TM与VEGF在子宫内膜癌组织中的表达和意义.doc

TM与VEGF在子宫内膜癌组织中的表达和意义【关键词】 ,血栓调节蛋白 Expression of TM and VEGF in endometrial carcinoma and its significanceWANG YueLing, YANG Na, YANG YuZhen, ZHANG JunXiao1Department of Obstetrics & Gynecology, First Hospital, Xian Jiaotong University, 2Department of Pathology, Xian Boai Hospital, Xian 710061, China【Abstract】 AIM: To study the relationship of expression of TM and VEGF in endometrial carcinoma and the infiltration degree and the histological grading and to analyze the correlation between TM and VEGF. METHODS: The expression of TM and VEGF was detected immunohistochemically in 50 cases of endometrial adenocarcinoma, 10 cases of endometrial complex hyperplasia and 10 cases of normal endometrium. RESULTS: The positive rates of TM and VEGF in endometrial carcinoma were both significantly higher than those in complex hyperplasia and normal endometrium (P0.05). The expression of TM gradually decreased with the progress of clinical stage (P0.05). The expression of VEGF had no relationship with clinical stage, histological grading, muscular invasion and patients age (P0.05). No correlation between TM and VEGF was observed in endometrial carcinoma (P0.05). CONCLUSION: TM and VEGF are associated with the occurrence of endometrial carcinoma. The expression level of TM is correlated with the metastasis of endometrial carcinoma and can be used as a new index for judging the progression and prognosis of endometrial carcinoma.【Keywords】 Thrombomodulin(TM); Vascular Endothelial Growth Factor(VEGF); Endometrial Carcinoma【摘要】 目的： 了解TM与VEGF在子宫内膜癌组织中的表达及与肿瘤的浸润程度、组织学分级等病理参数的关系，分析VEGF与TM的相关性. 方法： 采用免疫组织化学方法分别检测50例子宫内膜腺癌、10例子宫内膜复杂型增生过长、10例正常子宫内膜组织中TM与VEGF的表达. 结果： TM和VEGF表达在子宫内膜腺癌与子宫内膜复杂型增生过长和正常子宫内膜之间均有显著性差异(P0.05)；TM的表达与临床分期有关(P0.05)；VEGF的表达与临床分期、组织学分级、肌层浸润程度、患者年龄均无明显关系(P0.05)；TM与VEGF在子宫内膜腺癌中的表达亦无明显相关性(P0.05). 结论： TM与VEGF与肿瘤的发生有关；TM表达水平与子宫内膜癌的转移有关，有望成为判断子宫内膜癌患者病情发展和预后的一项新指标.【关键词】 血栓调节蛋白；血管内皮生长因子；子宫内膜癌0引言血栓调节蛋白（thrombomodulin, TM）是血管内皮细胞上凝血酶的受体，亦是血管内皮损伤的标志之一，已知其在人类多种正常组织中表达. 近年来研究发现，TM亦可表达于多种肿瘤组织，如肝癌、胃癌、肺癌，但有关子宫内膜癌方面的研究报道甚少. VEGF是主要的促血管生成因子之一，其与子宫内膜癌各临床病理参数间的关系还存在争议. 现将我们的研究结果报道如下.1材料和方法1.1材料收集1999/2003年西安交通大学第一医院50例子宫内膜腺癌患者（术前均未经放疗、化疗或激素治疗）、10例子宫内膜复杂型增生过长患者和10例正常子宫内膜的石蜡包埋标本. 子宫内膜腺癌组织标本中，临床分期期34例，期11例，期4例，期1例；组织学分级级21例，级21例，级8例；深肌层浸润（1/2肌层）15例，浅肌层浸润（1/2肌层）28例，无肌层浸润7例；患者年龄2883岁，平均58岁. 子宫内膜复杂型增生过长患者年龄4568岁，平均56岁. 正常子宫内膜患者3548岁，平均42岁. 上述标本均经HE染色证实，40 g/L多聚甲醛固定，常规石蜡包埋，5 m连续切片； 鼠抗人TM单克隆抗体；鼠抗人VEGF单克隆抗体（由深圳晶美生物工程有限公司提供）.1.2方法TM与VEGF免疫组织化学染色程序严格参照PC免疫组织化学试剂盒说明书进行；鼠抗人TM单克隆抗体浓缩型与鼠抗人VEGF单克隆抗体浓缩型工作浓度分别为130与1100，以PBS液代替一抗作为阴性对照.1.3结果判定TM阳性结果判断标准: TM表达阳性和阴性根据细胞染色强度和染色细胞所占面积两者积分之和来判断. TM阳性表达为肿瘤细胞胞质染成黄色. 染色强度积分为：不染色=0，轻度染色=1，中度染色=2，强染色=3；无细胞染色=0，50%细胞染色=3. 若两种积分之和2，则为TM表达阳性，2则为表达阴性. VEGF阳性结果判断标准: VEGF阳性表达为肿瘤细胞胞质染成棕黄色. 每例组织切片随机观察高倍视野下1000个细胞阳性染色强度并计数阳性细胞数. 阴性(-)： 细胞不着色和/或阳性细胞率75%.统计学处理： 采用SPSS11.0统计软件,率的比较采用2检验、或Fisher精确概率法,率的多重比较采用分割2检验. P0.05为有统计学意义.2结果2.1TM的表达TM在正常子宫内膜、复杂型增生过长子宫内膜及子宫内膜腺癌组织中的阳性表达率分别为0（0/10），20.0%（2/10），68.0%（34/50）. 子宫内膜腺癌组与正常子宫内膜和子宫内膜复杂型增生过长组之间存在显著性差异(P0.05). 正常及复杂型增生过长子宫内膜组织中仅表现为少部分胞质内浅黄色淡染，胞膜浅着色；在子宫内膜癌组织中大部分细胞质和细胞膜都呈强染色，为深棕黄色(Fig 1, 2). TM表达从正常子宫内膜、复杂型增生过长子宫内膜及子宫内膜腺癌组织中的表达呈现逐渐升高趋势. TM在子宫内膜癌中的表达在各种临床病理指标中，只与临床分期有统计学意义，与组织学分级、肌层浸润程度和年龄都无关.2.2VEGF的表达VEGF在正常子宫内膜、复杂型增生过长子宫内膜及子宫内膜腺癌组织中的阳性表达率分别为10.0%（1/10）， 20.0%（2/10），74.0%（37/50）. 子宫内膜腺癌组与正常子宫内膜和子宫内膜复杂型增生过长组之间存在显著性差异(P0.05)，正常子宫内膜和子宫内膜复杂型增生过长组之间无显著性差异. VEGF阳性表达主要定位在细胞质，呈棕黄色颗粒或线状，少量细胞膜及细胞间质也着色. 在正常子宫内膜细胞无着色或呈现细小均匀的淡黄色；在复杂型增生过长子宫内膜中阳性着色强度不一，多为淡黄色；而子宫内膜癌中的细胞胞质内多为阳性或强阳性着色，着色均匀或黄色颗粒布满细胞质，细胞间质呈阳性或弱阳性着色(Fig3、4). VEGF表达从正常子宫内膜、复杂型增生过长子宫内膜及子宫内膜腺癌组织中的表达呈现逐渐升高趋势. VEGF在子宫内膜癌中的表达与临床分期、病理学分级、肌层浸润程度和患者年龄均无关.2.3TM与VEGF在子宫内膜癌中表达的一致性子宫内膜癌组织中，TM与VEGF检测结果无显著差异.3讨论肿瘤的浸润和转移是造成肿瘤患者死亡的主要原因之一. 研究表明，肿瘤的浸润和转移一方面会造成血管内皮的损伤，另一方面又需要有新的血管生成来维持. 肿瘤转移过程中有两个非常重要的步骤： 肿瘤细胞脱落至血循环中及肿瘤细胞和血管内皮细胞的粘附. 而血液中的凝血和纤维蛋白溶解系统均能影响这两个步骤. TM能通过与凝血酶结合，将其由促凝物质转变为抗凝物质，抑制纤维蛋白的形成，增强体内免疫活性细胞对肿瘤细胞的杀伤作用，阻止内皮细胞与肿瘤细胞的黏附，从而阻止了肿瘤的转移. 最近的研究表明，无论在体内或体外，TM均可抑制肿瘤细胞的增生1. 作为细胞粘附分子中的一员，TM表达降低，可使肿瘤细胞之间粘附性减弱，易于脱落进而发生转移2.强阳性表达TM的乳腺癌、口腔癌和肺癌患者比弱阳性表达或阴性表达者淋巴结转移率低而生存率明显延长，在癌转移灶组织中很少有TM的表达3. TM表达阳性肝癌患者的肝内转移、门静脉癌栓和肝包膜浸润的机会明显低于TM表达阴性者，且TM阳性者平均生存时间显著长于TM阴性者.本实验结果显示子宫内膜腺癌患者癌组织中TM表达阳性率（68%）明显高于子宫内膜复杂型增生过长组（20%）和正常子宫内膜组（0%），且在子宫内膜腺癌组中随临床分期的升高，TM的阳性表达率逐渐降低；而TM的表达与组织学分级、肌层浸润程度和患者年龄无关. 此结果可能由于在子宫内膜癌的发生、转移过程中造成血管内皮的破坏，使得TM在子宫内膜腺癌组高表达；随着临床分期的增高，凝血系统异常进一步加重，TM消耗增多，阳性表达率随临床分期的升高而逐渐降低. 因此TM表达水平与转移有关，有望成为子宫内膜腺癌的肿瘤标志物之一.新生血管形成是实体瘤生长的关键4. VEGF是目前所认知的最主要的调控实体瘤血管发生和新生血管形成的因子之一. 研究发现，VEGF不仅有促血管新生的作用尚有促淋巴管形成的作用5，6. Baillie等7发现VEGF尚可通过影响肿瘤宿主的免疫系统来促进肿瘤生长. 近年来研究表明，人类许多肿瘤细胞比正常组织具有高的VEGF表达8，9.本实验研究显示50例子宫内膜癌中VEGF强阳性表达率为74%（37/50）,明显高于子宫内膜增生过长组20%（2/10）和正常子宫内膜组10%（1/10）(P0.05). 提示VEGF只与子宫内膜癌的发生有关，而不能用于判断疾病的严重程度和患者的预后. 此结果与Fine10研究结果相符.TM与VEGF在子宫内膜癌中的表达检测结果无显著差异,说明两者在诊断子宫内膜癌是一致的. 两者在子宫内膜及子宫内膜癌组织中的作用机制还有待研究.【参考文献】1 Zhang YM, Weiler GH, Chen J, et al. 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