（动物学专业论文）腹毛目纤毛虫的皮层细胞骨架及其结构分化的研究.pdf

论文答辩委员会成员名单 姓幸； 1 作单位 职称 是否博导备注 陈代杰。1 ：海医药1 业研究院教授是 答辩委员会主席 乔- ，东上海交通大学教授是 李利珍i + 海师范人学教授 殳自荣华东师范大学教授 是 赵云龙华东师范大学教授是 学位论文独创性声明 本人所呈交的学位论文是我在导师的指导下进行的研究工作及取得的研究 成果。据我所知，除文中已经注明引用的内容外，本论文不包古其他个人已经发 表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中 作了明确说明并表示谢意。 作者签名：痤日期：旦型作者签名：盎坌日期：坐一! ：堕 学位论文授权使用声明 本人完全了解华东师范大学有关保留、使用学位论文的规定，学校有权保留 学位论文并向国家主管音i ；r j 或其指定机构送交论文的电子版和纸质舨。有权将学 位论文用于非赢利目的的少量复制并允许论文进入学校图书馆被查阅。有权将学 位论文的内容编入有关数据库进行检索。有权将学位论文的标题和摘要汇编出 版。保密的学位论文在解密届适用本规定。 学位论文作者签名；牟 导师签名 f 1 期 r 期：生：! ：堕 计l 。学位论史 腹毛日纤毛虫的虚层细胞骨架技j e 结构分化的研究 腹毛目纤毛虫的皮层细胞骨架及其 结构分化的研究 专业：塾塑堂 博士生：苤萱 研究方向：丛生塾塑堂 导 师：题遥盛熟逡 摘要 皮层细胞骨架足纤毛虫皮层的主要结构成分，搞清楚皮层细胞骨架的形态， 对于深入揭示纤毛虫的细胞结构模式具有重要意义。为深入阐明纤毛虫细胞结构 的复杂性及其与皮层细胞骨架相联系的生理功能、探索纤毛虫中微管类骨架的形 态及与其他细胞结构的作用关系，本文以腹毛目纤毛虫游仆虫( e u p l o e s g r a c i i s ) 为材料，应用扫描电镜术和非离子去垢剂抽提法，探讨了纤毛虫皮层 细胞骨架l 叫e 纤毛区皮层骨架、纤毛器骨架和附属纤维三维结构网架的建构和定 位：以腹毛口纤毛虫游仆虫( e u p l o t e se l e g a n s ) 为材料，在应用扫描电镜技术 显示游仆虫细胞表面形念的基础上，应用透射电镜技术观察了非分裂期及经微管 解聚剂秋水仙素处理后的游仆虫细胞和皮层细胞骨架的超微结构；以腹毛翻纤毛 虫翁尼柯虫( o n y e h o d r o m u sq u a d r i e o r n u t u s ) 为材料，应用蛋白银方法，探讨 了纤毛虫细胞无性分裂周期中各类皮层纤毛器及其附属纤维结构的分化，所得结 果论述如下： 1 凳纯去膜螽游 蠢皮藤细腱管繁豹扫播邀镶鼹察 由扫描电镜术显示，应用非离子去垢剂抽提获得的游仆出皮层细胞骨架是由 非纤毛区皮联骨架、纤毛器骨架及其附属纤维等构成的三维结构网槊。各类细胞 嚣繁毁纾维物矮为纂零戏分缌残缍缎赠、绎维层、终维京和绥维薄姥等不同靛形 态单元。其中：非纤毛区皮层骨架以表面纤维网和表膜下纤维层为形态单元位于 纲耱的井蹋缮；纤蓖器管絮中的盈添带嚣蘩、口餐j 袋臀粱、额羧横赫毛嚣繁按各 自的分布网式在皮层内定位，成为书要的皮层骨架结构。尽管这些纤毛器骨架显 博l “学位论艾腹毛t l 纤毛虫的皮瑶细胞骨架搜j e 结构分化的埘究 示不嗣的形态，但印具有相同的建构特征，即都是由纤毛器的毛基体、纤毛器托 架和骨架附属纤维相互联系镶嵌在一起形成的相对独立的结构单元。分析推测， 细胞表呵纤维网也是皮层细胞骨架的部分。本文应用生化去膜方法提取获得的 游仆虫背、腹面i 叫状纤维骨架的整体图形，在其他种游仆虫中未见报道，与同种 游仆虫中嗜银网的形态及其网格的排夼等特征是相吻合的。这层位丁虫体表面的 纤维刚，使细胞表面形成区域化状念，除剥纤毛虫细胞表膜外表面的加固作_ j 外， n j 能与细胞表面各部分的联系及其细胞与环境的相互作用有关。同时观察到的纤 毛器骨架其三者的结构，除以i j i 所提出的“毛基体托架在纤毛虫细胞皮层l t 起着 微管组织叶1 心的作用”、“骨架附属纤维可能与细胞内各种纤毛器间的联系，以及 包括纤毛器运动在内的细胞运动的协调有关”等认识外，由于细胞的结构与其功 能的发挥是密切联系的，游仆虫中各个纤毛器的毛基体复合结构，是纤毛运动的 主体，对纤毛器托架和骨架附属纤维等可能起到微管组织中心的作f j 。由于对游 仆虫的形态学研究中，透射电镜术仅可显示细胞表膜下微管层、纤毛器及纤毛器 骨架等的局部结构，并且比较以i j 对游仆虫皮层细胞骨架的观察结果，本文比较 完整地鼹示了游仆虫皮层细胞骨架的立体图形，鉴于纤毛虫细胞的复杂程度是多 细胞生物的一个细胞远，1 i 能及的，且皮层又是原生动物细胞中最复杂的结构层次 之一，本文的结果对j ：深入阐明细胞结构的复杂性及其与皮层细胞骨架相联系的 生理功能问题是有意义的。 2 。游 蠢缨戆窥受层绸熬嚣絮戆超徽缝棱残寨 为探索纤毛嫩叶1 微管类骨架的形态及其与其他细胞结构的作用关系，本文在 鹿糟 掰l 毽镜技术显示华荚游 虫缁胞形态静基确。，应瑁透射魄镜技零灌察了 非分裂期披经秋水讪索处理霜的游4 f 虫细胞结构。结果表明，非分裂期游4 虫细 胞表膜由质膜、袭膜泡外膜和表膜泡内膜j 三层膜结构组成。背皮屡表膜下含有由 三授徽管鳃藏躲赫字形徽管单元羧定淘隔搀列的敷警层，羧瘦鼷表貘f 剡疆单 椒微管按一定间隔排列成微管层。在纤琵迭口皮鼹，大部分口围带小膜含有三列 舔体，蘩体之闻有连接纤维，基律下存筏粲结构，基俸耗絮下常纯纤毛螽徽管或 纡毛后微铃柬。 ：上土，皮屡含有袭膜下“坛形分泌器”。在皮层微管骨架集结的区 2 腹毛1 1 纤毛虫的j 盘层细胞骨架及j e 结构分化的 宄 域，常见线粒体大量发生。线粒体外膜与周围细胞质界限清晰，线粒体内膜形成 丰富的折叠，其内膜形成的管状嵴在线粒体内组织成纵横交错的管道系统。 非分裂期游仆虫细胞应用秋水仙素处理后，表膜结构未见明显的变化，但表 膜下微管及与微管胞器相联系的细胞器似乎经历了一系列变化。经秋水仙素处理 的细胞其表膜下微管山紧密排列状态向松散排列状态变化，细胞质内显示与细 胞质界限清晰且松散排布的微管和微管束，秋水仙素处理对游仆虫细胞质微管的 解聚及将微管从细胞质中分离出来有重要作用。不同时问秋水仙素处理后的游仆 虫皮层微管依然存在，而且经过处理后的微管及微管束更为清晰，可能是由于秋 水仙素作用后微管解聚，解聚后的微管从胞质中分离出来，与周围胞质差异明显 所致；游仆虫细胞除含有表膜下微管和纤毛器微管骨架外，其细胞质中尚含有计： 多其他方法尚刁i 能显示的微管结构：f 常情况下，游仆虫的皮层细胞质微管胞器 及其附属微管与周围细胞质密切联系且融为一体，这是其行使生命活动功能的基 本条什。 经过敢东钠素楚理蘑，游 垒线较体内螫敬蟥孝爨互瓣赛限模嬲，与周疆熬矮 的界限也不明妊，甚至部分线粒体呈现解体状惑。这可能是由”f 秋水仙索对微管 的辩聚律弼彩响了生貔俸懿备磺功藐，获露雩l 怒线粒捧肉膜鹩绪鞫获态及其功能 的变化，它不等同于休眠细胞能量利用和储存模式的变化。 坛形分泌器楚游补虫细胞中与口皮层纤毛器功能相联系的射出腿器。应用歉 承铀素处理螽，游l 虫珏围豢小骥爨逡豹坛形分泌器农数量、形态及麒器内含甥 的特征等方面硝i 同于币常细胞的同种胞器，其中表膜下坛形分泌器大爨发生，除 成熟蘸器夕 ，邻近细藏震中又不断产羹藏嚣体束静态。弦霹雏，坛形分泌嚣涂 以前胱认识的功能外，它也与r 围带小膜的纤龟运动有关，或许具有调节纤毛器 运动的作用。该胞器的异常，w 能会对所述微管胞器的纤毛避动产生严重影响。 3 。翁越搀虫瘦层纾壤器及其熬都纾缝熬分纯 应j 1 j 蛋白银方法对淡水膜毛目纤毫虫翁尼柯虫细胞形态发牛以凰表膜下纤 维系统的演像进行了进一步豹磺究，缩采袭萌该纤毛蠢上海静群建示f 与 f t ，i s s n e f 等( 1 9 8 7 ) 以前报告的模式有明显不同的现蒙，即在无性生魑期间口器 博i ：学位论艾腹毛日纤毛虫的皮层身胞骨架艘儿结构分化的州究 和额腹横棘毛的分化中前仔虫口田带和口侧膜在老结构位置更新形成；左、右缘 棘毛的发卜与老缘棘毛无明确关联这不同于尖毛科的其他纤毛虫；纤毛器基部 纤维包插u 凼带小膜基部纤维、口侧膜托架纤维、额腹横棘毛和丘、右缘棘毛基 部6 订纵纤维、后纵纤维、横纤维以及额腹横棘毛基部放射纤维。各种纤毛器螭部 纤维是单根纤维单元聚集成的纤维束，以纤毛器基部为中心，分别向皮层不同 方向放射，有叫显的极性和不对称性，最终在细胞腹i 自i 皮层组织成一个复合的i 维结构例络。其左缘棘毛基部横纤维起始于棘毛基部左侧，向右穿过棘毛基部后 向皮层细胞质伸展的定位特征，与其他纤毛虫的棘毛基部横纤维不样：并且与 辣堤虫( s f y ，州t 耀由场m y t i l u s ) 、游 虫( e u p o t e sg r a c i l i 5 9 等儿辩 毛且乇 腹面棘毫分散于 砷i ，其棘毛基部纤维在整个腹丽皮层形成稀疏的网络系统不样， 英鳎藏羧嚣繇毛豹密集捺蠢霞确波秘禳麓基豁纤维在整个绥嚣鏊羧疆皮爱内显爨l ” 分密集。山此看束，腹毛日纤黾虫的棘嘏基部纤维具有相似的缩构组成，但电鼠 示m 种水平的特性。细胞形态发生中，位于前、后额腹横棘毛舔基区的纤毛嚣及 矮墓邦纡维t 煞消失，奠i 、右缘辣毛原基区中发缘棘毛綦郏横纤维茸先退化解体， 这一过程与原撼隧的分化密切联系，并鼠老棘蔼及其基部纤维对原基的形成和分 纯习糍其奇镪滚黄献；焚谴纾毫嚣及葵耩帮终缀在瘦爱缎瓣凌态黢罄貔 ；l 聿涵较长， 它们可能足伴随着老结构逐渐失去功能而退化瓯解的。( 圈家自然科学撼余资助 j 嚣目，n o 。3 0 2 7 0 1 6 0 ，3 0 4 7 0 2 0 1 ) 关键词：腹毛e 纤毛虫皮层细胞骨架微管非纤亳区骨架纤毛器骨架 旁檠辫疆绎维生毽去貘季j 援电镜拳透骞拿电镶拳教求鬣素 分化 4 堡! 兰垡鲨兰 塑墨塑坚墨当塑些星型些量堡壁! ! 丝丝坌些堕竺塑 s t u d i e so nt h ec o r t i c a l c y t o s k e l e t o na n ds t r u c t u r e d i f f e r e n t i a t i o ni nh y p o t r i c h o u sc i l i a t e s m a j o r ：z g 妞o r i e n t a t i o n ： g r a d u a t e ：乙b 】ih l l j d i r e c t o r ： a b s t r a c t p r o t o z o 。o 1 o a v d q q 址e 止a 凸2 t h ec o r t i c a lc y t o s k e l e t o ni st h em a j o r c o m p o n e n t o fc i l i a t ec o r t e x ，w h o s es h a p e a n ds t r u c t u r ep l a y sa ni m p o r t a n tr o l ei nr e v e a l i n gt h ec e l ls t r u c t u r em o d eo f c i l i a t e t o d e s c r i b ei t sc o m p l e x i t y , p h y s i o l o g i c a lf u n c t i o n a sw e l la st h er e l a t i o n s h i pw i t ho t h e r c e l ls t r u c t u r e ，t h r e es p e c i e so fc i l i a t ei n c l u d i n ge u p l o t e sg r a c i l 括，e u p l o t e se l e g a n s a n d o n y c h o d r o m u sq u a d r i c o r n u t u s w e r eu s e d b ym e a n so f s c a n n i n g e l e c t r o n m i c r o s c o p y a n dn o n - i o n i c d e t e r g e n te x t r a c t i o n ，t h e f o r m a t i o na n dl o c a t i o no f t h r e e d i m e n s i o nn e t w o r k c o m p o s e d o f n o n c i l i a t e d r e g i o n a l s k e l e t o n ，c l i a t u r e s k e l e t o na n ds k e l e t o n a s s o c i a t e df i b e r sw a sd e t e c t e d ；b yu s eo ft r a n s m i s s i o ne l e c t r o n m i c r o s c o p y , t h eu l t r a s t r u c t u r eo f c o r t i c a lc y t o s k e l e t o ni ni n t e r p h a s ea n dt h a tu n d e rt h e t r e a t m e n to fc o l c h i c i n e sw a s o b s e r v e d ；b y u s eo f p r o t a r g o lt e c h n i q u e ，t h e d i f f e r e n t i a t i o no fm a n yk i n d so fc i l i a t u r ea n dc i l i a t u r e a s s o c i a t e df i b e r sw a sd i s c u s s e d t h er e s u l ta r ea sf o l l o w s ： 1 - s e m o b s e r v a t i o n so nt h ec o r t i c a l c y t o s k e l e t o no fe u p l o t e sg r a c i l ba f t e r b i o c h e m i c a ld e - m e m b r a n e b ym e a n s o f n o n i o n i cd e t e r g e n te x t r a c t i o na n d s c a n n i n ge l e c t r o nm i c r o s c o p y 。 i tw a ss h o w nt h a tt h ec o r t i c a lc y t o s k e l e t o ni sat h r e e - d i m e n s i o nn e t w o r kc o m p o s e d o f n o n c i l i a e d r e g i o n a ls k e l e t o n c i l i a t u r es k e l e t o na n ds k e l e t o n 。a s s o c i a t e df i b e r si n e u p l o t e sg r a c i l i s a l lk i n d so f t h es k e l e t o na l em a d e u po ft h ef i b e r sf o r m i n gf i b e r n e t ，l a y e r ，b a n d ，s h e e ta n d o t h e rs t r u c t u r a lu n i t s t h en o n c i l i a e dc o r t i c a ls k e l e t o ni s c o m p o s e do ft h es u r f a c ef i b e rn e ta n dt h es u b - p e l l i c u l a lf i b e rl a y e rl o c a t e di nt h e c o r t i c a lp e r i p h e r y t h ec i l i a t u r es k e l e t o n s ，i e a d o r a lz o n eo f m e m b r a n e l l e ss k e l e t o n ， p a r o r a lm e m b r a n e s k e l e t o na n df r o n t a l v e n t r a l t r a n s v e r s ec i r r is k e l e t o n ，a r el o c a t e di n 5 啦i j 学位论史 j | 复毛日纤毛虫的皮层细胞骨架技j l 构分化的1 i j 究 t h ec o r t e xa c c o r d i n gt ot h e i rc o r t i c o t y p ea n df o r ma l l e l e m e n t a r yp a r to ft h ev e n t r a l c y t o s k e l e t o n a l t h o u g h t h e s es k e l e t o n sm a n i f e s t e dd i f f e r e n t a p p e a r a n c e s ，t h e y p o s s e s s e di d e n t i c a ls t r u c t u r e ，n a m e l yaf u n c t i o n a lu n i tf o r m e db yt h ek i n e t o s o m e s ， c i l i a t u r eb r a c k e ta n ds k e l e t o n - a s s o c i a t e df i b e r s i tw a ss u p p o s e dt h a tt h ef i b e rn e t f o r m i n g t h er e g i o n a ls t r u c t u r e so nt h ec e l ls u r f a c em i g h tp l a yar o l ei nc o n n e c t i o no f t h es u r f a c ep a a sa n di nt h ei n t e r a c t i o nb e t w e e nt h ec e l la n di t se n v i r o n m e n t i ti st h e f i r s tt i m et os h o wt h ew h o l es t r u c t u r eo fa d o r a la n dv e n t r a lf i b e r n e t w o r k - s k e l e t o ni n e u p l o t eb ym e a n s o fb i o c h e m i c a ld e m e m b r a n et e c h n i q u e ，t h er e s u l ti n d i c a t et h a tt h e s h a p ea n da r r a n g e m e n t o fs i l v e r l i n es y s t e ni ne u p l o l e si si na c c o r d a n c ew i t ht h a to fi n t h es a m es p e c i e so f e u p l o t e s t h i sn e t w o r km a y d i v i d et h ec e l ls u r f a c ei n t od i f f e r e n t p a r t st of o r c e t h ep e l l i c l en e a rt h em i c r o t u b u l e - o r g a n d i ei n s i d et h ec e l lc l o s e r ，a sw e l l a st om a k et h ec o m m u n i c a t i o nb e t w e e nt h ec e l la n de n v i r o n m e n t p o s s i b l e t h e c i l i a t u r es k e l e t o nh a ss e v e r a lk n o w n f u n c t i o n s ：f i r s t ，t h ek i n e t o s o m a lb r a c k e tp l a ya r o l ei nt h ef o r m a t i o no f m i c r o t u b u l e - o r g a n i z i n g - c e n t e r ；s e c o n d ，t h e s k e l e t o n a s s o c i a t e df i b e r sm i g h tn o to n l yr e l a t i v et ot h ec o m m u n i c a t i o no fc i l i a t u r ei n s i d et h e c e i lb u th a r m o n i z et h ec i l i a t em o v e m e n t 。f o rt h es t r u c t u r ea n 莲n e 6 0 | l 。f 氇。e e l li s i nc l o s e r e l a t i o n s h i p ，t h e k i n e t o s o m a l c o m p l e xo fc i l i a t u r e i n e u p l o t e s a c ta s m i c r o t u b u l e o r g a n i z i n g c e n t e r t ob o t hc i l i a t u r eb r a c k e ta n ds k e l e t o n w a s s o c i a t e df i b e r s a n di s k e yt o c i l i am o v e m e n t 。t h et e m t e c h n i q u ec o u l do n l ys h o ws o m el o c a l s t r u c t u r e s i n c l u d i n gs u b p e l l i c l em i c r o t u b u l el a y e r ，c i l i a t u r ea n dc i l i a t u r es k e l e t o n ， f u r t h e r m o r e ，t h ec i l i a t ec e l l ，e s p e c i a l l yt h ec o r t e xo nt h es u r f a c eo fw h i c hi s s o c o m p l e x ，i ti s m o s tv a l u a b l ei nt h i sp a p e rt ou s es e v e r a lm e t h o dt or e v e a lt h e3 d s t r u c t u r eo fc o r t i c a l c y t o s k e l e t o n i n e u p l o t e s f o r t h ef i r s tt i m e i nc i l i a t u r e e y t o s k e l e t o n ，t h ek i n e t o s o m a lc o m p l e xm i g h tp l a yar o l eo fm i c r o t u b u l e - o r g a n i z i n g c e n t e ri ut h ef o r m a t i o no f c i l i a t u r eb r a c k e ta n ds k e l e t o n - a s s o c i a t e df i b e r sa n de t c 2 u l t r a s t r u c t u r a lo b s e r v a t i o n so nt h ec o r t e xa n de y t o s k e l e t o no f e u p l o t e se l e g a n t 1 or e v e a lt h es h a p eo fc i l i a t ec y t o s k e l e t o na n di t sr e l a t i o n s h i pw i t ho t h e rk i n d so f 6 堕! 里丝堕墨堕墨望堑垂皇堕些星型塑堂型丝! ! 竺塑坌垡堕翌! 塞 c e l l u l a rs t r u c t u r e ，t h es t r u c t u r eo f e u p l o t s ee l e g a n tt r e a t e dw i t hc o l c h i c i n e a n d t h ec e l l i n i n t e r p h a e s w e r eo b s e r v e d b y m e a n so ft r a n s m i s s i o ne l e c t r o n m i c r o s c o p y ， k i n e t o s o m a l do nt h e e x p e r i m e n t o f e u p l o t e se l e g a n tb y s c a n n i n g e l e c t r o n m i c r o s c o p y t h e r e s u l ts h o w st h a tt h ep e l l i c l eo fe u p l o t e si ni n t e r p h a s ei sm a d eu po f p l a s m am e m b r a n e ，o u t e ra n di n n e rm e m b r a n eo f a l v e o l u s t h e r ea r et w ok i n d so f m i c r o t u b u l el a y e r s ，o n eo c c u p ys u b - d o r s a l c o r t i c a l p e l l i c l ec o m p o s e do fe v e r yt h r e e m i c r o t u b u l e sa r r a n g i n gi n t e r v a l y , a n dt h eo t h e rl o c a t ea ts u b v e n t r a l c o r t i c a l 。p e l l i c l e c o m p o s e d o f s i n g l e m i c r o t u b u l ea r r a n g i n g i n t e r v a l y t h e a z ml o c a t i n g i n c i l i a - r e g i o n a l c o r t e xi sc o m p o s e do f t h r e el i n e so fk i n e t o s o m e sc o n n e c t i n gw i t he a c h o t h e r , u n d e rt h e k i n e t o s o m e t h e r ea f eb r a c k e t s c o n n e c t i n gw i t hp o s t e r i o r c i l i a m i c r o t u b u l eo rm i c r o t u b u l eb u n d l e m o r e o v e r , t h es p i n d l ee x t r u s o m e sc a na l s ob e e n s e e nu n d e rt h ep e l l i c l e c o m m o n l y , m i t o c h o n d r i o n sw i t hc h a r a c t e ro fd i s t i n c to u t e r m e m b r a n ea n dc r i s t a e sf o r m i n gi n t e r l a c e dt u b e si nt h ei n n e rm e m b r a n es p r e a do v e r t h ea r e aw h e r ec o r t i c a lm i c r o t u b u l ec o n g r e g a t e c o m p a r i e dw i t hs t r u c t u r eo fp e l l i e l e ，t h a to fm i c r o t u b u l e o r g a n e l l e sb e n e a t h t h e p e l l i c l e a n dr e l a t i v eo r g a n e l l e so ft h ee u p l o t e sc e l lh a v ec h a n g e do b v i o u s l ya f t e r t r e a t e dw i t hc o l c h i c i n e ，t h em i e r o t u b u l e sb e n e a t hp e l l i c l ea p p e a rf r o mc o m p a c tt o l o o s e ，i ts u g g e s t st h a t c o l c h i c i n e p l a y s ar o l ei n s e p e r a t i n gt h ed i s a g g r e g r a t i n g m i c r o t u b u l ef r o mt h ec y t o p l a s m t h ec o r t i c a lm i c r o t u b u l ec a ns t i l l b es e e nc l e a r l y a f t e rc o l c h i c i n et r e a t m e n t ，t h i sm a yb ea c c o u n tf o rt h ed i s t i n c td i f f e r e n ta p p e a r a n c e b e t w e e nt h ed i s a g g r e g r a t i n gm i c r o t u b u l ea n d t h ec y t o p l a s m b e s i d e st h em i c r o t u b u l e s b e n e a t hp e l l i c l ea n dc i l i a t u r e m i e r o t u b u l e s k e l e t o n ，t h e r es t i l le x i s tm a n yo t h e rk i n d s o fm i c r o t u b u l e 1 i k es k e l e t o nw h i c hi s d i f f i c u l tt oo b s e r v eb yc o m m o nm e t h o d n o r m a l l y ，t h em i c r o t u h u l e - o r g a n e l l e s ，o r g a n e l l e a s s o c i a t e d m i c r o t u b u l e sa n dt h e c y t o p l a s m c o m b i n e t i g h t l y , t h e s e f o r mt h e e l e m e n t a r y s t r u c u r et o p e r f o r m p h y s i o l o g i c a lf u n c t i o ni nt h ee u p l o t e s c e i l a f t e rt r e a t e dw i t hc o l c h i c i n e ，t h e b o r d e ro fc r i s t a ea n dt h e o u t l i n eo f 7 博l 学位论殳 蝮毛h 钎毛虫的j 史层细胞骨架技j e 绌构分化的研究 c i t o c h o n d r i o na p p e a r si n d i s t i n g u i s h a b l e ，f u r t h e r m o r e ，s o m ec i t o c h o n d r i o nb e g a nt o d i s a g g r e g r a t e t h i sm a yb ea c c o u n tf o r t h ec o l c h i c i n et r e a t m e n ta f f e c tt h en a t u r a l f u n c t i o no fm i c r o t u b u t e o r g a n e l l e s ，i tc a nn o tb ee x p l a i n e da st h er e s t i n g c e l li n e n e r g yu s a g e a n d s t o r a g ec o n d i t i o n t h es p i n d l ee x t r u s o m e sa r ee j e c t a b l eo r g a n e l l e sc o n c e r n e dw i t ho r a l c o r t i c a l c i l i a t u r ei n e u p l o t e sc e l l a f t e r t r e a t e dw i t hc o l c h i c i n e ，t h ec h a r a c t e ro fs p i n d l e e x t r u s o r u e sn e a rt h ea z mi n c l u d i n gn u m b e r , s h a p e a n di n c l u s i o ne l c s h o wd i f f e r e n t a p p e a r a n c et ot h a to fi nt h en a t u r a lc o n d i t i o n ，t om e e t t h ed e m a n do fi n c r e a s i n gt h e n u m b e ro fs p i n d l ee x t r u s o m e s a t s p e c i f i ca r e a ，o r g a n e l l ep r e c u r s o r s i n a d j a c e n t c y t o d i a s ma r em o v e d t ot h ep l a c e b e s i d e st h ef u n c t i o n sr e v e a l e db e f o r e ，t h es p i n d l e e x t r o s o n l e sm a yb er e g u l a t et h ec i l i a t u r em o v e m e n t ，o r r e l e v a n tw i t ht h em o v e m e n t o f t h ec i l i a _ w h i c ha tt h e s i t eo fs u b - a z mm e m b r a n e t h em u t a t i o n o f s p i n d l e e x t r u s o m e sw o u l da f f e c tt h e c i l i am o v e m e n to fm i c r o t u b u l e o r g a n d i e 3 t h ed i f f e r e n t i a t i o n o fc o r t i c a lc i l i a t u r e sa n db a s e - a s s o c i a t e df i b e r si n o n y c h o d r o m u sq u a d r i c o r n u t u s t h ed i f f e r e n t i a t i o no fc i l i a t u r e sa n dt h e i rb a s e a s s o c i a t e df i b e r sd u r i n ga s e x u a l d i v i s i o no fo n y c h o d r o m u sq u a d r i c o r n u t u sw a so b s e r v e db yu s i n gp r o t a r g o ls t a i n i n g t e c h n i q u e d u r i n ga s e x u a ld i v i s i o no fd q u a d r i c o n u t u s ，a z ma n dp m o fp r o s t e ri s f o r m e da tt h es i t ew h e r et h eo l do r a ls t r u c t u r e si sl o c a t e da n dt h e r ei sn od e t e c t a b l e d i s i n t e g r a t i n g o r d e g e n e r a t i n gs i g n s o fo l d m a r g i n a l c i r r i d u r i n g t h e e a r l y m o r p h o g e n e t i cp h a s eo fn e w l e f ta n dr i g h tm a r g i n a lc i r r i ，ap h e n o m e n o nd i f f e r e n t f r o mt h a tf o u n di ns o m ek n o w no x y u i c h i d s t h ec i r r ib a s e - a s s o c i a t e df i b e r so fn g u a d r i c o n u t u si n c l u d e a n t e r i o ra n dp o s t e r i o rl o n g i t u d i n a lf i b e r s ，t r a n s v e r s ef i b e r sa n d r a d i a t i n gf i b e r s t h ea p p e a r a n c eo f t h e s ef i b e r sa r es i m i l a rt ot h a to b s e r v e di ns o m e k n o w nc i l i a t e s ，e x c e p tf o rt h a to ft h et r a n s v e r s ef i b e r so fl e rm a r g i n a lc i r r i w h i c h d i f f e r sf r o mt h ek n o w nc i l i a t e si nl o c a t i o n d u r i n gm o r p h o g e n e s i s ，t h eo l dc i l i a t u r e s t o g e t h e rw i t ht h e i rb a s e a s s o c i a t e d f i b e r sb e g i nt od e g e n e r a t ea n dd i s a p p e a ri nt h e 8 博i 。学位论文腹毛上j 纤毛虫的皮层纠胞骨= ! 1 1 5 及j c 结构分化的研究 p r i m o r d i a l z o n eo fn e wa n t e r i o ra n d p o s t e r i o r f t vc i r r i t h eb a s e a s s o c i a