骨髓细胞学检查血细胞的生成与发育PPT课件.ppt

骨髓细胞学检查 1 血细胞的生成与发育 全能干细胞多能干细胞阶段祖细胞阶段阶段1 BFU E髓系2 CFU GM全能干细胞3 CFU EO4 CFU MegCFU TL淋巴系CFU BL 血细胞分化过程 2 血细胞形态发育规律图 造血干细胞髓性干细胞淋巴干细胞原粒原单原红原巨核原浆原淋巴 B T 早幼早幼幼巨核中性嗜酸嗜碱中幼中幼中幼中幼颗粒巨幼浆中性嗜酸嗜碱幼单幼淋巴 B T 晚幼晚幼晚幼晚幼产板巨成浆中性嗜酸嗜碱杆核杆核杆核网织中性嗜酸嗜碱分叶分叶分叶单核成红血小板淋巴 大 小 骨髓内 血液内 3 血细胞发育过程中的形态演变规律 血细胞的发育成熟实际上是一个连续的过程 我们根据血细胞在各阶段所表现出的形态特点 人为地将各系细胞划分成几个阶段 为使在辨认的时候有一个相对统一的标准 但在细胞分类中必然会碰到中间阶段的细胞 一般可划入下一阶段 4 血细胞发育形态演变规律要点 原始成熟胞体 大小胞质 量少多色深蓝浅蓝或灰 红 颗粒无有 特异或非特异 胞核 量大小形态圆不规则 或消失 染色质疏松细致紧密粗糙色淡紫色深紫色核仁 可见消失 5 血细胞的分化 发育 成熟具有一定的规律性 我们在辨认细胞时需要掌握下列几个方面 细胞大小核质比例胞质 量 颜色 内含物 胞核 大小 形状 结构 颜色 核膜 核仁 6 血细胞形态分析要点 涂片质量 a 厚薄b 染色c 部位选取细胞发育连贯性 注意细胞发育过程中各阶段的主要特征结合细胞功能 细胞发育与细胞功能具密切关系 7 正常血细胞形态检查 一 红细胞系统 20 25 二 粒细胞系统 50 55 三 巨核细胞系统四 单核细胞系统五 淋巴细胞系统 20 25 六 浆细胞系统七 其他细胞 8 骨髓细胞检查结果分析与临床意义 9 骨髓象检验的临床应用1 适应症临床上通常出现下列情况时 可作骨髓细胞学检查 a 外周血数量 成分 形态等异常者b 经一定检查原因不明的发热 肝脾及淋巴结肿大c 出现原因不明的骨痛 骨质破坏 黄疸 紫癜等d 需作治疗观察和其他检查者f 其他 活检 标记检测 染色体检查等 2 禁忌症a 血友病或凝血因子重度缺陷者b 穿刺部位有炎症或畸形c 晚期妊娠的孕妇 10 骨髓穿刺方法 一 部位的选择和条件穿刺部位通常选择 髓液丰富 浅表易定位 避开重要器官 如髂后上棘 髂前上棘 胸骨 胫骨等 被穿刺部位的体表皮肤应无破损和炎症及畸型 11 穿刺要求 1 耐心解释 2 严格无菌操作 3 髓液应控制0 2ml以内 4 骨质疏松或MM患者需小心 5 血小板减少等患者 穿刺后应予压迫 6 了解病史注意禁忌症 12 结果的计算和填写检验报告单 首先计算各系统各阶段细胞所占百分比 然后将各阶段粒细胞百分率的总和除以各阶段有核红细胞白分率 得出粒红比值 G E 据实填写取材 涂片 染色 检测结果分析与报告方式 一 结合临床分析1 一般资料2 症状3 体征 二 结合血象分析三系数量和质量 13 三 骨髓象分析1 小粒 油滴 色泽2 有核细胞增生程度3 细胞数量分析4 细胞形态分析 粒 红 巨 淋 单 浆 其他异常细胞 14 四 骨髓象与血象结合分析1 骨髓象相似 而血象有区别 溶贫 急性失血等 2 骨髓象有区别 而血象相似 传淋与慢淋 白血病与类白 3 骨髓象无变化 而血象有变化 传单 部分淋巴瘤 4 骨髓象有变化 而血象无变化 多发性骨髓瘤 戈谢病 5 骨髓象细胞难以辨认 而血象细胞易辨认 白血病 血液寄生虫 淋巴瘤 15 五 报告方式 1 独立性和肯定性结论2 符合性诊断3 须依赖细胞化学染色的诊断4 疑似性诊断5 简明报告特征所见而不下结论6 血液病治疗后复查报告a 有效b 无效 16 临床意义 粒细胞系增多 原粒 早幼粒 中幼粒 晚幼粒和杆状核 急性白血病等 急性早幼白血病 M2 慢性粒细胞白血病等 慢性粒细胞白血病 类白 中毒等 减少 再障 粒缺 急性造血停滞等 17 红细胞系增多 原红和早幼红 中幼红和晚幼红减少 巨核细胞系增多 减少 急性红血病 急性红白血病 增生性贫血真红 铅中毒 红白血病等 纯红再障 急性白血病未分化型 化疗后等 MPD ITP 急性巨核细胞白血病 脾亢 慢粒等 再障 急性白血病 慢粒 化疗后等 18 单核系细胞增多 原单及幼单成熟单核淋巴系细胞增多 原淋及幼淋成熟淋巴 急性单核或粒 单细胞血病 慢粒急单变 急性单核细胞白血病病 慢性粒单细胞白血病 急性淋巴细胞白血病 慢粒急淋变 淋巴瘤等 慢性淋巴细胞白血病 淋巴瘤 巨球蛋白血症等 再障 病毒感染等 19 骨髓细胞形态学检查报告单姓名 王某某年龄 30岁科别 血液病区 内四床号 541病历号 Z050492抽取部位 右髂后上棘抽取日期 2005 4 12临床诊断 贫血待查检查号 05412骨髓小粒 丰富涂片张数 10张涂片质量 较佳染色质量 好附带血片 3张 细胞名称血片骨髓片 正常值 原始细胞原始粒细胞0 420 420 5早幼粒细胞1 270 811 0中性中幼粒细胞7 232 774 0晚幼粒细胞11 362 937 0杆状核细胞2 020 014 4715 0分叶核细胞52 012 854 387 0嗜酸中幼粒细胞0 50 49晚幼粒细胞0 80 64杆状核细胞1 060 95分叶核细胞3 01 901 481 0嗜碱中幼粒细胞0 010 03晚幼粒细胞0 020 03杆状核细胞0 030 07分叶核细胞0 160 24原始红细胞0 370 361 0早幼红细胞1 340 883 0中幼红细胞9 453 3330 5晚幼红细胞9 643 5020 0原始淋巴细胞0 010 01幼稚淋巴细胞0 080 15成熟淋巴细胞40 018 905 469 0原始单核细胞0 010 02幼稚单核细胞0 060 07成熟单核细胞3 01 450 881 0原始浆细胞0 0020 01幼稚浆细胞0 030 07成熟浆细胞0 540 38组织细胞0 20组织嗜碱细胞0 03吞噬细胞0 19内皮细胞0 04脂肪细胞成骨细胞破骨细胞共计数有核细胞数200个粒红比例0 65 1 原始巨核细胞幼稚巨核细胞4 20 颗粒巨核细胞58 30 产板巨核细胞37 50 裸核1个 1 骨髓增生明显活跃 粒红比例倒置 2 红系增生明显活跃占54 5 以中晚幼阶段为主 幼红细胞胞体较小 边缘不整齐 胞质量少 偏蓝 核浆发育失衡呈核老浆幼状 成熟红细胞体积较小 中央淡染区明显扩大 多色性红细胞可见 红系分裂象较易见 铁染色 外铁 内铁幼红细胞阳性率3 3 粒系增生活跃 比例相对减低占35 5 各阶段粒细胞比例和形态未见明显异常 4 巨核细胞全片计数见76个 增生明显活跃 成蔟血小板可见 形态未见明显异常 5 淋巴细胞比例相对减少 形态未见明显异常 6 单核细胞比例未见改变 形态未见明显异常 7 未见其他异常细胞和寄生虫 意见和建议 请结合临床及其他铁代谢检查 考虑小细胞低色素性贫血 检验者 李XX检验日期 2007 6 11 粒细胞系 红细胞系 淋巴系 单核系 浆细胞 其他 巨核细胞系 20 常用血液细胞化学染色 21 细胞化学染色是将形态和功能相结合的科学 他在保持完整的细胞形态和细胞结构的前提下 应用化学反应将被检细胞内的各类化学成分和细胞结构及生理活性物质原位的显示 从而对分析细胞化学成分 生理功能 新陈代谢及细胞生理和病理改变有着重要的意义 细胞内染色的范围通常是 蛋白类 多糖类 脂类 盐类和金属类等 采用的方法通常为 化学结合 物理溶解及酶 底物反应 22 应用 a 对各类白血病的确诊b 对许多血液疾病鉴别诊断c 对各种良 恶性血液系统疾病疗效和预后估计提供一定的信息 23 一 过氧化物酶 POX 血细胞中的过氧化物酶主要为髓过氧化物酶 嗜酸粒细胞内为乳过氧化物酶 在血液和骨髓细胞中 粒细胞系和单核细胞系的嗜苯胺蓝颗粒 A 颗粒 内的溶酶体中存在有过氧化物酶 此酶的活性和多少与溶酶体的数量有关 而与A 颗粒的多少无关 虽然淋巴细胞浆中也有嗜苯胺蓝颗粒 但因为此颗粒中不存在溶酶体 所以淋巴细胞过氧化物酶染色呈阴性反应 另外巨核细胞 红细胞等也为阴性反应 24 一 原理过氧化物酶H2O2H2O O 无色联苯胺蓝色联苯胺 二 方法根据各公司产品说明书进行 三 正常阳性细胞1 中性粒细胞强阳性2 嗜酸粒细胞强阳性3 单核细胞弱阳性或阳性 弥散状 4 淋巴细胞 红细胞 浆细胞 组织细胞 巨核细胞等均为阴性 25 2020 1 7 26 四 临床评价 病理变化1 增高 再生障碍性贫血 感染 急慢性淋巴细胞白血病 2 减低 急慢性粒细胞白血病 MDS 风湿热 放射病等3 缺乏 先天性髓过氧化物酶缺乏症 过氧化物酶染色在急性白血病分型中的意义临床上通常将POX染色阳性率3 作为淋巴与非淋巴的分界标准若能结合其他化学染色 细胞免疫标记 遗传学和分子生物学检测则更好 27 二 糖原染色 PAS 此试验中能被过碘酸 雪夫反应呈阳性的多糖类物质有糖原 粘多糖 糖蛋白 糖脂 还包括一些磷脂类物质等 因此PAS阳性不能简单地就表明有糖原的存在 只是在对血细胞的组织化学研究中通常习惯于将PAS阳性认同于糖原 PAS染色虽然不完全代表糖原 但在血液系统疾病特别在各类型急性白血病中却有相当大的应用价值 PAS染色若结合其他化学染色和细胞免疫表型检测可对部分疾病的诊断和鉴别诊断提供一定的价值 28 一 原理过碘酸乙二醇双醛基 无色品红紫红色化合物 二 方法 三 正常阳性细胞1 粒系 阳性 且随细胞的成熟逐渐增强 2 单核 阳性 且随细胞的成熟逐渐增强 3 淋巴 大部分阴性 少数呈阳性 4 巨核 强阳性 粗颗粒或块状 5 浆系 大部分阴性 少数呈阳性 6 红系 阴性 29 四 临床评价红系红 白 血病 MDS等幼红细胞可呈阳性 各类急性白血病的辅助鉴别 淋粗颗粒或块状单细颗粒弥散状粒细颗粒或均匀红色巨粗颗粒或块状强阳性 30 三 碱性磷酸酶 NAP 中性粒细胞碱性磷酸酶是中性粒细胞中的特异性颗粒 S颗粒 所释放的一种酶 存在于细胞浆内的三级颗粒中呈不规则形的管状结构 该酶的活力与积分受到体内许多因素的影响 如中性粒细胞的成熟度 HbF 内分泌功能等均可使NAP的积分产生一定的差异 但正常人群中性粒细胞的阳性程度一般很少到三分 绝对达不到四分 若结合染色体检查可协助慢粒的诊断 31 一 原理pH9 6 磷酸萘酚 H2O 萘酚 磷酸碱性磷酸酶 重氮盐有色沉淀物 二 方法 三 正常阳性细胞在血细胞中除成熟中性粒细胞阳性外 其他细胞基本呈阴性 32 四 临床评价1 生理变化 年龄 应激 妊娠可见增高或降低2 病理变化 1 增高感染 AA 类白血病 急淋 其它 2 减低粒缺 脾亢 感染 G 病毒 白血病 33 五 氯化醋酸AS D萘酚酯酶染色 AS DCE 此酶主要分布在粒细胞和肥大细胞中 通常从原粒细胞后期即可见有弱阳性反应 而到早幼粒细胞就可见强阳性反应 且酶的活性不随细胞分化成熟而增强 此酶的阳性产物比POX更为特异 单核细胞 淋巴细胞 巨核细胞等均为阴性 所以在临床上将AS DCE染色作为是粒细胞的标志性酶 34 一 原理氯化醋酸AS D萘酚酯酶氯化醋酸AS D萘酚AS D萘酚 醋酸 重氮盐有色沉淀物 二 方法 三 阳性细胞中性粒细胞阳性外 其他血液细胞均为阴性 四 临床评价粒细胞及肥大细胞的标志酶 35 四 非特异性酯酶 非特异性酯酶是属水解酶 通常可分为中性酯酶 NAE 酸性酯酶 ANAE 和丁酸酯酶 NBE 由较多的同工酶所组成 在不同的细胞内存在有不同的同工酶 电泳分析证明人血细胞含有九种酯酶同工酶 如中性粒细胞含同工酶1 2 7 9 单核细胞和血小板含有同工酶4 5 淋巴细胞含有同工酶1和6等 其中同工酶4 5能被NaF所抑制 所以对染色呈阳性的细胞作NaF抑制试验可鉴别中性粒细胞和单核细胞 非特异性酯酶检测通常应用于白血病的鉴别诊断 而白血病细胞的高度异型性或异质性使酶活性的表达出现紊乱 所以组合酯酶检测比单一检测更具价值和意义 36 在临床上非特异性酯酶一般选用 醋酸萘酚酯酶 NAE 丁酸萘酚酯酶 NBE 醋酸AS D萘酚酯酶 AS DAE 若将上述任何一个酶与POX或AS DCE染色于同一张标本片上 就被称为双酶 双酯 染色 可使粒细胞系和单核细胞系分辨得更清楚 37 一 原理 NAE AS DAE NBE 醋酸萘酚 萘酚 醋酸 醋酸萘酚酯酶 重氮盐有色沉淀物 二 方法 三 正常阳性细胞 四 临床评价此组合酶类染色 主要运用于各种急性白血病的鉴别诊断 特别在急非淋 ANLL 中的分型和亚型分型提供重要依据 38 六 铁染色 骨髓铁包括细胞内铁和细胞外铁 细胞内铁为幼红细胞合成血红蛋白时的利用形式 而细胞外铁是骨髓以含铁血黄素形式存在的储存铁 骨髓铁染色可了解骨髓中幼红细胞对铁利用的功能和铁原料在机体内的吸受与储存情况 若将铁染色与血清 总铁结合力等检测综合观察 可了解机体内铁的动态变化 所以铁染色是诊断缺铁性贫血最重要且较早期的指标之一 39 细胞内外的铁与酸性亚铁氰化钾反应形成蓝色的亚铁氰化铁 定位于含铁的部位 正常值 细胞外铁 细胞内铁 19 44 意义 1 缺铁性贫血明显降低甚至阴性 2 铁粒幼细胞贫血明显增多 3 MDS可见环形铁粒幼细胞增多 15 40 常见血液病血细胞特征 41 骨髓增生异常综合症 本病是一组骨髓造血干细胞克隆性疾病 外周血象 主要表现在三系呈不同程度的改变 可见到各类细胞在数量 质量上的异常 骨髓象 主要以各系病态造血为突出表现 分型 型 RA RAS RAEB RAEB t CMML 42 WHO在1997年11月修订了MDS的分型 难治性贫血 伴有环行铁粒幼细胞 RARS 不伴有环行铁粒幼细胞 RA 难治性血细胞减少伴有多系增生异常 RCMD 难治性血细胞减少伴有多系增生异常和环行铁粒幼细胞 RCMD RS 难治性贫血伴有原始细胞过多 RAEB 5q 综合征 原始细胞大于20 的AML且有细胞遗传学异常 骨髓增生异常综合征 不能分类 43 白血病 白血病是一种造血系统的恶性疾病 其特点是大量原始和幼稚或异常细胞出现在骨髓 外周血和其他器官或组织 根据白血病细胞的分化程度和白血病的自然病程 可分成急性白血病和慢性白血病二大类 44 急性白血病 急性白血病的骨髓和外周血中主要的白血病细胞是以原始和早期细胞为主 骨髓中达到或超过30 以上 根据白血病细胞的种类可将其分为急性淋巴细胞性白血病和急性非淋巴细胞性白血病 45 急性淋巴细胞性白血病 原始或幼稚淋巴细胞为主 依据形态可分为三型 L1 以小细胞型 L2 大小细胞混合型 L3 空泡型 按照免疫学特点可分成T 细胞和B 细胞二大类 再分成多种亚型 形态学分型和免疫学分型目前二者无相关性 46 急性非淋巴细胞白血病 急性非淋巴细胞性白血