（药剂学专业论文）他克莫司固体分散体胶囊剂的研究.pdf

jplijii fi ii ii ifi i i iii iii y 18117 3 9 目录 中文摘要 1 英文摘要 4 前言 8 第一部分他克莫司含量和体外溶出度测定分析方法的建立 1 2 一 材料与仪器 1 2 二 实验方法 1 3 2 1 他克莫司含量和有关物质测定肿l c 分析方法的建立 1 3 2 2 他克莫司体外溶出度测定印 l c 分析方法的建立 1 5 三 结果与讨论 1 7 3 1 他克莫司含量和有关物质测定 l c 分析方法的评价 1 7 3 2 他克莫司体外溶出度测定肿i c 分析方法的评价 2 4 四 第一部分小结 2 7 第二部分他克莫司固体分散体的制备及其体外特性研究 2 8 一 材料与仪器 2 8 二 实验方法 2 9 2 1 固体分散体载体材料的筛选 2 9 2 2 固体分散体的物相鉴别 3 2 2 3 固体分散体制备工艺的研究 3 3 三 结果与讨论 3 4 3 1 固体分散体载体材料的筛选 3 4 3 2 固体分散体的物相鉴别 3 9 3 3 固体分散体制备工艺的研究 4 5 四 第二部分小结 4 6 第三部分他克莫司固体分散体胶囊剂的制备和质量标准研究 4 8 一 材料与仪器 4 8 二 实验方法 4 9 2 1 他克莫司固体分散体胶囊剂处方的筛选 4 9 2 2 他克莫司固体分散体胶囊剂的制备工艺 5 1 2 3 他克莫司固体分散体胶囊剂的质量标准研究 5 2 三 结果与讨论 5 6 3 1 他克莫司固体分散体胶囊剂处方的筛选 5 6 3 2 他克莫司固体分散体胶囊剂制备工艺的重演性 5 8 3 3 他克莫司固体分散体胶囊剂的质量标准研究 6 0 四 第三部分小结 7 0 第四部分他克莫司固体分散体胶囊剂的稳定性研究 7 2 一 材料与仪器 7 2 二 实验方法 7 3 2 1 考察项目 7 3 2 2 影响因素试验 7 3 2 3 加速试验 00 00 0 0 q 7 4 2 4 长期试验 o o00 0oq 00 7 4 三 结果与讨论 7 5 3 1 影响因素试验 7 5 3 2 加速试验 8 0 3 3 长期试验 8 6 四 第四部分小结 9 0 第五部分他克莫司软膏剂的制备研究 9 2 一 材料与仪器 9 3 二 实验方法 9 4 2 1 他克莫司软膏剂的体外分析方法 9 4 2 2 他克莫司软膏剂的制备 9 6 2 3 他克莫司软膏剂的体外吸收特性 9 7 2 4 他克莫司软膏剂的初步质量研究 9 9 三 结果与讨论 1 0 1 3 i 他克莫司软膏剂的体外分析方法 i 0 1 3 2 他克莫司软膏剂的制备 1 0 6 3 3 他克莫司软膏剂的体外吸收特性 i 0 7 四 第五部分小结 1 0 8 o 2 5 6 1 工 l 工 l 1 1 l o 币 专 珀俐 结献文谢 总文论文考表 全参发致 中文摘要 他克莫司固体分散体胶囊剂的研究 中文摘要 他克莫司 t a c r o l i m u s 艮5 0 6 是1 9 7 9 年从日本筑波地区土壤中一种链霉 菌株发酵产物中分离出来的2 3 环大环内酯类抗生素 红霉素族 分子式为 c 4 4 h 6 9 n 0 1 2 分子量为8 0 3 4 8 水溶性很差 易溶于甲醇 乙醇 氯仿等有机溶 剂 不易通过胃肠道吸收 动物试验显示吸收很差 f k 5 0 6 是强效免疫抑制剂 主要用于器官和组织移植前后治疗机体的排斥反应 具有与环孢霉素a c s a 相似而更广泛的免疫抑制作用 效力比c s a 高1 0 1 0 0 倍 而毒副作用更少 目前 国内尚无自行研制的f k 5 0 6 固体分散体胶囊剂 而进口制剂口服胶 囊 1 m g 粒 的售价高达3 2 元胜 系统研究并开发国产的f k 一5 0 6 口服固体剂型 很有意义 因此本课题从国内医药工业的实际情况出发 试采用较简单的工艺和 处方制备f k 5 0 6 固体分散体硬胶囊剂 主要包括以下四部分内容 一 他克莫司含量和体外溶出度测定分析方法的建立 建立h p l c u v 法测定f k 一5 0 6 固体分散体胶囊剂的含量 采用h y p e r s i l o d s 一2c 1 8 柱 流动相乙腈一0 1 磷酸 6 5 3 5 流速1 0r n l m i n 柱温6 0 检 测波长u v 2 2 0 n m f k 5 0 6 在1 0 1 2 0r t g m l 范围内呈良好的线性关系 回收率在 1 0 0 0 1 一1 0 2 7 5 之间 r s d 均 2 在本色谱条件下 f k 5 0 6 与有关物质分 离度良好 方法灵敏度高 准确 重现性好 经过方法学评价 符合要求 建立h p l c u v 法测定f k 5 0 6 固体分散体胶囊剂体外溶出液中f k 5 0 6 的含 量 采用l u n ao d s 一2c 1 8 柱 流动相乙腈 0 1 磷酸 7 0 3 0 流速1 0r n l d m i n 柱温6 0 c 检测波长u v 2 3 0 n m f k 一5 0 6 在0 5 一5 0r t g m l 范围内呈良好的线性关 系 回收率在9 8 3 3 一1 0 0 9 3 之间 r s d 均 5 0 无显著性差异 表明不同转速 p h 值对f k 5 0 6 体外溶出度的影响不大 f k 5 0 6 固体分散体胶囊剂的体外溶出机制初步探讨结果表明 k o r s m e y e r p e p p a s 模型的拟合效果最好 其溶出速率常数在不同转速 溶出介质 下均 5 0 i n d i c a t e dt h a tas u f f i c i e n t l ys i m i l a rd i s s o l u t i o np r o f i l ea m o n gt h e s eb a t c h e sa n d d i f f e r e n td i s s o l u t i o nm e d i as u c ha sr o t a t i o ns p e e da n dp h t h ek i n e t i c so ft h ed i s s o l u t i o np r o c e s si nv i t r ow a st ob eb e s td e s c r i b e db yt h e k o r s m e y e r p e p p a sm o d a l t h ed i s s o l u t i o nr a t ec o n s t a n tw a sa l w a y sl e s st h a no 4 5 b e l o n g e dt ot h ef i c kd i f f u s i o nm e c h a n i s m t h eq u a l i t a t i v ea n dq u a n t i t a t i v ed e t e r m i n a t i o nm e t h o d sw e r ee s t a b l i s h e df o rt h e q u a l i t yc o n t r o lo ff k 一5 0 6s o l i dd i s p e r s i o nc a p s u l e h p l ca n a l y s i sw a sd e v e l o p e dt o d e t e r m i n et h ec o n t e n to ff k 5 0 6 i t sr e l a t e ds u b s t a n c e sa n df k 5 0 6i nd i s s o l u t i o n m e d i ad u r i n gt h ed i s s o l u t i o nt e s t c h e m i c a la n a l y s i s t l ca n dh p l ca n a l y s i sw e r e d e v e l o p e dt oi d e n t i f yf k 5 0 6 a n dg ca n a l y s i sw a sd e v e l o p e dt od e t e c tt h er e s i d u e l e v e lo fa l c o h o la n dd i c h l o r m e t h a n ei nc a p s u l e 4 s t u d i e so nt h es t a b i l i t yt e s to ft a c r o l i m u ss o l i dd i s p e r s i o nc a p s u l e s t r e s st e s t i n g a c c e l e r a t e dt e s t i n ga n dl o n g t e r mt e s t i n go ft h ec a p s u l eo ff k 5 0 6 s o l i dd i s p e r s i o nw e r ec a r r i e do u t s t r e s st e s t i n gs h o w e dt h a th i g l lt e m p e r a t u r e h i g h h u m i d i t ya n di n t e n s i v el i g h te n v i r o n m e n tw e r ed i s a d v a n t a g e st ot h es t o r a g eo ft h e f o r m u l a t i o n a c c e l e r a t e dt e s t i n ga n dl o n g t e r mt e s t i n go ft h r e eb a t c h e sc a p s u l e so f f k 5 0 6s o l i dd i s p e r s i o ne n v e l o p e di na l u m i n u m p l a s t i cc o m p o s i t em e m b r a n ew e r e c o n d u c t e d a c c e l e r a t e dt e s t i n gw a sc a r r i e do u tu n d e rt h ec o n d i t i o no f3 0 ca n d6 0 r e l a t i v eh u m i d i t y a n dt h ec a p s u l e ss h o w e ds o u n ds t a b i l i t ya f t e rs t o r a g ef o r6m o n t h s l o n g t e r mt e s t i n gw a sc a r r i e do u tu n d e rt h ec o n d i t i o no f2 5 c a n d6 0 r e l a t i v e h u m i d i t y a n dt h ec a p s u l e ss h o w e ds o u n ds t a b i l i t ya f t e rs t o r a g ef o r1y e a r f r o mt h ep h y s i c o c h e m i c a la n ds t a b i l i t yt e s t i tw a sc l a r i f i e dt h a ts t u d i e so n c a p s u l eo ff k 5 0 6s o l i dd i s p e r s i o nw e r eu pt ot h ed e s i g nr e q u i r e m e n t 6 英文摘要 k e y w o r d s t a c r o l i m u s f k 5 0 6 s o l i d d i s p e r s i o n s d h y d r o x y p r o p y l m e t h y l c e l l u l o s e h p m c m i c r o c r y s t a l l i n ec e l l u l o s e s m c c c o n t e n td e t e r m i n a t i o n i nv i t r od i s s o l u t i o nd e t e r m i n a t i o n i d e n t i f i c a t i o nt e s t q u a l i t y c o n t r o l s t a b i l i t y 7 前言 前言 他克莫司 又名t a c r o l i m u s f k 5 0 6 以下简称f l 5 0 6 是1 9 7 9 年从日本筑 波地区土壤中一种链霉菌株发酵产物中分离出来的2 3 环大环内酯类抗生素 红霉 素族 分子式为c 4 4 h l 洲0 1 2 分子量为8 0 3 0 3 化学名称为 3 s 一 3 r 木 e 1 s 毒 3 s 4 s 宰 4 s 瘩 5 r 木 8 s 木 9 e 木 1 2 r 木 1 4 r 木 1 5 s 木 1 6 r 木 1 8 s 木 1 9 s 木 2 6 状木 一5 6 8 1 1 1 2 1 3 1 4 1 5 1 6 1 7 1 8 1 9 2 4 2 5 2 6 a 六一癸氢 5 1 9 一二羟基一3 一 2 一 4 羟 3 一甲氧环己基 一1 甲基乙烯基 1 4 1 6 二甲氧 4 l o 1 2 1 8 四甲基8 2 一丙烯基 1 5 1 9 环氧 3 h 吡啶并 2 1 卅 1 4 氧杂氮杂环三炔一1 7 2 0 2 1 4 h 2 3 h 四酮 结构式如下 嚆 螂耘 f k 5 0 6 不溶于水 易溶于甲醇 乙醇 丙酮等有机溶剂 不易通过胃肠道 吸收 动物试验显示吸收很差 l 在人体内的主要吸收部位在胃肠道上部 口服 后吸收不完全 5 0 6 胶囊剂的平均生物利用度在肝移植患者中约为2 1 8 肾 移植患者约为2 0 1 健康自愿者为1 4 4 一1 7 4 吸收后广泛分布于各种组织 与红细胞及血浆蛋白高度结合 血浆蛋白结合率 9 8 主要通过肝脏中细胞色 素p 4 5 0 3 a 酶系统进行脱甲基或羟化作用代谢 血浆半衰期为3 5 h 4 0 5 h 个体 差异大 肝移植患者血浆半衰期为6 7 h 2 7 h 1 3 3 h 肾清除率低 1 5 0 0 f k 一5 0 6 和有关物质1 2 的分离度均大于1 5 辅料无干扰 符合测 定要求 a 1 7 第一部分他克莫司含量和体外溶出度测定分析方法的建立 j 鱼 8 6 4 2 d b c r i g1 2 h p l cc h r o m a t o g r a m so f a f k 5 0 6s t a n d a r ds o l u t i o n 0 3 s a m p l e s o l u t i o na n d c b l a n ka d j u v a n ts o l u t i o n 1 8 第一部分他克莫司含量和体外涪出度测定分析方法的建立 3 1 2 标准曲线方程 f k 5 0 6 的系列标准溶液 进行色谱分析得峰面积a 以浓度c 对峰面积a 作线性回归 得标准曲线方程 c i 1 7 8 x 1 0 4 a 0 2 0 7 1 r 0 9 9 9 8 线性范围 1 0 1 2 0 肛g m l 3 1 3 回收率试验 1 0 0 6 0 2 0 9 9 m l 高 中 低三个浓度样品溶液的回收率测定结果见表1 1 回收率在1 0 0 0 1 1 0 2 7 5 之间 r s d 均 1 表明回收率符合要求 本f k 5 0 6 含量和有关物质测定的h p l c 分析方法准确可信 t a b1 1 r e c o v e r yo ft h eh p l ca n a l y s i sm e t h o do ff i g 5 0 6 3 1 4 精密度试验 1 0 0 6 0 2 0 9 9 m l 高 中 低三个浓度的日内精密度测定结果见表1 2 日 间精密度测定结果见表1 3 从两表中可见 f k 5 0 6 的日内 日间变异系数 r s d 均 2 说明本法有良好的精密度和重现性 1 9 第一部分他克英司含量和体外溶出度测定分析方法的建立 t a b1 2p r e c i s i o no ft h eh p l ca n a l y s i sm e t h o do ff k 5 0 6 w i t h i nd a y t a b1 3p r e c i s i o no ft h eh p l c a n a l y s i sm e t h o do ff k 5 0 6 b e t w e e nd a y s 3 1 5 稳定性试验 1 0 0 6 0 2 0 肛g m l 高 中 低三个浓度在不同时间的测定结果见表1 4 r s d 均 1 0 0 0 f k 5 0 6 和有关物质2 的分离度大于1 5 辅料无干扰 符合测定要求 觯 l v abc r i g1 5 h p l c c h r o m a t o g r a m so f a f k 5 0 6s t a n d a r ds o l u t i o n 0 3 s a m p l e s o l u t i o na n d c b l a n ka d j u v a n ts o l u t i o n 3 2 2 标准曲线方程 f k 5 0 6 的系列标准溶液 进行色谱分析得峰面积a 以浓度c 对峰面积a 作 线性回归 得标准曲线方程 c 2 0 7 6 1 0 4 a 0 0 1 6 6 9 r 0 9 9 9 9 线性范围o 5 5 o 舭 3 2 3 回收率试验 4 0 2 4 o 8 舭高 中 低三个浓度的回收率测定结果见表1 5 回收率在 9 8 3 3 1 0 0 9 3 之间 r s d 均 2 表明回收率符合要求 本f k 5 0 6 体外溶出 度测定的h p l c 分析方法准确可信 2 4 第一部分他克莫司口服固体制剂体外分析方法的建立 t a b1 5 r e c o v e r yo ft h eh p l ca n a l y s i sm e t h o do ff k 5 0 6d i s s o l u t i o n 3 2 4 精密度试验 4 0 2 4 0 8 g m l 高 中 低三个浓度的日内精密度测定结果见表1 6 日间 精密度测定结果见表1 7 从两表中可见 f k 5 0 6 的日内变异系数 r s d 均 2 日间变异系数 r s d 均 5 说明本法有良好的精密度和重现性 t a b1 6p r e c i s i o no ft h eh p l ca n a l y s i sm e t h o do ff k 5 0 6d i s s o l u t i o n w i t h i nd a y 2 5 第一部分他克莫司口服固体制剂体外分析方法的建立 t a b1 7p r e c i s i o no ft h eh p l c a n a l y s i sm e t h o do ff k 5 0 6d i s s o l u t i o n b e t w e e nd a y s 3 2 5 稳定性试验 4 0 2 4 0 8 p g m l 高 中 低三个浓度在不同时间的测定结果见表1 8 r s d 均 2 表明样品溶液在2 4 h 内稳定性良好 t a b1 8 s t a b i l i t yo ft h eh p l ca n a l y s i so ff k 5 0 6d i s s o l u t i o n 3 2 6 检测限 以s n 3 时对照品溶液的浓度 确定检测限为0 3 肛g m l 2 6 第一部分他克莫司口服固体制剂体外分析方法的建立 四 第一部分小结 1 本试验根据f k 5 0 6 原料药的测定条件 建立了f k 5 0 6 含量和有关物质测定的 h p l c 分析方法 采用h y p e r s i lo d s 2c 1 8 柱 流动相乙腈加 1 磷酸 6 5 3 5 流 速1 0m l m i n 柱温6 0 j 检测波长u v 2 2 0 n m f k 5 0 6 在1 0 1 2 0i t g m l 范围内 呈良好的线性关系 回收率在1 0 0 0 1 一1 0 2 7 5 之间 r s d 均 2 在本色谱条 件下 f k 5 0 6 与有关物质分离度良好 方法灵敏度高 准确 重现性好 经过方法 学评价 符合要求 2 建立了f k 5 0 6 体外溶出度测定的h p l c 分析方法 采用l u n ao d s 2c 1 8 柱 流动相乙腈 0 1 磷酸 7 0 3 0 流速1 0r n l j m i n 柱温6 0 检测波长u v 2 3 0 n m f k 一5 0 6 在0 5 5 0j t g m l 范围内呈良好的线性关系 回收率在9 8 3 3 1 0 0 9 3 之 间 r s d 均 8 0 由于本品制成胶囊后每粒含f k 5 0 6l m g 为保证体外溶出液中f k 5 0 6 浓度 测定的准确性 采用 中国药典 2 0 0 5 年版二部附录xc 中小杯法进行试验u 9 1 2 141 溶出条件 溶出介质 水2 5 0m l 转速 1 0 0r p m 温度 3 7 0 5 分别于5 1 0 1 5 2 0 3 0 4 5 m i n 时取样3 m l 于5 m l 离心管中 同时补充 同温介质3 m l 样品以4 0 0 0 r p m 离心1 0 r a i n 取上清液2 0 止 以h p l c 法测定其 浓度 计算药物的累积溶出百分率 q 计算公式如下 c 咧 丽善n 1 c 删 酊咧 丽善c 删 c n 舅 第n 个时间点的测定浓度 g 校 第i i 个时间点的校正浓度 3 0 第二部分他克莫司固体分敌体的制各及其体外特性研究 q 蔫筹川 2 1 4 2 离心和微孔滤膜过滤对含量的影响 在实验过程中发现 经微孔滤膜过滤后 药物含量有所下降 文献 捌报道 微孔滤膜有可能对药物产生吸附作用 为保证溶出液浓度测定的准确性 比较了 离心和微孔滤膜 o 8 1 a n 过滤后 已知浓度对照品溶液中f k 5 0 6 的含量变化 2 1 4 3 静置6 h 对含量的影响 有文献 2 1 1 报道 f k 5 0 6 在水溶液中易发生顺反异构 形成多种立体互变异构 体之间的复杂平衡 需要静置一定时间使f k 5 0 6 达到稳定的平衡态后测定 为保 证溶出液中浓度测定的准确性 比较了静置6 h 前后 已知浓度样品溶液 见第一 部分2 2 3 中f k 5 0 6 的含量变化 2 1 4 4 统计分析 根据文献报道 2 2 瑙1 比较体外溶出曲线的方法一般有三种 方差分析法 a n o v a b a s e da p p r o a c h e s 非模型法 m o d e l i n d e p e n d e n ta p p r o a c h e s 模 型依赖法 m o d e l d e p e n d e n ta p p r o a c h e s 每一种又包括许多具体的方法 其中 非模型法的 相似因子法能灵敏 准确地反映溶出或释放曲线之间的差异 有文 献对f 2 相似因子法和模型依赖法进行对比 认为f 2 相似因子法优于模型依赖法 能更直观 准确 定量地体现体外溶出的差异 可直接对每一溶出数据进行统计 分析 避免了通过模型拟合再进行统计分析所引起的误差 本试验采用丘相似因 子法进行f k 5 0 6 固体分散体体外溶出度的统计分析 龟相似因子法 f 2f i tf a c t o r 能定量评价制剂的体外溶出度差异 该方法为f d a 下属机构c d e r c e n t e rf o rd r u ge v a l u 撕o na n dr e s e a r c h 推荐采用 基本方程为 阡 1 划 1 厶 5 0 l o g l l n x 彬 r i 2i 1 0 0 l l j 1 j j 其中龟 相似因子 t 时间对照制剂的累积溶出百分率 t t t 时间试验制剂的累积溶出百分率 3 1 第二部分他克莫司固体分散体的制备及其体外特性研究 n 溶出度试验取样点数 w t 权重因子 该方程是方差总和的对数转换形式 f 2 值可以灵敏地反映出两者体外溶出度 的差异 龟值在5 0 1 0 0 之间表明两条曲线相似 t 2 越大 体外溶出度越接近 当 f 2 1 0 0 时 两者具有完全相同的溶出度 f 2 h p m c f 6 8 p v p t a b2 1s o l u b i l i t i e so ff k 5 0 6s o l i dd i s p e r s i o n s i t g m l 3 1 2 体外溶出度试验 3 1 2 1 固体分散体在水中的溶出曲线 f k 5 0 6 经6 0 m i n 的体外溶出仍不到1 0 各物理混合物均从2 0 m i n 后才有少 量溶出 且4 5 m i n 时溶出均 s 4 0 f 6 8 p v p 3 4 第二部分他克莫司固体分散体的制各及其体外特性研究 o51 01 52 02 53 03 5 4 0 4 5 a o5l o1 52 02 53 03 54 04 5 b 3 5 o o o o o o o o o o o 加9 8 7 6 5 4 3 2 1 一渗一a暑g皇 譬 臣言aio sl曙 帅蛐踟加矾卯 册加加o 渗v 爵 口 譬 盘鼍 一e的叻q 第二部分他克莫司固体分敌体的制各及其体外特性研究 1 0 0 9 0 8 0 7 0 6 0 5 0 4 0 3 0 2 0 1 0 0 o51 01 52 02 53 0 3 54 04 5 c o5l o1 52 02 53 0 3 54 04 5 d f i g2 1 t h ed i s s o l u t i o np r o f d e so ff k 5 0 6f r o ms o l i dd i s p e r s i o n s s d n 6 a f 碣s d ib 一 4 0s d c p v ps d id 一 p m cs d 3 6 o o o o o o o o o o o o 9 8 7 6 5 4 3 2 l 瀑一 眦墨皇03j 盘pa lo 弓 瀑v口m o葺 u im邑 一o m 弓 第二部分他克莫司固体分散体的制备及其体外特性研究 t a b2 2d i s s o l v e dp e r c e n t a g i e sa t5 r a i no ff k 5 0 6s o l i dd i s p e r s i o n s 体外溶出度的大小和固体分散体本身的物理特性有关 载体f 6 8 s 4 0 为蜡状 固体 熔点较低 为5 0 5 5 因此采用溶剂 熔融法制备 制成的固体分散 体较粘 似蜡状 体外溶出加快的效果不如p v p h i m c 载体p v p h p m c 的 熔点较高 因此采用溶剂法制备 制成的固体分散体质脆 易粉碎 以p v p 为载体制备的固体分散体 溶解度增加不大 以i i p m c 为载体制备的 固体分散体在水中溶解度增加2 0 倍左右 由图2 1 d 可见体外溶出较好 以药物 丑m1 5 比例制备的固体分散体 体外溶出与 m c 1 1 0 相似 且5 m i n 的溶出百分数最高 故选择 p m c 作为f k 5 0 6 固体分散体的载体 药物 h p m c 之比为1 5 3 1 2 2 离心或微孔滤膜过滤对含量的影响 表2 3 列出了离心和微孔滤膜 o 8 t n 过滤后 已知浓度对照品溶液中f k 5 0 6 的含量变化 从表2 3 可见 f k 5 0 6 溶液经微孔滤膜过滤后 含量分别为原来的 6 2 5 一7 0 3 表明微孔滤膜对f k 5 0 6 有吸附性 会造成体外溶出度测定的不准 确 因此采用取样后4 0 0 0 w i n 离心1 0 r a i n 取上清液直接进样测定的方法 t a b2 3c o n t e n to ff k 5 0 6s t a n d a r ds o l u t i o na f t e rc e n t r i f u g e da n df d t e r e d g i n l 一3 7 第二部分他克莫司固体分散体的制各及其体外特性研究 3 1 2 3 静置6 h 对含量的影响 表2 4 列出了静置6 h 前后 已知浓度样品溶液中融5 0 6 的含量变化 从表 2 4 可见 f k 5 0 6 样品液静置6 h 后 含量分别为原来的9 7 5 1 0 3 0 表明静 置6 h 对f k 5 0 6 的含量测定没有影响 可以省略此项操作 t a b2 4c o n t e n to ff k 5 0 6s t a n d a r ds o l u t i o na f t e rs t o o d6 h 1 咖i 一 3 1 2 a 统计分析 采用龟相似因子法 对相同载体 不同药物 载体比例的4 组固体分散体体外 溶出度进行纵向比较 以本组5 m i n 最快溶出的为标准 结果见表2 5 表明采用 f 6 8 s 4 0 为载体材料 不同药物 载体比例制成的固体分散体的体外溶出度无显著 性差异 而p v p 和阳m i c 为载体材料时 不同药物 载体制成的固体分散体的体 外溶出度有显著性差异 其中p v p 1 2 0 为p v p 组溶出最快 阳 m c 1 5 为h p m c 组溶出最快 以f k 5 0 6 h p m c 1 5 固体分散体为标准 比较f 6 8 1 2 0 4 0 1 2 0 p v p 1 2 0 的体外溶出度 见图2 2 f 2 相似因子分别为4 1 2 6 3 7 9 3 3 6 2 5 均 5 0 有显著性差异 表明h p m c 1 5 的体外溶出最快 t a b2 5 f 2v a l u eo fd i f f e r e n tf k 5 0 6 c a r r i e rr a t i ou s i n g5 m i nf a s t e s td i s s o l u t i o n a ss t a n d a r d 3 8 第二部分他克莫司固体分敖体的制各及其体外特性研究 o51 01 52 02 53 03 54 04 5 f i g2 2 t h ed i s s o l u t i o np r o f i l eo ff k 5 0 6f r o ms o l i dd i s p e r s i o n n 6 3 2 固体分散体的物相鉴别 3 2 1 差示扫描量热法 d s c f k 5 0 6 4 种载体 药物 载体 1 5 物理混合物及固体分散体的d s c 测定 结果见图2 3 其中f k 5 0 6 的吸热峰在1 3 0 左右 4 种载体的固体分散体在1 3 0 均未出峰 峰形和相应载体一致 峰位有少许位移 提示药物与4 种载体均可能 形成了共沉淀物 物理混合物中 药物和p v p h p m c 的混合物仍出现微弱药物 峰 药物和f 6 8 4 0 混合物的d s c 图中 f k 5 0 6 的吸热峰消失 可能在升温过 程中 f 6 8 5 4 0 分别在5 5 c 和5 l 左右熔融 f k 5 0 6 溶解在其中 相当于形成 了固体分散体所致 3 9 o o o o o o o o o o o 0 9 8 7 6 5 4 3 2 1 一零v 墨皇 譬 厶paalo踢ip 第二部分他克莫司固体分散体的制备及其体外特性研究 柏 1 0 0 d 和蚋 唧 1 4 l 葛d 5 d o d 0 一o d 柏 一j e m p e r 蛐 总 柏 几 a 4 0 1 0 0 t e m 幛 a t u r e c b 4 0 及其体外特性研究 d s c 伽 f 神 5 劬由 d1 1 0 0 1 2 0 m 1 惝t e r c c 一 1 5 0 6 一 一 p e a k 9 88c h p m c 一 叫 一 l e 1 5 p 竺吵1 旷c p e a k 1 2 8 3 c q l y t l s d l l 5 j f e a k 一1 伦9 c1 1 d d 0 d1 1 0 d t d t t m d 1 且 f i g2 3 d s cc u r v e so ff k 5 0 6 c a r r i e r s p h y s i c a lm i x t u r e sa n ds o l i dd i s p e r s i o n s s d 4 1 第二部分他克莫司固体分散体的制备及其体外特性研究 3 2 2x 一射线衍射法 m f k 5 0 6 4 种载体 药物 载体 1 5 物理混合物及固体分散体的 a r d 测 定结果见图2 4 其中f k 5 0 6 的结晶衍射峰明显 4 种物理混合物亦出现微弱衍 射峰 固体分散体都不具有结晶衍射峰 峰形和载体一致 提示药物可能以无定 型或分子状态分散在载体中 啊 a u 扫 百 c 2 三 o51 01 52 0 2 5 3 03 5 4 0 2 e o i a o51 01 52 0 2 5 3 03 5 4 0 2 e l b 4 2 眦 堇 一 薹 舢 一 一 o 锄 彻 一 一 帅 一 耋耄 伽 第二部分他克莫司固体分散体的制备及其体外特性研究 台3 0 0 0 暑 2 0 0 0 c o 枷 姗 伽 051 01 52 0筠3 0弱4 0 2 0 i c o 5 1 01 5 嚣 葛 柏 硼 d f i g2 4 x r dc u r v e so ff k 5 0 6 c a r r i e r s p h y s i c a lm i x t u r e sa n ds o l i dd i s p e r s i o n s 一aov 暑 暑 c 第二部分他克莫司固体分散体的制备及其体外特性研究 3 2 3 红外光谱测定法 f t i r f k 5 0 6 p m c 药物 h p m c 1 5 物理混合物及固体分散体的f t i r 测定 结果见图2 5 其中物理混合物与f k 5 0 6 的图谱峰位相似 强度减弱 h p m c 在一 定程度上掩盖了艮5 0 6 的官能团峰 固体分散体与h p m c 的图谱峰相似 在 1 7 2 4 c m l 的羰基峰消失 1 6 9 3c m 1 6 3 9c m 1 的羰基峰移动到1 6 5 1c m l 提示f k 5 0 6 的羰基和h p m c 的功能基发生了相互作用 砌铆 锄啪岫崂胁l f i g2 5 f t i rc u r v e so ff k 5 0 6 h p m c p h y s i c a lm i x t u r e sa n ds o l i dd i s p e r s i o n 4 4 嚣亡 鍪e杆c要卜雾 蕾oc前皇e打c墨t暴 偶 固 四 柏诬蜘镯 瑚 棚切 一氲甘 垂琶鼽 僻 轧拉嘉 簟廿c蓐置l 譬孳h 爷 第二部分他克莫司固体分敌体的制各及其体外特性研究 3 3 固体分散体制备工艺的研究 3 3 1 采用乙醇 水溶剂系统制备固体分散体 根据用水量最小的原则 溶解h p m c 的最小用水体积为5 0 0 m gh p m c 1 5 m l 水 根据蒸发时间最短的原则 乙醇用量为1 0 0 m gf k 5 0 6 3 5 m l 乙醇 即乙醇一 水的比例相当于7 0 3 0 比较乙醇一水 7 0 3 0 溶剂条件下 不同温度 5 0 6 0 8 0 1 0 0 c 蒸干对药物含量的影响 结果见表2 6 表明在有水存在的条件下 f k 5 0 6 对热不 稳定 加热条件5 0 c 1 8 0 m i n 药物含量下降为9 4 5 6 6 0 3 0 m i n 药物含量下 降为9 4 9 3 t a b2 6c o n t e n to ff k 5 0 6i na l c o h o l w a t e r 7 0 3 0 s o l v e n tu n d e rd i f f e r e n t e v a p o r a t i o nt e m p e r a t u r e 鉴于f k 5 0 6 对温度敏感 本试验试图采用减压蒸发 冷冻干燥的方法除去溶 剂 结果发现 减压蒸发时 f k 5 0 6 析出 分析原因可能是未达到共沸状态 乙醇 先蒸发 主药溶解度降低而析出 据文献 凋报道 常压下9 6 4 7 乙醇才能达到共沸 恒沸点为7 8 1 5 c 因此 以乙醇 水 7 0 3 0 作为溶剂 用减压蒸发的方法不可 行 4 5 第二部分他克莫司固体分散体的制餐及其体外特性研究 文献 2 1 1 报道 f k 5 0 6 在水溶液中易发生顺反异构 形成多种立体互变异构体之 间的复杂平衡 影响制剂中药物的稳定性 综合以上因素 采用乙醇一水溶剂系统 制备固体分散体不可行 3 3 2 采用乙酵一 氯甲烷溶剂系统制各固体分散体 乙醇b p7 8 1 5 1 2 二氯甲烷b p4 0 h p m c 溶于两者组成的混合溶剂 当二 氯甲烷 乙醇 1 1 时 混合溶剂的粘度最低瞵 5 9h p m c 可均匀分散在2 5 m l 乙醇中 且粘度适中 l gf k 5 0 6 溶解在2 5 m l 二氯甲烷中 再将两者均匀混合 形成f k 5 0 6 的乙醇一二氯甲烷溶液 参考乙醇 一水溶剂系统制备固体分散体时对温度的影响 采用5 0 旋转蒸发法除去溶剂 结 果表明f k 5 0 6 含量无变化 为9 9 2 1 o 1 0 最终确定制备工艺如下 首先将5 9h p m c 均匀分散在2 5 m l 乙醇中 逐渐添加 已溶有l gf k 5 0 6 的二氯甲烷2 5 m l 轻轻搅拌至完全溶解 5 0 旋转蒸发除去溶剂 一1 8 冷冻6 h 真空干燥2 4 h 研细 过8 0 目筛即得 四 第二部分小结 l 本试验采用表面活性剂泊洛沙姆1 8 8 f 6 8 和硬脂酸聚烃氧 4 0 酯 s 4 0 非表面活性剂聚维酮p v p k 2 9 3 2 和羟丙甲纤维素 瑚 m ce 3 为水溶性载体材料 以溶剂一熔融法和溶剂法制各f k 5 0 6 固体分散体 以溶解度和体外溶出度为重要 指标 筛选合适的载体和药物 载体的配比 结果表明所有固体分散体的溶解度和溶 出度都提高 其中采用瑚m c 为载体材料制成的固体分散体 药物删c 为l 5 溶解度由原料药的2 7 9 1 t g m l 增加至5 6 4 8 9 9 m l 在水中溶出最快 5 m i n 溶出即达 7 3 1 1 故最终选择h p m c 为载体 药物 船l m c 之比为1 5 2 进行固体分散体的物相鉴别 以差示扫描量热法 d s c 和x 一射线衍射法 r d 分析f k 5 0 6 在固体分散体中以无定型或分子状态高度分散 以红外光谱测定法 f t 瓜 探测药物与载体间发生了相互作用 4 6 第二部分他克莫司固体分散体的制各及其体外特性研究 3 由于f k 5 0 6 对温度敏感和在水溶液中易发生顺反异构 影响制剂中药物的稳定 性等因素 最终采用乙醇一二氯甲烷溶剂系统制备固体分散体 制备方法如下 首 先将5 9h p m c 均匀分散在2 5 m l 乙醇中 逐渐添加已溶有l gf k 5 0 6 的二氯甲烷 2 5 m l 轻轻搅拌至完全溶解 5 0 c 旋转蒸发除去溶剂 1 8 c 冷冻6 h 真空干燥2 4 h 研细 过8 0 目筛即得 为进一步制备理想的f k 5 0 6 固体分散体胶囊剂奠定基础 4 7 第三部分他克其司固体分散体胶囊剂的制各和质量标准研究 第三部分他克莫司固体分散体胶囊剂的制备和质量标准研究 由于本品的主药含量极少 1 i n g 制成胶囊剂需加入适量的填充剂 同时 需加入适量的助流剂以增加粉体流动性 提高胶囊装量的准确性 以f k 5 0 6 体 外溶出度为指标 比较两种型号的微晶纤维素p h 3 0 1 p h 一3 0 2 以休止角为指 标 对助流剂的种类和用量进行筛选 考察加入不同助流剂对粉体流动性的影响 采用差示扫描量热法 d s c 观测药物与辅料之间的相互作用 确定f k 5 0 6 固 体分散体胶囊剂的处方及制备工艺后 重复制备3 批胶囊剂 对其进行含量和有 关物质 4 5 m i n 体外溶出度考察 并采用f 2 相似因子法比较批间差异 同时初步 探讨了f k 5 0 6 固体分散体胶囊剂的体外溶出机制 考察各因素对体外溶出度测定的影响 优化了体外溶出度测定条件 对 f k 5 0 6 固体分散体胶囊剂的质量进行研究 包括化学鉴别 t l c 鉴别 h p l c 鉴别 含量 有关物质和体外溶出度的测定 乙醇和二氯甲烷残留量的测定等 一 材料与仪器 1 1 材料 f k 5 0 6 对照品 批号0 4 1 0 0 1 台山市化学制药有限公司 f k 5 0 6 原料药 批号0 4 1 0 8 0 2 台山市化学制药有限公司 进口f k 5 0 6 胶囊剂 普乐可复 p r o g r a f 日本藤泽药品株式会社 批号1 c 5 7 6 0 a 羟丙甲纤维素 h p m ce 3 批号p g 2 2 0 2 1 n 2 1 美国c o l o r c o n 公司 微晶纤维素 a v i c e lp h 一3 0 1 批号3 4 3 3 日本旭化成化学株式会社 微粉硅胶 a e r o s i l2 0 0 德国d e g u s s a 公司 滑石粉 硬脂酸镁中国医药集团上海化学试剂公司 空心明胶硬胶囊 批号1 3 3 9 1 苏州胶囊有限公司 硅胶g f 2 5 4 薄层板 批号2 0 0 2 0 8 0 6 福山生化试剂厂 甲醇 色谱纯 江苏汉邦科技有限公司 乙腈 色谱纯 美国m e r c k 公司 磷酸二氢钾 氢氧化钠 磷酸 盐酸 二氯甲烷 无水乙醇 n n 一二甲基甲酰胺 d m f 均为分析纯 1 2 仪器 a e l 0 0 电子天平 l c 1 0 a t 高效液相色谱仪 美国m e t t l e rt o l e d o 仪器公司 日本s h i m a d z u 公司