自体骨髓移植治疗骨坏死PPT课件.ppt

自体骨髓移植治疗骨坏死BoneMarrowforOsteonecrosis 李子荣王佰亮史振才孙伟中日友好医院骨科骨坏死与关节保留重建中心 1 骨坏死 准确的发病机制仍未明确 骨坏死的病理生理改变血管内血流直接的细胞毒间充质细胞分化损害假设 骨坏死为骨髓间充质细胞病 2 骨坏死为骨髓间充质细胞病 Suh等对比酒精性ON与股骨颈骨折的股骨近端骨髓酒精性骨坏死的骨髓细胞向成脂方向转化 Suh etal CORR2005 431 220 Lee等 酒精性ON 特发性ON与OA比较股骨近端骨髓基质细胞成骨分化减少 Lee etal JOrthopRes2006 24 604 3 骨坏死为骨髓间充质细胞病 Cui等 体外试验 克隆骨髓细胞群暴露在酒精中可使成骨基因表达减少增加成脂形态特点 Cui etal JBJS2006 88 suppl3 148 Yin等 骨髓基质细胞暴露在地塞米松成脂基因422 ap2 表达增加甘油三脂合成增加骨标志的基因表达及细胞增加减少 YinL ChinMedJ 2006 119 581 4 骨髓间充质细胞改变 成骨分化能力减少成脂细胞体积增加 血流减少本中心资料 对照股骨头颈的骨髓基质细胞 坏死与股骨颈骨折 5 骨坏死 精确的发病机制仍未明确 有许多学说 均能解释一部分现象假设 骨坏死可能为骨髓间充质干细胞病股骨头坏死 成骨干细胞明显 Hernigou etal JBJS1999 81B 349 本中心资料 股骨头内骨髓基质干细胞减少股骨颈骨折非创伤性ONFH 6 资料和方法 密度梯度离心法 抽取5ml骨髓血 单个核细胞接种 PART2 7 图1a 图1b 图1c 图1d 图1e 图1f 人骨髓基质干细胞的分离 培养 图1a 原代培养于24 后 细胞贴壁 图1b c 原代培养于5d后病例组的细胞集落 图1d e 原代培养于3d后 对照组的细胞集落 图1f 细胞集落不断扩大而融合成单层长满瓶底 结果 PART2 8 CD44 FITC CD29 PE 荧光双标X200 人骨髓基质干细胞的鉴定 结果 PART2 9 骨髓基质干细胞的生长曲线 MTT法 Group1 股骨颈骨折对照组 Group2 股骨头坏死股骨近端组 Group3 股骨头坏死髂骨组 10 结果 股骨颈骨折组 骨坏死组 PART2 11 临床上应用植骨促进修复的机理 自然修复能力低 此与成骨性细胞减少有关 植骨目的是提供新的生骨细胞 修复过程 12 塌陷之前的自体骨髓移植 早期 塌陷前 骨坏死表现为死骨的存在和力学强度的降低血管性标志线 因此在骨坏死区注射成骨性细胞能有助于修复过程 13 红骨髓 2部分 造血干细胞来源knownsince1950andusedbyhaematologists 基质干细胞来源suspectedin1869byGoujonconfirmedtwentyyearsagobyOwenandFridenstein 14 BM MNC s StromalStemCells HematopoieticStemCells 骨髓的细胞成分 骨髓中有两种具有多向分化潜能的干细胞 ONESTROMALCELLINEVERY250 000CELLSINTHEMARROWATAGE35 BUTTHISRATIODECREASESWITHAGE ONEHEMATOPOIETICSTEMCELLFOREVERY10 15 000CELLSINTHEMARROWANDDOESNOTDECREASEWITHAGE MultipotentStemCells 15 基质干细胞 16 成骨性干细胞和骨髓基质系统 集群形成单位成纤维细胞修复标记 CFU F OSTEO CHONDRO FIBRO STROMASYSTEM 前体干细胞 ANGIOG 17 正常股骨头 体积 65cmCFU F 50 cm 总数 3000CFU F 3 3 18 股骨头的细胞成分 正常骨髓 脂肪与生血组织比率为1 1 19 股骨头坏死 坏死区 CFU F 0外区CFU F 4 cm 总数 300CFU F 3 injectedCFU F 25000 20 自体骨髓移植治疗股骨头坏死Hernigou 2002报告 CORR 2002 405 14 189髋 116例髓心减压及骨髓移植F U 7年 5 10 转为THR9 145 stage 至2006年 已积累1500例 坏死 骨折不愈合 21 Gangji 2004报告 JBJS 2004 86A 1153 对比研究 18髋 期 ONFH 随访24月结果 对照组 单纯减压 5 8进展到塌陷 期 骨髓移植组 减压加BMG 1 10进展到塌陷 22 赵永济 2005在中日友好医院报告 36髋 31例 随访1 2年放射线进展 22 2 8 36 临床失败 转为THR 13 8 5 36 23 手术方法 骨髓血收集 150 200ml 例 24 成人红骨髓 iliaccrestspinesternum 25 2mlx104mlx106mlx104mlx154mlx305mlx30 抽吸次数 26 2020 1 7 27 骨髓血浓缩 cobe2991 28 细胞分离 离心 29 用3mm直径的空心钻经大转子减压与注射 双平面透视机 30 31 本中心资料 2005 4 2008 2 单纯髓心减压13髋 10例髓心减压加BMG144髋 110例随访6 30月 平均17 6 46 12月59髋 45例分期 ARCO c 2髋 A7 B13 C28 48髋 9髋平均年龄 37 5岁 16 56 激素性 29髋 20例 酒精性 22髋 18例 特发性 8髋 7例 32 随访结果 Harris评分 术前71 20术后83 74 p 0 05 总优良率 79 66 优22 良25 差5髋 8 5 激素性 75 86 酒精性 81 82 特发性 87 50 单纯减压 优3 良5 61 5 33 随访结果 各期比较 影像学进展 14 23 73 未进展76 27 34 随访结果 各期比较 35 转为关节置换病例 36 刘X 男 55岁 ARCO分期 右2C 术前 37 刘X 男 55岁 ARCO分期 右2C 术后1 5年 38 郭X 男 36岁 双3A ARCO分期 术前 39 郭X 男 36岁 双3A ARCO分期 术后9月 40 庄X 男 43岁 ARCO分期 双2C 术前 41 庄X 男 43岁 ARCO分期 双2C 术后12月 塌陷 42 刘X 女 33岁 右2B ARCO分期 左侧3B打压植骨 术前 43 术后12月 44 孙X 男 50岁 ARCO分期 左侧3CTHA 右2C 45 孙X 男 50岁 ARCO分期 左侧3CTHA 右2C 术后1年 塌陷 46 尚未解决的几个问题 修复的骨组织是由植入的骨髓细胞分化而来吗 人体无法证实动物实验 干细胞标记示踪骨髓有核细胞的数量多大合适 与年龄的关系骨髓血抽取量 47 骨髓浓集对照 48 尚未解决的几个问题 加入哪些物质可增加干细胞向成骨方向转化 使用载体好 还是不好 能否在体外培养后定向成骨再植入 注入靶向