DNA(质粒)-浓缩方法.pdf_第1页
全文预览已结束

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

DNA 质粒质粒 浓缩方法浓缩方法 步骤步骤 1 加入0 1倍体积的3M的醋酸钠 pH5 2 和0 7倍体积的异丙醇 室温10min 2 室温下高速离心10分钟 底部可见白色的DNA沉淀 弃去上清 3 加入1 mL70 乙醇 高速离心5分钟 弃去上清 4 空气干燥20分钟 加入适量 50 l Endofree Elution Buffer重新溶解质粒DNA 注 注 沉淀 DNA时 醋酸钠和异丙醇一定要用常温的 否则盐可能也被沉淀下来 如果提取的不是特别微量的样品 乙醇或异丙醇沉淀的时间最好不要太长 因为过长时 间的沉淀会造成沉淀中的盐分升高 影响 PCR 和酶切 个人个人经验经验 a genomic DNA 2V乙醇 0 1V 3M NaAc 室温 10min plasmid 碱裂解法 2V乙醇 1V 异丙醇 室温 10min b 低温有助于低丰度 小片段沉淀 因此可以据具体情况 20 沉淀 但沉淀的时间最好不要 太长 事实上长时间不会对沉淀量有质的改变 因此结合保证质量和提高效率两大原则 不要选择长时间沉淀 c 当室温静置片刻后离心 看不见沉淀 可以
人人文库> 全部分类> 行业资料 > 管理策划

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论