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基础化学综合实验论文食品蔬菜中铁的含量的测定院 系 名称：化学工程学院 专 业 班级：应用化学08级1班 姓 名：汲传奇学 号：200804021028 同组人姓名：李争春 同组人学号：200804021027 组 号：11 指 导 教师：夏翠丽食品蔬菜中铁的含量的测定作者：汲传奇 单位：化学工程学院摘要本次试验我们采用邻二氮菲分光光度法对青椒及鸡蛋黄中铁的含量进行测定，方法简便、快速、准确. 食品中的金属元素，由于常与蛋白质、维生素等有机物结合成难溶或难以解离的物质，因此在测定前需要破坏有机结合体，释放出被测组分。通常采用有机物破坏法，在高温条件下加入氧化剂，使有机物分解。关键词分光光度法，邻二氮杂菲，铁含量，蔬菜前言一、实验目的 1. 学习样品的预处理方法。2. 综合运用所学知识，会用分光光度法测定铁的含量。3. 练习灵活运用各种基本操作的能力和查阅资料的能力。二、实验原理样品的处理：食品中的金属元素，由于常与蛋白质、维生素等有机物结合成难溶或难以解离的物质，因此在测定前需要破坏有机结合体，释放出被测组分。通常采用有机物破坏法，在高温条件下加入氧化剂，是有机物分解。其中碳、氧、氢等元素生成二氧化碳和水呈气体状态逸出，而被测的金属元素则会以氧化物或无机盐的形式残留下来。有机物破坏法又分为干法和湿法。本实验采用干法灰化法来对样品去处理。1.干法灰化法：以氧为氧化剂，在高温下长时间灼烧，使有机物彻底氧化分解，生成CO2和H2O及其他挥发性气体逸散掉，残留即灰分供检测，可分为直接灰化法，Ca(OH)2法、NaOH法等。直接灰化法（用于含铜、铅、锌、铁等样品中有机物的破坏）。固体样品（称重）灼烧500马福炉灰白色冷却加1：1盐酸2ml加热至澄清溶液转移至100ml容量瓶中，定容。NaOH法（含锡样）：称样+10NaOH 3ml蒸发皿水浴蒸干600灰化为白色冷却加5ml水蒸干加10ml浓盐酸溶解10ml转移至50ml容量瓶用1：1盐酸定容。2.分光光度法：（1）光度法测定的条件：分光光度法测定物质含量时应注意的条件主要是显色反应的条件和测定吸光度的条件。显色反应的条件有显色剂的用量，介质的酸度、显色时温度、显色时间及干扰物质的消除方法等；测量吸光度的条件包括入射光波长的选择、吸光度范围和参比溶液等。（2）二氮杂菲-亚铁络合物：邻二氮杂菲是测定微量铁的一种较好的试剂。在pH=29的条件下Fe2+ 离子与邻二氮杂菲生成稳定的橘红色络合物。在显色前，首先用盐酸羟胺把 Fe3+离子还原为 Fe2+离子，其反应式如下：2 Fe3+2NH2OHHCl2 Fe2+N2+2H2O+4H+2Cl-测定时，控制溶液酸度在pH=5左右较为适宜。酸度过高，反应进行较慢；酸度太低，则 Fe2+离子水解，影响显色。实验部分主要仪器与试剂主要仪器与设备：722型分光光度计，马福炉，电热炉，容量瓶，移液管，普通天平，电子天平，比色管，电子天平，烧杯，移液管，比色皿，漏斗及漏斗架等。试剂：400ug /ml铁标准溶液：准确称取3.456g 分析纯NH4Fe(SO4)212H2O，置于烧杯中用120ml 2mol/L盐酸溶解后移入1000ml容量瓶中，定容，摇匀。（全班配一份）20ug/ml 铁标准溶液：用移液管准确移取25ml 400ug /ml 的铁标准溶液于500ml容量瓶中，定容，摇匀。0.2%邻二氮杂菲溶液：准确称取邻二氮杂菲1.0g，置于烧杯中加热溶解后，移入500ml试剂瓶中，定容，摇匀。10%盐酸羟胺溶液：称取盐酸羟胺固体50.0g，用水加热溶解，转移至500ml试剂瓶中，定容，摇匀。1mol/L NaAc 溶液：称取NaAc固体68.0g，置于烧杯中溶解后，移入500ml试剂瓶中，定容，摇匀。0.4mol/LNaOH溶液：称取8.0gNaOH固体溶于烧杯中，冷却后移入500mL试剂瓶，定容，摇匀。（8人配一份） 2mol/l HCl溶液：用移液管准确移取浓盐酸83.0ml于500ml容量瓶中，定容，摇匀。（全班配一份） 1：1 HCl溶液：用移液管准确移取浓盐酸250ml于500ml容量瓶中，定容，摇匀。（全班配一份）实验用品：新鲜青椒，煮熟的鸡蛋黄实验步骤及结果样品的预处理取新鲜青椒，捣碎称取100g，置于蒸发皿中，放于烤箱烘干后在通风处中小火加热，直至不再冒烟为止，然后将其放入马弗炉内灰化，冷却后，加入1：1的盐酸，并用小火加热使其全部溶解，然后过滤，移入100ml的容量瓶中。定容，摇匀，备用。取鸡蛋黄称重13.3g置于蒸发皿中，捣碎，放于烤箱烘干后在通风处中小火加热，直至不再冒烟为止，然后将其放入马弗炉内灰化，冷却后，加入1：1的盐酸，并用小火加热使其全部溶解，然后过滤，移入100ml的容量瓶中。定容，摇匀，备用。条件实验吸收曲线的测绘准确移取5ml 20ug/ml铁标准溶液于50ml容量瓶中，加入2.0ml 10% 盐酸羟胺溶液，摇匀，冷却，2min后加入5ml 1mol/L NaAC 溶液和3ml 0.2%邻二氮杂菲溶液，定容，摇匀。在722型分光光度计上用1cm比色皿，以水为参比溶液，用不同波长450550 nm,每隔20nm测吸光度（峰值附近没10nm测一次吸光度），并绘制吸光度波长曲线找出最佳波长区间。实验数据及曲线如下：波长/nm450470490500510520530550A10.3690.3740.4310.4680.4510.4090.3260.22A20.3870.4320.440.4610.4450.40.310.185A0.3780.4030.43550.46450.4480.40450.3180.2025由图可知：最佳波长应该在490nm到510nm之间，进一步确定在500nm处取得最大波长。邻二氮杂菲-亚铁配合物的稳定性准确移取5ml 20ug/ml铁标准溶液于50ml容量瓶中，加入2.0ml10% 盐酸羟胺溶液，摇匀，冷却，2min后加入5ml 1mol/L NaAC 溶液和3ml 0.2%邻二氮杂菲溶液，定容，摇匀。，在500nm处，用分光光度计测得吸光度，并记下读数，并绘制吸光度时间曲线，找出最佳显色时间。实验数据及曲线如下：时间/min351020304050607090吸光度/A0.3830.3820.3820.3820.3840.3820.3820.3790.3830.383有图可见：最佳反应时间在30min左右。显色剂最佳用量的测定取7只50ml容量瓶编号，分别加入5ml 20ug/ml 铁标准溶液，再加入2.0ml 10%盐酸羟胺溶液摇匀，冷却，2min后加入5ml1mol/L NaAC 溶液,再分别加入0.1%邻二氮杂菲溶液0.0 、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0ml，定容，摇匀。一定时间后用1cm比色皿，以水为参比溶液，用分光光度计在500nm处，测定吸光度，并绘制吸光度显色剂用量曲线，找出显色剂最佳用量。实验数据及曲线如下：邻二氮杂菲/ml0.0 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 吸光度/A1-0.017 0.366 0.364 0.363 0.371 0.374 0.372 0.370 吸光度/A2-0.002 0.381 0.381 0.380 0.384 0.386 0.373 0.376 吸光度/A-0.010 0.374 0.373 0.372 0.378 0.380 0.373 0.373 由图可见：显色剂的最佳用量为2.0ml到4.0ml。取位3.0mlPH对配合物的影响用移液管准确移取2.5ml 400ug/ml 铁标准溶液于100 ml 容量瓶中，再加入5ml 2mol/L HCl 和20.0 ml 10%盐酸羟胺溶液，摇匀，2min 后加入30 ml 0.2%邻二氮杂菲溶液，定容，摇匀，备用。取7只50ml容量瓶编号，用移液管分别取上述溶液10 ml 于其中，向各个容量瓶中加入0.4mol/LNaOH 溶液0.0、2.0、3.0、4.0、6.0 8.0及10.0ml，定容，摇匀，用PH试纸测其PH值，用1cm比色皿，以水为参比溶液，测吸光度，并绘制吸光度NaOH用量曲线，找出最佳pH值。实验数据及曲线如下：NaOH/ml0.0 2.0 3.0 4.0 6.0 8.0 10.0 PH1.5 3.0 5.0 5.5 6.5 7.0 7.5 吸光度/A10.389 0.413 0.405 0.415 0.412 0.418 0.421 吸光度/A20.393 0.413 0.406 0.415 0.413 0.418 0.419 吸光度/A0.391 0.413 0.406 0.415 0.413 0.418 0.420 由图可见：最佳PH的范围是27。缓冲剂最佳用量的测定：取7支50ml容量瓶号，分别加入5 ml 20ug/ml 铁标准溶液，再加入2.0ml 10%盐酸羟胺溶液，摇匀，2min 后分别加入1mol/L NaAc溶液0.0ml，2.0ml，3.0 ml，4.0 ml，5.0 ml，6.0 ml，7.0ml及9.0ml，再分别加入3.0ml0.2%邻二氮杂菲溶液，定容，摇匀，用1cm比色皿，以水为参比溶液，测其吸光度，并绘制吸光度缓冲剂用量曲线，找出缓冲剂最佳用量。实验数据及曲线如下：NaAc/ml0.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 9.0 吸光度/A10.397 0.412 0.389 0.388 0.385 0.388 0.385 0.387 吸光度/A20.393 0.400 0.385 0.387 0.382 0.390 0.386 0.390 吸光度/A0.395 0.406 0.387 0.388 0.384 0.389 0.386 0.389 由图可知：缓冲剂的最佳用量为2ml。最佳还原剂用量取7支50ml容量瓶号，分别加入5 ml 20ug/ml 铁标准溶液，分别加入10%盐酸羟胺溶液0.0ml,0.5ml,1.0ml,1.5ml,2.0ml,2.5ml,3.0ml，摇匀，2min 后加入1mol/L NaAc溶液2.0ml，再分别加入3.0ml0.2%邻二氮杂菲溶液，定容，摇匀，用1cm比色皿，以水为参比溶液，测其吸光度，并绘制吸光度还原剂用量曲线，找出还原剂最佳用量。实验数据及曲线如下：盐酸羟氨/ml0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 吸光度/A10.091 0.380 0.377 0.378 0.385 0.382 0.383 吸光度/A20.051 0.384 0.380 0.379 0.383 0.382 0.382 吸光度/A0.071 0.382 0.379 0.379 0.384 0.382 0.383 由图可知：还原剂的最佳用量为2ml。标准曲线的绘制1.标准系列（1#6#）及未知物溶液（7#）的配置：在7个50ml容量瓶中，按下表，上下依次加入各试剂：容量瓶标号123456720ug/ml 铁标准溶液（ml）0.02.04.06.08.010.05.0（待测）10%盐酸羟胺溶液（ml）2.02.02.02.02.02.02.01mol/L NaAc溶液（ml）2.02.02.02.02.02.02.00.2%邻二氮杂菲溶液（ml）3.03.03.03.03.03.03.0注：1mol/LNaAC溶液应在2min后加。将各比容量瓶pH值5.0-6.0，定容，摇匀。2. 吸光度的测定：用1cm比色皿，以试剂空白为参比溶液，在500nm处，测1#6#溶液的吸光度，以50ml溶液中铁含量为横坐标，相应吸光度为纵坐标，利用1#6#系列标准溶液可绘制标准曲线。由7#溶液的吸光度在标准曲线上查出5.0ml样品溶液中Fe的吸光度值，计算原样品溶液中铁的含量.实验数据及曲线如下：标准系列（1#6#）用于绘制标准曲线，结果如下：铁标用量/ml0.0 2.0 4.0 6.0 8.0 10.0 吸光度/A0.007 0.158 0.313 0.458 0.610 0.747 图即为所绘制的标准曲线。样品中铁含量的测定样品吸光度/A鸡蛋黄溶5ml0.175青椒溶液5ml0.149从上面坐标找到：吸光度为0.175时的铁标体积为2.2ml。 吸光度为0.149时的铁标体积为1.9ml。鸡蛋黄：待测13.3g鸡蛋黄的铁的含量为（2.2ml*20ug/ml*100/5）13.3g=66.2ug/g，即约为662ug/10g。青椒溶液：待测100.0g青椒中铁的含量为（1.9ml*20ug/ml*100/5）100.0g=7.60 即约为760ug/g。所以：鸡蛋黄中铁的含量约为662ug/10g， 青椒中铁的含量约为 760ug/g。回收试验1. 取两50ml容量瓶，编号1、2，分别加入鸡蛋黄样品液5ml，再在2号容量瓶中加入1ml20ug/ml铁标准溶液，然后分别加入2.0m10%盐酸羟胺溶液，2min后再分别依次加入4ml1mol/LNaAc溶液与3.0ml 0.2%邻二氮杂菲溶液，并调pH=5.0，定容、摇匀。测其吸光度A1、A2 鸡蛋黄5ml： A1： 0.175 A2： 0.221 取两50ml容量瓶，编号1、2，分别加入青椒样品液5ml，再在2号容量瓶中加入1ml10ug/ml铁标准溶液，然后分别加入1.0m5%盐酸羟胺溶液，2min后再分别依次加入4ml1mol/LNaAc溶液与3.0ml0.2%邻二氮杂菲溶液，并调pH=5.0，定容、摇匀。测其吸光度A1、A2 青椒溶液5ml： A1： 0.149 A2： 0.231 从标准曲线上查得：2号容量瓶中铁标体积分别是2.8ml和3.0ml。求算回收率：鸡蛋黄：【（2.8-2.2）ml*20ug/ml】/20ug*100%=60%青椒：【（3.0-1.9）ml*20ug/ml】/20ug*100%=110% 由以上数据说明：该实验方法可行。总结论由条件实验测得：1. .最佳波长为500nm.2. 最佳反应时间为30min左右.3. 显色剂最佳用量为3.0ml.4. 缓冲剂最佳用量为2.0ml.5. 还原剂最佳用量2.0ml.6. 最佳pH值为2-7由标准曲线求的：鸡蛋黄中铁的含量约为662ug/10g，青椒中铁的含量约为760ug/100g由回收实验算得：鸡蛋黄的回收率为60%，青椒的回收率为110%.参考文献1. 成都科技大学分析化学教研组。分析化学实验。北京：高等教育出版社，1999。2. 武汉大学。分析化学实验。北京：高等教育出版社，1996。3. 叶世柏，食品理化方法检验指南。北京：北京大学出版社，1991.4. 邱光正，张天秀，刘耘主编大学基础化学实验山东大学出版社。5. 赵传孝等著，食品检验技术手册。北京：中国食品出版社，1990.讨论心得本次实验中提取并测定了青椒和鸡蛋黄中铁元素的含量,使自己体会到并学到了很多从课本上不能直接学到的东西. 从开始自己查找资料、初步设计试验方案到与同学们交流设计思想，再到老师的讲解，确实是一个使自己受益匪浅的过程。虽