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文档简介
dna重组技术的基本工具1. 教学目标 知识目标简述dna重组技术所需三种基本工具的作用。dna重组技术的模拟操作。能力目标尝试运用基因工程原理,提出解决某一实际问题的方案情感态度与价值观关注基因工程的发展认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术创新。2. 教学重点/难点 教学重点:dna重组技术所需的三种基本工具的作用教学难点: 基因工程载体需要具备的条件。3. 教学用具 4. 标签 教学过程 【导入】引入新课课件出示抗虫棉图片,以抗虫棉的优点和培育技术导入基因工程。【讲授】提出概念基因工程的概念课本基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,并通过体外dna重组和转基因等技术,赋予生物以新的遗传特性,从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在dna分子水平上进行设计和施工的,因此又叫做dna重组技术。总结对本概念应从以下几个方面理解:操作环境生物体外操作对象基因操作水平dna分子水平基本过程剪切拼接导入表达结果人类需要的基因产物过渡因为基因工程是在分子水平上进行的操作,所以需要特定的“分子工具”对dna分子进行切割、改造、修饰并导入到受体细胞中。【讲授】师生共同完成三种工具的学习自学学生自学本节内容。自学师生共同总结如下:1.限制性核酸内切酶“分子手术刀”(1)来源:主要是从原核生物中分离纯化来的。(2)种类:近4000种(3)功能:能够识别双链dna分子的某种特定的核苷酸序列,并能将每一条链上特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键切开。(4)限制性内切酶的切割方式:在中心轴线两侧将dna切开,切口是黏性末端。沿着中心轴线切开dna,切口是平末端。2.dna连接酶“分子缝合针”种类来源作用e.colidna连接酶大肠杆菌缝合黏性末端被切开的磷酸二酯键t4dna连接酶t4噬菌体缝合黏性末端和平末端比较有关的dna酶(1)dna水解酶:能够将dna水解成四种脱氧核苷酸,彻底水解成膦酸、脱氧核糖和含氮碱基(2)dna解旋酶:能够将dna或dna的某一段解成两条长链,作用的部位是碱基和碱基之间的氢键。注意:使dna解成两条长链的方法除用解旋酶以外,在适当的高温(如94)、重金属盐的作用下,也可使dna解旋。(3)dna聚合酶:能将单个的核苷酸通过磷酸二酯键连接成dna长链。(4)dna连接酶:是通过磷酸二酯键连接双链dna的缺口。注意比较dna聚合酶和dna连接酶的异同点。3.基因进入受体细胞的载体“分子运输车”(1)种类:质粒:常存在于原核细胞和酵母菌中,是一种分子质量较小的环状的裸露的dna分子,独立于拟核之外。病毒:常用噬菌体的衍生物、动植物病毒等。(2)运载体使用的目的:是用它做运载工具,将目的基因转运到宿主细胞中去。是利用它在受体细胞内对目的基因进行大量复制。(3)作为运载体必须具备的条件:在宿主细胞中保存下来并大量复制(使目的基因进行扩增)有多个限制性内切酶切点。(供外源基因插入其中)具有标记基因。(供重组dna鉴定和选择)讲解真正被用作载体的质粒,都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的。 课后习题 1.在基因工程中,科学家所用的“剪刀”、“针线”和“载体”分别是指( )a.大肠杆菌病毒、质粒、dna连接酶 b.噬菌体、质粒、dna连接酶c.dna限制酶、rna连接酶、质粒 d.dna限制酶、dna连接酶、质粒2.不属于质粒被选为基因运载体的理由是( ) a.能复制 b.有多个限制酶切点c.具有标记基因 d.它是环状dna3.质粒是基因工程中最常用的运载体,它的主要特点是( )能自主复制 不能自主复制 结构很小 蛋白质 环状rna环状dna 能“友好”地“借居”a. b.c. d.4.有关基因工程的叙述中,错误的是 ( ) a.dna连接酶将黏性未端的碱基对连接起来 b.限制性内切酶用于目的基因的获得 c.目的基因须由载体导入受体细胞 d.人工合成目的基因不用限制性内切酶5.实施基因工程第一步的一种方法是把所需的基因从供体细胞内分离出来,这要利用限性内切酶。一种限制性内切酶能识别dna子中的gaattc顺序,切点在g和a之间,这是应用了酶的( ) a.高效性 b.专一性 c.多样性 d.催化活性受外界条件影响6.人们常选用的细菌质粒分子往往带有一个抗菌素抗性基因,该抗性基因的主要作用是( )a.提高受体细胞在自然环境中的耐药性b.有利于对目的基因是否导入进行检测c.增加质粒分子的分子量d.便于与外源基因连接7.在重组dna技术中,不常用到的酶是( ) a.限制性内切酶 b.dna聚合酶 c.dna连接酶 d.反转录酶8.在基因工程中通常所使用的质粒是 a.细菌的染色体dna b、细菌染色体外的dna c.病毒染色体dna d、噬菌体dna9.(研究人员想将生长激素基因通过质粒介导入大肠杆菌细胞内,以表达产生生长激素。已知质粒中存在两个抗性基因:a是抗链霉素基因,b是抗氨苄青
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