检测技术和操作程序略有不同 均采用MTB的RDl区基因编码抗原多肽作为特异性抗原 主要相对分子质量为6000的早期分泌抗原靶 ESAT 6 和相对分子质量为10000的培养滤液蛋白 CFP一10 抗原或抗原多肽 4 T SPOT试验 30 IGRAs的结核特异免疫抗原 SAT 6和CFP一10主要存在于MTB复合群 而在卡介苗和大多数NTM中缺失 因此IGRAs的特异度较好 但ESAT 6和CFP 10也存在于少数几种NTM中 如堪萨斯分枝杆菌 海分枝杆菌 苏尔加分枝杆菌 转黄分枝杆菌和胃分枝杆 故IGRAs阳性不能排除上述几种NTM感染的可能 6 PPD试验与IGRAs的对比 PPD试验作为诊断MTB感染的传统方法 具有操作简便 成本低廉的特点 至今仍广泛使用 但该方法使用的PPD抗原成分复杂 易受卡介苗接种和非结核分枝杆菌 nontuberculosismyeobacterium NTM 的影响 特异度较低 且对人免疫缺陷病毒 HIV 感染及重症疾病患者等免疫功能受损人群的敏感度不足 荟萃分析结果显示 在HIV感染人群中 IGRAs的敏感度并未高于PPD试验 但IGRAs 尤其是细胞检测 受CD4 T细胞数量的影响小于PPD试验 这可能因为IGRAs检测过程已对单个核细胞数量进行了标准化 即在检测程序上消除了淋巴细胞数量减少对检测结果的影响 7 PPD阳性对以下情况无法区分 卡介苗预防接种 非结核分枝杆菌感染 LIBI 活跃结核病 结核病治愈 自愈后 8 IGRAs阳性 卡介苗预防接种 大多数非结核分枝杆菌感染 LIBI 活跃结核病 结核病治愈 自愈后 9 2010年全国结核病流行病抽样调查结核分枝杆菌复合群77 1 非结核分枝杆菌22 9 2010年广州结核病流行病抽样调查 非结核分枝杆菌19 3 且其中前5位IGRAs为阴性的 10 IGRAs的敏感性和特异性 美国FDA认证临床实验数据 经培养确诊的结核病患者样本183例敏感性95 6 175 183 306例入伍新兵特异性97 1 297 306 11 对活动性结核病的辅助诊断 PPD试验和IGRAs均无法区分LTBI和活动性结核病患者 国内IGRAs的研究数据显示其敏感度和特异度差别较大 敏感度为53 一98 特异度为60 90 或以上 但多数文献报道的敏感度和特异度 70 提示IGRAs的特异度优于PPD试验 12 IGRA用于诊断肺结核 深圳第三人民医院的结果 13 14 15 16 中国的国情适用IGRAs吗 17 Y 干扰素释放试验在中国应用的建议 18 IGRAs可以有 考虑到我国肺结核患者中菌阴肺结核所占比例较高 在诊断这类患者缺乏细菌学依据时 IGRAs可发挥其辅助作用应用于活动性结核病的辅助诊断应用于LTBI诊断中 19 IGRAs用于体液或组织标本 近几年来国内有IGRAs 仅限于ELISPOT方法 辅助诊断结核性胸膜炎和结核性腹膜炎等肺外结核的报道 其中采用胸腔积液和腹水等体液或组织标本检测的IGRAs的敏感度和特异度高达90 以上 采用血液标本检测时IGRAs则并未显示出优势 此类研究报道数量不多 病例数也不足 且国家食品药品监督管理总局批准的IGRAs仅限于血液样本的检测 即IGRAs对体液或组织标本的研究尚未经过充分验证 不能得出可靠的结论 20 IGRAs对儿童结核病的辅助诊断 儿童结核病的临床症状不典型 重症及肺外结核病比例较高 且结核病患儿的细菌载量低 咳嗽反射和气管纤毛运动能力差 病原学检查阳性率很低 PPD试验和IGRAs联合诊断有一定的辅助作用 21 IGRAs在LTBI诊断中的应用 1 活动性肺结核患者密切接触者和医务工作者中LTBI的诊断2 IGRAs在HIV感染等免疫抑制或缺陷患者LTBI诊断中的应用 22 活动性肺结核患者密切接触者和医务工作者中LTBI的诊断 1 PPD试验和IGRAs均可用于LTBI的诊断和追踪 若考虑到PPD试验检测结果可能受卡介苗接种或NTM影响时 可对PPD试验阳性者进一步采用IGRAs帮助确认 2 不宜采用IGRAs对大范围人群进行LTBI筛查 3 PPD试验仍是在健康人群中动态筛查LTBI的首选 23 1 对HIV感染人群进行LTBI筛查 单用PPD试验的敏感度不高 应单用IGRAs或联合使用PPD试验 在方法选择上优先考虑细胞检测技术 2 自身免疫性疾病和器官移植患者在接受糖皮质激素或TNF 拮抗剂治疗前 应单用IGRAs或联合使用PPD试验筛查LTBI 24 除HIV感染者外 类风湿关节炎等自身免疫性疾病 器官移植等免疫功能受损患者及糖尿病等特殊患者 因其自身原因 或接受糖皮质激素或肿瘤坏死因子TNF拮抗剂等免疫抑制药物治疗导致免疫功能缺陷 这类患者是LTBI发展为结核病的高风险人群 对这类患者也有必要进行LTBI筛查 25 应行IGRAs和PPD检测的6种情况 WHO2015 HIV阳性者肺结核病人的接触者拟进行抗TNF治疗的患者拟透析的患者拟行器官及造血细胞移植者矽肺患者 26 结语 1 IGRAs可用于诊断MTB感染 但不能区分活动性结核病和LTBI 也不能准确预测LTBI发展为活动性结核病的风险 2 IGRAs对疑似结核病患者具有辅助诊断作用 IGRAs阴性结