强饲法测定饲料养分(DM和CP)表观代谢率.doc

强饲法测定饲料养分（DM和CP）表观代谢率摘要：为测定家禽对配合饲料中养分的表观代谢率，本实验以AA鸡为试验对象，采用消化实验中的全收粪法测定配合饲料的表观代谢率。试验分组进行，每组四人，两只鸡，分别对饲料和排泄物（粪尿混合）中的养分做两次平行试验进行测定。测的结果：DM的表观代谢率为78.76%，CP的表观代谢率为72.17%。根据测定结果可知，两者的表观代谢率都较高。关键词：AA鸡 消化实验 全收粪法 DM CP 配合饲料 排泄物 表观代谢率1引言国际上通常采用1864年，德国Weende试验站的Hanneberg 提出的常规饲料分析方案，即概略养分分析方案(Feed Proximate Analysis)，将饲料中的养分分为六大类，如下所示： 水分饲料 无机物质（粗灰分或矿物质） 干物质 含氮化合物（粗蛋白） 有机物质 乙醚浸出物（粗脂肪） 无氮化合物 粗纤维 碳水化合物 无氮浸出物消化实验可用图示剖分说明： 消化道消化液 离体消化实验人工消化液消化实验 尼龙袋法 肝门收粪法 全收粪法 体内消化实验 回肠末端收粪法 内源指示剂法指示剂法 外源指示剂法 DM：干物质，即除去初水和吸附水的饲料，是比较各种饲料所含养分多少的基础。CP：粗蛋白质，是常规饲料分析中用以估计饲料、动物组织或动物排泄物中一切含氮物质的指标，它包括了真蛋白质和非蛋白质含氮物两部分。非蛋白质含氮物包含游离氨基酸、硝酸盐、胺等。表观代谢率%=（饲料养分排泄物养分）饲料养分100%2 材料与方法 2.1 试验时间与地点本试验是在2011年12月26日至28日在畜牧实验站及动科实验室进行。 2.2 试验材料 配合饲料80g，体重在1.0Kg左右，23日龄且空腹24h的AA鸡两只。 2.3 试验方法 2.3.1 预试期让动物适应试验饲粮和环境，排空肠道内原有的内容物，同时熟悉动物的排粪规律，了解采食量。2.3.2 正试期12月26日下午2:00强饲已绝食24h的试验鸡两只，每只强饲配合饲料40g,晚6:00,9:00各收粪一次；12月27日早8:00，下午2:00各收粪一次，收集24小时内的粪便，记录收粪量。采用肛门套收粪瓶的方法收集粪便，每组两只鸡的粪便混合在一起，待进行测定时混合均匀后分开。2.4 各养分含量的测定2.4.1 饲料中DM 与CP的含量测定12月27日下午收粪结束后进行，每组中四人两两一组做两次平行测定。DM：称取 2.5 克（准确至 0.1 毫克）风干样本于已知重量的称量瓶中，将称量瓶和风干样本一并放入 105烘箱中，并将称量瓶盖揭开少量，烘 5-6 小时后，移入干燥器中，并盖紧瓶盖，冷却30分钟，在电子分析天平中称重；再将盛有样品的称量瓶放入 105烘箱中烘 1 小时，用坩埚钳取出，放入干燥器中并盖紧称量瓶，冷却 30 分钟，称重，作记录。直至前后两次称重量的差数小于 0.002 克为恒重，进行计算。计算时，采用两次称重中的最低值，参加计算。 CP：（1）消化1）称取0.5g样本于 100ml 洗净烘干的凯氏烧瓶中，加催化剂（约一平勺）及浓硫酸 15ml，浸泡过液或加玻璃珠 2 粒，以防消化时液体溅出。 2）将凯氏瓶瓶放在有消化架的电炉上小火加热，等泡沫停止产生后，再加强火力，必要时经常转动烧瓶，使全部样品浸入硫酸内。继续加热消化，直至瓶内溶液澄清，消化才告完毕。 （约需 2-3 小时） ，应在毒气柜中进行） 。消化后于12月28日上午进行以下步骤的测定。 3）待烧瓶冷却后加蒸馏水约 20ml 摇匀，然后将烧瓶中溶液无损地转移到 100ml 洗净的溶量瓶中，用蒸馏水冲洗凯氏烧瓶5-6 次（约 10ml/次） ，洗液亦注入容量瓶内，冷却后，再用蒸馏水稀释至容量瓶刻度，混匀后供测定氮用。 （2）蒸馏：1）煮沸蒸气发生瓶中蒸馏水，并使蒸气洗涤蒸馏器。 2）用量筒量取 10 毫升 2%的硼酸溶液加入 150 毫升或 250 毫升三角瓶内，再加入甲红溴甲酚绿混合指示剂 2滴，置于蒸馏装置的冷凝管下，使管口浸入硼酸（H3BO4）溶液内。 3）用 10 毫升移液管量取 10ml 样本消化液，从蒸馏装置上的小玻杯中注入反应室，再用少量蒸馏水冲洗小玻杯（注意如注入蒸馏水过多则反应室温度较低，将使反应室内的液体溢出，使蒸馏结果偏低） ，将小玻杯上的棒状玻璃塞塞紧，使之不漏气。 4）用量筒量取10ml 饱和氢氧化钠溶液注入小玻杯中，小心地轻轻提起棒状玻塞，使氢氧化钠流入反应室内，将玻塞盖紧，加蒸馏水于小玻杯中，以防漏气。此时蒸气吹入反应室，氨气通过冷凝管而流入三角瓶中的硼酸溶液中，变色后再蒸馏 3 分钟。（3）滴定 先将微量滴定管准备妥当，装入HCl 标准液，进行滴定，至瓶中溶液由蓝色变成淡酒红色为止。2.4.2 排泄物中DM与CP的含量测定12月27日下午收粪结束后进行。将混合粪便平均分为两份，每组中四人两两一组做两次平行测定。DM与CP含量的测定除取样重不同外，其他步骤和饲料的测定相同。3 试验结果3.1 DM含量的计算干物质含量=(M2-M0)/(M1-M0)MO：培养皿恒重 110.7072gM1：饲料或排泄物及培养皿重 饲料中为113.2072g,排泄物中为179.59gM2：烘干后样品及培养皿重 饲料中为112.9762g ,排泄物中为123.9848g根据以上公式与数据计算得出DM（饲料）=90.76% DM（排泄物）=19.28%3.2 CP含量的计算 粗蛋白含量=6.250.014CVM(V1V2)C：盐酸标准滴定溶液浓度，0.04646mol/lV：滴定试样所用盐酸体积，ml 饲料中为3.24ml,排泄物中为4.75mlV1: 试样分解液蒸馏用体积，10.00mlV2:试样分解液总体积，100mlM:试样质量，g 饲料中为0.4548g,排泄物中为2.3953gCP(饲料)=28.96% CP（排泄物）=8.06%表观代谢率%=（饲料养分排泄物养分）饲料养分100%表观代谢率%（DM）=(90.76%19.28%)90.76%100%=78.76%表观代谢率%（CP）=（28.96%8.06%）28.96%100%=