（衡水万卷）高三生物二轮复习 作业卷（三十四）微生物的培养与应用（含解析）.doc

微生物的培养与应用考试时间：90分钟 考试范围：微生物的培养与应用姓名：_班级：_考号：_一 、选择题（本大题共7小题。在每小题给出的四个选项中，只有一个选项是符合题目要求的）1.（2015江苏高考真题）做“微生物的分离与培养”实验时,下列叙述正确的是（ ）a. 高压灭菌加热结束时,打开放气阀使压力表指针回到零后,开启锅盖b. 倒平板时,应将打开的皿盖放到一边,以免培养基溅到皿盖上c. 为了防止污染,接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落d. 用记号笔标记培养皿中菌落时,应标记在皿底上2.mrsa菌是一种引起皮肤感染的“超级细菌”，对青霉素等多种抗生素有抗性。为研究人母乳中新发现的蛋白质h与青霉素组合使用对mrsa菌生长的影响，某兴趣小组的实验设计及结果如下表。下列说法正确的是( )a.细菌死亡与否是通过光学显微镜观察其细胞核的有无来确定b.第2组和第3组对比表明，使用低浓度的青霉素即可杀死mrsa菌c.实验还需设计有2g/ml青霉素做处理的对照组d.蛋白质h有很强的杀菌作用，是一种新型抗生素3.下列有关微生物筛选的叙述中，不正确的是 （ ）a.用全营养lb培养基筛选大肠杆菌 b.用高nacl的培养基筛选抗盐突变菌株c.含酚红的尿素培养基筛选鉴别出分解尿素的菌株 d.利用高温条件筛选耐热的taq细菌4.（2015绵阳模拟）生物学是一门实验性很强的科学下列关于生物学实验的叙述不正确的是（）a为确定选择培养基的筛选功能，应设置一个接种无菌水的选择培养基作对照组b植物细胞质壁分离及复原实验与血红蛋白的释放过程依据的主要实验原理相似c探究生长素类似物促进插条生根的最适浓度时，先进行预实验可降低实验成本d用平板划线法纯化大肠杆菌时，灼烧接种环的次数多于在培养基上划线区域数5.微生物接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法。下列关于这两种接种方法的叙述中，不正确的是 （ ）a.都只能用于固体培养基接种 b.都能用于微生物的计数c.接种培养后均可获得单菌落 d.接种工具使用后需要灭菌6.下列关于微生物培养的叙述，不正确的是 ( )a.获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌入侵 b.高温灭菌目的是杀死微生物的细胞.孢子.芽孢c.划线分离可在培养基上获得均匀分布的单菌落d.稀释涂布平板法易获得单菌落和计数活菌数目7.某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。下列叙述正确的是a. 培养基分装到培养皿后进行灭菌b. 转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线c. 接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养d. 培养过程中每隔一周观察一次二 、填空题（本大题共5小题）8.（2015江苏高考真题）(8 分)人工瘤胃模仿了牛羊等反刍动物的胃,可用来发酵处理秸秆,提高秸秆的营养价值。为了增强发酵效果,研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株,并对其降解纤维素能力进行了研究。 请回答下列问题:(1)在样品稀释和涂布平板步骤中,下列选项不需要的是 (填序号)。酒精灯 培养皿 显微镜 无菌水 (2)在涂布平板时,滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多的原因是 。(3)向试管内分装含琼脂的培养基时,若试管口粘附有培养基,需要用酒精棉球擦净的原因是 。(4)刚果红可以与纤维素形成红色复合物,但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。 研究人员在刚果红培养基平板上,筛到了几株有透明降解圈的菌落(见右图)。 图中降解圈大小与纤维素酶的有关。 图中降解纤维素能力最强的菌株是 (填图中序号)。(5)研究人员用筛选到的纤维素酶高产菌株 j1 和 j4,在不同温度和 ph 条件下进行发测得发酵液中酶活性的结果见下图,推测菌株 更适合用于人工瘤胃发酵,理是 。9.【生物-选修1：生物技术实践专题】（2015长沙校级模拟）请分析回答下列有关生物技术实践的问题：（1）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，倒平板时，需要等待平板冷却_后，将平板倒过来放置微生物接种的方法，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，后者是将菌液进行一系列_的，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养菌落是在固体培养基上由_细胞繁殖而来的形态可见的子细胞群体（2）对月季进行组织培养时，适宜花药培养的时期是_期，为确定花粉是否处于该时期，镜检时最常用的染色方法是_（3）测定亚硝酸盐含量的原理是，在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与_生重氮化反应后，与n1萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料（4）用萃取法提取胡萝卜素的实验中，要将胡萝卜进行粉碎和干燥的目的是_；得到的萃取液需要用_方法进行浓缩10.大肠杆菌是人和动物肠道中普遍存在的一种煮性厌氧菌，在无氧条件下，大肠杆菌通过发酵能将葡萄糖转变为多种有机酸并产生co2等气体。某研究机构使用“滤膜法”对受污染的河流水体进行了大肠杆菌活菌数目的测定。请回答：（1）研究人员向葡萄糖蛋白胨培养液中加入适量的溴麝香草酚蓝水条件下培养一段时间后可观察到溶液颜色的变化为 ，并且在倒置的小管中出现 。（2）测定大肠杆菌活菌数目时，需制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，该培养基中为细菌提供氨源的物质是 。为了鉴别大肠杆菌菌落，可向培养基中加入 作为指示剂。（3）为了便于统计污染严重的水体中活菌的数目，需将水样进行适当稀释，例如取水样1ml加入无菌水 ml制备稀释倍数为102的稀释液，并照此依次制备更高倍数的稀释液。每个稀释倍数的菌液取10ml进行过滤，然后将滤膜放置在培养基上。为了防止杂菌污染，稀释、过滤和旋转滤膜等操作都应该在 附近进行。（4）将放有滤膜的平板置于适宜条件下培养，每隔12h统计一次菌落数目，应选取菌落数目 时的记录作为结果。如果经过培养后稀释倍数为102的4个平板上菌落数分别为43、47、42、48，那么每升河水中约含大肠杆菌 个。用这种方法测定的细菌数量比实际活菌数量要少，这是因为 。11.（每空1分，共8分）植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列问题:（1）分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将 分解成 。（2）在含纤维素的培养基中加入刚果红（cr）时，cr可与纤维素形成 色复合物。用含有cr的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的 。 （3）为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基（成分见下表）：酵母膏无机盐淀粉纤维素粉琼脂cr溶液水培养基甲+-+-+培养基乙+-+注：“+”表示有，“”表示无。据表判断，培养基甲 （填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是 ；培养基乙 （填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是 。12. 回答下列关于微生物培养等问题。高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如图所示。(1)从用途上来说，号培养基属于 培养基；从物理状态上来说号培养基属于固体培养基，配制时一般要加入 。(2)进行过程的目的是 ，过程是为了 ；过程所使用的接种方法是 。稀释涂布平板(3)、号培养基配制和灭菌时，灭菌与调节ph的先后顺序是 。(4)一般对配制的培养基采用 法灭菌，对接种环采用 灭菌，其中“灭菌”是指 。(5)在高温淀粉酶运用到工业生产前，需对该酶的 和 进行测定。0.2016万卷作业（三十四）答案解析一 、选择题1.【答案】d【解析】压力表指针回零后，灭菌锅内温度有时还会在100以上，在降压后再稍停一会，等灭菌物温度下降后再出锅，a项错误；倒平板时用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖，轻轻摇匀，b项错误；接种环经火焰灭菌后趁热挑取菌落会杀死菌落，应冷却后挑取菌落，c项错误；接种后的培养皿是倒置的，所以用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上，d项正确。2.【答案】c3.【答案】a4.【答案】a分析：微生物的筛选与分离需要使用选择培养基血红蛋白的释放的原理是细胞吸水膨胀破裂探究生长素类似物促进插条生根的最适浓度时需要进行预实验平板划线法接种时第一次划线前与每次划线后都需要灼烧灭菌解答：解：a、为确定选择培养基的筛选功能，应设置在普通培养基上接种混杂微生物作为对照组，a错误；b、植物细胞质壁分离及复原实验与血红蛋白的释放过程依据的主要实验原理都是利用了细胞在低渗溶液中吸水膨胀的原理，b正确；c、探究生长素类似物促进插条生根的最适浓度时需要进行预实验为正式实验摸索实验条件，c正确；d、平板划线法接种时第一次划线前与每次划线后都需要灼烧灭菌，d正确故选：a点评：本题主要考查生物技术实践中的相关知识，意在强化学生对所学知识的识记、理解与综合运用5.【答案】b6.【答案】c【解析】本题考查微生物培养知识，属于考纲识记层次。划线分离将聚集的菌株稀释分散到培养基表面，得到由一个细胞繁殖的子细胞群体，其不是均匀分布。7.【答案】b二 、填空题8.【答案】（1） （2）培养基表面的菌悬液会出现积液，导致菌体堆积，影响分离效果 （3）避免培养基污染棉塞 （4）量与活性 （5）j4 发酵过程中会产热和产酸，j4菌株在较高温度和酸性环境下酶的活性更高【解析】（1）稀释涂布平板法中，培养基位于培养皿中，无菌水用于稀释，涂布在酒精灯火焰旁进行，以免杂菌污染，所以该过程不需要使用显微镜。（2）若涂布平板时，滴加到培养基表面的菌悬液量过多，则会出现积液，导致菌体堆积，影响分离效果。（3）若试管口粘附有培养基，则需用酒精棉球擦净，以免培养基污染棉塞。（4）有透明降解菌说明纤维素被纤维素酶催化降解，则降解圈大小与纤维素酶的量与活性有关。降解圈越大，说明降解纤维素能力最强，由图可知，菌落周围的降解圈最大，说明降解纤维素能力最强 。（5）由于发酵过程中会产热和产酸，j4菌株在较高温度和酸性环境下酶的活性更高，所以菌株j4更适合用于人工瘤胃发酵。9.考点：微生物的分离和培养；从生物材料中提取某些特定成分；植物的组织培养 分析：筛选和分离目的微生物常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法，分离微生物的一般步骤是：土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株花药组织培养的取材应通过镜检选用单核靠边期的花粉，成功率最高在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸 生重氮化反应后，与n1萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料胡萝卜素的提取常用萃取法，提取流程为：胡萝卜粉碎干燥萃取过滤浓缩胡萝卜素解答：解：（1）制作培养基倒平板时应该等待平板冷却凝固（50）后倒置在进行稀释涂布平板法接种操作之前应该讲菌液进行梯度稀释菌落是固体培养基上由单个细胞繁殖而来的形态可见的子细胞群体（2）花药组织培养的取材应通过镜检选用单核靠边期的花粉，成功率最高镜检时最常用的染色方法是醋酸洋红法（3）在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸 生重氮化反应后，与n1萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，据此可以使用比色法测定亚硝酸盐含量（4）用萃取法提取胡萝卜素的实验中，要将胡萝卜进行粉碎和干燥的目的是使原料与有机溶剂充分接触，增大溶解度浓缩时需要将得到的萃取液需要用蒸馏方法除去萃取剂故答案为：（1）凝固（50） 梯度稀释 单个（2）单核 醋酸洋红法（3）对氨基苯磺酸 （4）使原料与有机溶剂充分接触，增大溶解度 蒸馏点评：本题综合考查了生物技术实践的相关知识，意在强化学生对全部教材内容的识记、理解与运用10.【答案】（1）由蓝变绿再变黄 气泡（2）牛肉膏和蛋白胨 伊红美蓝（3）9 酒精灯火焰（4）稳定 4.5105 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的是一个菌落【命题立意】本题考查细胞呼吸、微生物的培养、鉴定和计数的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力。【解析】（1）二氧化碳可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄，所以研究人员向葡萄糖蛋白胨培养液中加入适量的溴麝香草酚蓝水条件下培养一段时间后，由于大肠杆菌进行发酵产生了co2，可观察到溶液颜色的变化为由蓝变绿再变黄，而且在倒置的小管中出现气泡。（2）培养基中应含有水、无机盐、碳源和氮源，牛肉膏和蛋白胨中都含有n元素，能为细菌提供氨源。了鉴别大肠杆菌菌落，可向培养基中加入伊红美蓝作为指示剂，进行鉴别。（3）由于需要制备稀释倍数为102的稀释液，所以取水样1ml加入无菌水9ml，并照此依次制备更高倍数的稀释液。为了防止杂菌污染，稀释、过滤和旋转滤膜等操作都应该在酒精灯火焰附近进行。（4）将放有滤膜的平板置于适宜条件下培养，每隔12h统计一次菌落数目，应选取菌落数目稳定时的记录作为结果。如果经过培养后稀释倍数为102的4个平板上菌落数分别为43、47、42、48，那么每升河水中约含大肠杆菌（43