河北省唐山市开滦第二中学高中生物 2.2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数导学案 新人教版选修1(1).doc

河北省唐山市开滦第二中学高中生物 2.2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数导学案 新人教版选修1班级： 姓名： 小组： 【学习目标】1、研究培养基对微生物的选择作用，进行微生物数量的测定。2能利用选择培养基分离细菌，运用相关技术解决生产生活中有关微生物的计数。【重点难点】 重点：能利用选择培养基分离细菌难点：运用相关技术解决生产生活中有关微生物的计数。【自主学习】 一、研究思路11筛选菌株 (1)实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于 生长的条件(包括营养、温度、ph等)，同时 或 其他微生物生长。 (2)选择培养基：在微生物学中，将允许 种类的微生物生长，同时 和 其他种类微生物生长的培养基，称作选择培养基。 1. 2 统计菌落数目（1）测定微生物数量的常用方法有 和 。（2）稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目的原理当样品的 足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个 。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在 的平板进行计数。此外，测定微生物数量的常用方法还有 直接计数。 1. 3 设置对照设置对照的主要目的是排除实验组中 对实验结果的影响，提高实验结果的 。例如为了排除培养基是否被杂菌污染了，需以培养 的培养基作为空白对照。二、实验设计21 实验设计的内容包括实验方案、 、实施步骤和 等。22实验流程：配制土壤溶液-系列稀释-涂布平板与培养-菌落计数23 土壤微生物主要分布在距地表 的近中性土壤中，约 为细菌。24 分离不同的微生物采用不同的稀释度，其原因是不同 不同，其目的是保证获得菌落数在 之间、适于计数的平板。细菌稀释度为 ，放线菌稀释度为 ，真菌稀释度为 。25 培养不同微生物往往需要不同培养温度。细菌一般在 培养12d，放线菌一般在2528培养 d，霉菌一般在 的温度下培养 d。26 在菌落计数时，每隔 h统计一次菌落数目。选取菌落数目 时的记录作为结果，以防止因培养 而导致遗漏菌落的数目。27菌落的特征包括 等方面。29 实验过程1）取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要 2）应在火焰旁称取土壤 g。将称好的土样倒入盛有90ml无菌水的 中，塞好棉塞。3）在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在 旁进行。4）实验时要对培养皿作好标记。注明 、培养时间、稀释度、 等。3结果分析与评价31对分离的菌种作进一步的鉴定，还需要借助 化学 的方法。32在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的 将尿素分解成了 。氨会使培养基的碱性 ，ph 。因此，我们可以通过检测培养基 变化来判断该化学反应是否发生。33在以 为唯一氮源的培养基中加入 指示剂。培养某种细菌后，如果ph升高，指示剂将变 ，说明该细菌能够 。实验方案土壤中尿素分解菌的分离与计数分离筛选微生物的原理有利于目的菌株生长抑制或阻止其他微生物生长人为条件微生物计数方法与原理稀释涂布平板法显微镜直接计数对照设置与重复设置实验设计实验操作结果与分析（三）课堂总结、点评【 【问题生成】 同学们，通过你的自主学习，你还有哪些疑惑，请把问题填写在下面【师生互动、问题探讨】1. 土壤微生物种类最多、数量最大的原因是什么？2.如何从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数？2. 为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度？3.测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围相同吗？【课堂小结与反思】【自我检测】2下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是 akh2po4、na2hp04、mgs047h20、葡萄糖、尿素、琼脂、水 bkh2po4、na2hp04、mgs047h20、葡萄糖、琼脂、水 ckh2po4、na2hp04、mgs047h20、尿素、琼脂、水 dkh2po4、na2hp04、mgs047h20、牛肉膏、蛋白胨琼脂、水； 3.某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234，那么每克样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1ml)( )a2.34108 b2.34109 c234 d23.44.在做分离分解尿素的细菌实验时，a同学从对应106培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。a同学的结果产生原因( ) 由于土样不同 由于培养基污染 由于操作失误 没有设置对照a b c d6.下列关于从土壤中分离细菌的操作步骤中，正确的是 土壤取样 称取10g土壤取出加入盛有90ml无菌水的锥形瓶中 吸取0.1ml进行平板涂布 依次稀释至101、102、103、104、105、106、107稀释度a b c d7.下列关于测定土壤中细菌数量的叙述，正确的是 a一般选用103107倍的稀液分别涂布 b测定放线菌的数量，一般选用103、lo 4和105倍稀释 c测定真菌的数量，一般选用103、104和105倍稀释 d当第一次测量某种细菌的数量，可以将101107倍的稀释液分别涂布到平板上培养8.统计菌落数目一般用稀释涂布平板法，当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个 ，来源于样品稀释液中的一个 。计数时一般选择菌落数在 的平板计数。13.在做本课题实验时，一位同学在稀释倍数为106的培养基中涂布了3个平板，统计的菌落数分别为21、212和256，该同学以这3个平板上菌落数的平均值163作为统计结果。你认为这一结果是否接近真实值?如果需要改进，如何改进?14.在进行操作本课题实验时应特别注意： 15在做本课题实验时，甲同学筛选出的菌落与其他同学不同，并且他在设计实验时并没有设置对照。思考下列问题： (1)你认为出现甲同学这种结果的原因可能是什么?(2)要帮助甲同学排除可能影响实验结果的因素，需要设置 ，实验方案有两种：一种方案是可以由其他同学用与甲同学 进行实验，如果结果与甲同学一致，则证明甲同学 ，如果结果不同，则