食品免疫学 6抗原和抗体的制备.pdf

第六章第六章 单克隆抗体的单克隆抗体的 制备和应用制备和应用 第六章第六章 单克隆抗体的单克隆抗体的 制备和应用制备和应用 Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only 本章内容本章内容 第一节第一节 单克隆抗体的概念和基本原理单克隆抗体的概念和基本原理 第二节第二节 单克隆抗体制备的主要步骤单克隆抗体制备的主要步骤 第一节第一节 单克隆抗体的概念和基本原理单克隆抗体的概念和基本原理 第二节第二节 单克隆抗体制备的主要步骤单克隆抗体制备的主要步骤 Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only Niels K JerneGeorges J F K hlerC sar Milstein Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only 克隆克隆 Clone 又名无性繁殖系 指由一个祖 先细胞经分化 增殖所产生的遗传性状完全相 同的细胞群 又名无性繁殖系 指由一个祖 先细胞经分化 增殖所产生的遗传性状完全相 同的细胞群 Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only 多克隆抗体 多克隆抗体 Polyclonal antibody pAb 用包含多种抗原决定基的抗原物质免疫动 物 从而刺激多个 用包含多种抗原决定基的抗原物质免疫动 物 从而刺激多个B细胞克隆产生针对多种抗 原表位的不同抗体的总和 称为多克隆抗体 细胞克隆产生针对多种抗 原表位的不同抗体的总和 称为多克隆抗体 单克隆抗体 单克隆抗体 Monoclonal Antibody mAb 由一个杂交瘤细胞克隆所产生的 针对单一抗原 决定簇的抗体 称为单克隆抗体 由一个杂交瘤细胞克隆所产生的 针对单一抗原 决定簇的抗体 称为单克隆抗体 Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only 单克隆抗体的优点单克隆抗体的优点单克隆抗体的优点单克隆抗体的优点 单特异性和均一性单特异性和均一性 无限供应无限供应 用混合的抗原制备出识别一个抗原决定簇的抗体用混合的抗原制备出识别一个抗原决定簇的抗体 Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only B B淋巴细胞杂交瘤技术的基本原理淋巴细胞杂交瘤技术的基本原理淋巴细胞杂交瘤技术的基本原理淋巴细胞杂交瘤技术的基本原理 B细胞骨髓瘤细胞细胞骨髓瘤细胞 杂交瘤细胞杂交瘤细胞 Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only 杂交细胞 杂交细胞 hybrid cell 在外界某些条件干预下 如在外界某些条件干预下 如PEG 电穿 孔 当两个细胞紧密地接触的时候 电穿 孔 当两个细胞紧密地接触的时候 其细胞膜 可能发生融合 产生具有原来两个细胞染色体 其细胞膜 可能发生融合 产生具有原来两个细胞染色体 基因的单个细胞 称为基因的单个细胞 称为杂交细胞杂交细胞 Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only 杂交瘤细胞 杂交瘤细胞 Hybridomas 若用一种肿瘤细胞与另一种体细胞 如淋 巴细胞 融合 所形成的杂交细胞称为杂交瘤 细胞 简称 若用一种肿瘤细胞与另一种体细胞 如淋 巴细胞 融合 所形成的杂交细胞称为杂交瘤 细胞 简称杂交瘤杂交瘤 其既具有肿瘤细胞无限增 殖的能力 也具有淋巴细胞的一些特性 其既具有肿瘤细胞无限增 殖的能力 也具有淋巴细胞的一些特性 B淋巴细胞杂交瘤淋巴细胞杂交瘤 骨髓瘤细胞与免疫骨髓瘤细胞与免疫B细胞融合所产生的杂 交瘤细胞 细胞融合所产生的杂 交瘤细胞 Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only 抗原制备抗原制备 免疫动物免疫动物 骨髓瘤细胞及饲养细胞的制备骨髓瘤细胞及饲养细胞的制备 细胞融合细胞融合 杂交瘤细胞的选择培养杂交瘤细胞的选择培养 杂交瘤细胞的筛选及克隆化杂交瘤细胞的筛选及克隆化 单克隆抗体的鉴定单克隆抗体的鉴定 单克隆抗体的制备单克隆抗体的制备 第二节第二节 单克隆抗体制备的主要步骤单克隆抗体制备的主要步骤第二节第二节 单克隆抗体制备的主要步骤单克隆抗体制备的主要步骤 Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only 一 抗一 抗 原原一 抗一 抗 原原 细胞 细菌和病毒等 一般具有较强的免疫原 性 可不加佐剂 例如 直接腹腔注射 细胞 细菌和病毒等 一般具有较强的免疫原 性 可不加佐剂 例如 直接腹腔注射1 2 107 个细胞 个细胞 颗粒性抗原 颗粒性抗原 可溶性抗原的来源主要是天然纯化 或者用目 的基因在原核或真核细胞内表达 可溶性抗原需 与弗氏完全或不完全佐剂混匀 进行免疫 可溶性抗原的来源主要是天然纯化 或者用目 的基因在原核或真核细胞内表达 可溶性抗原需 与弗氏完全或不完全佐剂混匀 进行免疫 可溶性抗原 可溶性抗原 Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only B B淋巴细胞在目的抗原刺激下增殖 分化 淋巴细胞在目的抗原刺激下增殖 分化 形成能分泌特异性抗体的形成能分泌特异性抗体的 淋巴细胞在目的抗原刺激下增殖 分化 淋巴细胞在目的抗原刺激下增殖 分化 形成能分泌特异性抗体的形成能分泌特异性抗体的B B淋巴细胞 有利于细淋巴细胞 有利于细 胞融合形成分泌特异性抗体的杂交瘤细胞 多次胞融合形成分泌特异性抗体的杂交瘤细胞 多次 免疫可通过抗体亲和力成熟机制 使免疫可通过抗体亲和力成熟机制 使 淋巴细胞 有利于细淋巴细胞 有利于细 胞融合形成分泌特异性抗体的杂交瘤细胞 多次胞融合形成分泌特异性抗体的杂交瘤细胞 多次 免疫可通过抗体亲和力成熟机制 使免疫可通过抗体亲和力成熟机制 使B B细胞分泌细胞分泌 高亲和力抗体 由此形成的杂交瘤往往可分泌高高亲和力抗体 由此形成的杂交瘤往往可分泌高 亲和力抗体 有更高的应用价值 亲和力抗体 有更高的应用价值 细胞分泌细胞分泌 高亲和力抗体 由此形成的杂交瘤往往可分泌高高亲和力抗体 由此形成的杂交瘤往往可分泌高 亲和力抗体 有更高的应用价值 亲和力抗体 有更高的应用价值 二 免疫动物二 免疫动物二 免疫动物二 免疫动物 免疫目的 免疫目的 Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only 采用与骨髓瘤供体同一品系的动物 免疫动物品系 脾细胞供体 和骨髓瘤细胞 在种系发生上距离越远则产生的杂交瘤越不稳定 获得的杂交瘤不能在该品系小鼠体内诱生腹水 采用与骨髓瘤供体同一品系的动物 免疫动物品系 脾细胞供体 和骨髓瘤细胞 在种系发生上距离越远则产生的杂交瘤越不稳定 获得的杂交瘤不能在该品系小鼠体内诱生腹水 动物的选择 动物的选择 动物对抗原刺激易产生免疫应答反应动物对抗原刺激易产生免疫应答反应 8 12周龄雌性小鼠 最常用周龄雌性小鼠 最常用BALB c Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only 第一次免疫 可溶性抗原加弗氏完全佐剂 第二次免疫 可溶性抗原加弗氏不完全佐剂 第三次免疫 可溶性抗原加生理盐水 第一次免疫 可溶性抗原加弗氏完全佐剂 第二次免疫 可溶性抗原加弗氏不完全佐剂 第三次免疫 可溶性抗原加生理盐水 小鼠背部皮下注射 小鼠背部皮下注射 小鼠背部皮下注射 小鼠背部皮下注射 4周后周后 3周后周后 小鼠腹腔注射小鼠腹腔注射 10天后 检测血清效价 天后 检测血清效价 加强免疫 可溶性抗原加生理盐水加强免疫 可溶性抗原加生理盐水 小鼠腹腔注射小鼠腹腔注射 细胞融合细胞融合 3天后天后 免疫程序 免疫程序 Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only 脾 脾 spleen 抗原抗原 脾 脾 spleen Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only 所选择的骨髓瘤细胞应与提供免疫脾细胞的动物 品系相同 所选择的骨髓瘤细胞应与提供免疫脾细胞的动物 品系相同 三 骨髓瘤细胞及饲养细胞的制备三 骨髓瘤细胞及饲养细胞的制备三 骨髓瘤细胞及饲养细胞的制备三 骨髓瘤细胞及饲养细胞的制备 骨髓瘤细胞系的选择要点 骨髓瘤细胞系的选择要点 自身不产生免疫球蛋白的重链与轻链自身不产生免疫球蛋白的重链与轻链 对氨基碟呤敏感对氨基碟呤敏感 与免疫脾细胞融合后产生稳定分泌与免疫脾细胞融合后产生稳定分泌Ig杂交瘤细胞杂交瘤细胞 Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only 饲养细胞的作用 饲养细胞的作用 饲养细胞的作用 饲养细胞的作用 小鼠腹腔巨噬细胞小鼠腹腔巨噬细胞小鼠腹腔巨噬细胞小鼠腹腔巨噬细胞 小鼠脾细胞小鼠脾细胞小鼠脾细胞小鼠脾细胞 饲养细胞 饲养细胞 feeder cell 增加细胞密度增加细胞密度 满足新生的杂交瘤细胞对满足新生的杂交瘤细胞对 细胞密度的要求细胞密度的要求 增加细胞密度增加细胞密度 满足新生的杂交瘤细胞对满足新生的杂交瘤细胞对 细胞密度的要求细胞密度的要求 吞噬清除死亡的细胞吞噬清除死亡的细胞吞噬清除死亡的细胞吞噬清除死亡的细胞 分泌生长刺激因子促进杂交瘤细胞的生长分泌生长刺激因子促进杂交瘤细胞的生长分泌生长刺激因子促进杂交瘤细胞的生长分泌生长刺激因子促进杂交瘤细胞的生长 饲养细胞的种类和制备方法 饲养细胞的种类和制备方法 饲养细胞的种类和制备方法 饲养细胞的种类和制备方法 Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only 四 细胞融合四 细胞融合四 细胞融合四 细胞融合 融合前的准备工作融合前的准备工作 准备准备准备准备HATHAT HTHT培养液 融合剂培养液 融合剂培养液 融合剂培养液 融合剂PEGPEG 准备饲养细胞准备饲养细胞准备饲养细胞准备饲养细胞 准备骨髓瘤细胞准备骨髓瘤细胞准备骨髓瘤细胞准备骨髓瘤细胞 准备免疫脾细胞准备免疫脾细胞准备免疫脾细胞准备免疫脾细胞 Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only 拉颈处死小鼠拉颈处死小鼠 无菌操作取出脾脏无菌操作取出脾脏 清洗 研磨清洗 研磨 收集细胞收集细胞 离心洗涤离心洗涤 细胞计数细胞计数 脾细胞的准备脾细胞的准备 Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only 收集细胞收集细胞 离心洗涤离心洗涤 活细胞计数活细胞计数 调整细胞浓度调整细胞浓度 骨髓瘤细胞的准备骨髓瘤细胞的准备 Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only 细胞融合细胞融合 骨髓瘤细胞与脾细胞 按一定比例混合 骨髓瘤细胞与脾细胞 按一定比例混合1 10或或1 5 加入促融剂加入促融剂PEG PEG Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only 在聚乙二醇作用下在聚乙二醇作用下B淋巴细胞可与 骨髓瘤细胞发生融合 形成杂交瘤细胞 淋巴细胞可与 骨髓瘤细胞发生融合 形成杂交瘤细胞 Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only 五 杂交瘤细胞的选择性培养五 杂交瘤细胞的选择性培养五 杂交瘤细胞的选择性培养五 杂交瘤细胞的选择性培养 HATHAT选择性培养的原理 选择性培养的原理 选择性培养的原理 选择性培养的原理 细胞的细胞的细胞的细胞的DNADNA生物合成有主要途径和补偿途径 生物合成有主要途径和补偿途径 当有氨基碟呤存在时 能够阻断当有氨基碟呤存在时 能够阻断 生物合成有主要途径和补偿途径 生物合成有主要途径和补偿途径 当有氨基碟呤存在时 能够阻断当有氨基碟呤存在时 能够阻断DNADNA合成的主要途合成的主要途 径 需通过补偿途径合成径 需通过补偿途径合成 合成的主要途合成的主要途 径 需通过补偿途径合成径 需通过补偿途径合成DNADNA 这时就需要次黄嘌 这时就需要次黄嘌 呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶 呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶 这时就需要次黄嘌 这时就需要次黄嘌 呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶 呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶 HGPRTHGPRT 利用次黄嘌呤 利用次黄嘌呤 合成合成 利用次黄嘌呤 利用次黄嘌呤 合成合成DNADNA 或胸腺嘧啶核苷激酶 或胸腺嘧啶核苷激酶 或胸腺嘧啶核苷激酶 或胸腺嘧啶核苷激酶 TKTK 利用胸腺嘧 利用胸腺嘧 啶核苷合成啶核苷合成 利用胸腺嘧 利用胸腺嘧 啶核苷合成啶核苷合成DNADNA Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only 用于杂交瘤融合的骨髓细胞缺乏用于杂交瘤融合的骨髓细胞缺乏HGPRT和和TK 在 在HAT培养液中 未融合的骨髓瘤细胞因缺乏培养液中 未融合的骨髓瘤细胞因缺乏 HGPRT和和TK 不能利用补救途径合成 不能利用补救途径合成DNA而死 亡 未融合的 而死 亡 未融合的B淋巴细胞虽具有淋巴细胞虽具有HGPRT和和TK 但 其本身不能在体外长期存活也逐渐死亡 只有骨髓瘤细胞与免疫 但 其本身不能在体外长期存活也逐渐死亡 只有骨髓瘤细胞与免疫B细胞融合的杂交瘤既 有骨髓瘤细胞无限增殖的能力 又从免疫 细胞融合的杂交瘤既 有骨髓瘤细胞无限增殖的能力 又从免疫B细胞得 到 细胞得 到HGPRT和和TK 的基因产物 因此 能够克服氨基 碟呤的阻断作用 通过次黄嘌呤的补偿途径合成 的基因产物 因此 能够克服氨基 碟呤的阻断作用 通过次黄嘌呤的补偿途径合成 DNA 而在 而在HAT选择培养液中生长繁殖 选择培养液中生长繁殖 Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only 融合后融合后3 4天后 可 见外形似骨髓瘤细胞 浑 圆透亮的克隆 融合后第 天后 可 见外形似骨髓瘤细胞 浑 圆透亮的克隆 融合后第7 9天取培养上 清 检测特异性抗体 天取培养上 清 检测特异性抗体 细胞生长情况细胞生长情况 Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only 六 杂交瘤细胞的筛选及克隆化六 杂交瘤细胞的筛选及克隆化六 杂交瘤细胞的筛选及克隆化六 杂交瘤细胞的筛选及克隆化 杂交瘤分泌单克隆抗体的检测方法杂交瘤分泌单克隆抗体的检测方法 免疫酶技术免疫酶技术 间接间接ELISA 包被抗原 培养上清 酶标抗体 加底物显色包被抗原 培养上清 酶标抗体 加底物显色 阴性对照 阴性对照 骨髓瘤细胞培养上清骨髓瘤细胞培养上清 阳性对照 阳性对照 免疫鼠血清免疫鼠血清 免疫荧光技术免疫荧光技术 间接免疫荧光 或酶 测定法 靶细胞铺片 固定细胞 加待测样品 加荧光标记抗体 或 加酶标抗体和显色底物 镜检 间接免疫荧光 或酶 测定法 靶细胞铺片 固定细胞 加待测样品 加荧光标记抗体 或 加酶标抗体和显色底物 镜检 活细胞免疫荧光技术 流式细胞术分析活细胞免疫荧光技术 流式细胞术分析 Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only 杂交瘤细胞的克隆化杂交瘤细胞的克隆化 在在HAT培养基中生长的杂交瘤细胞 只有 少数是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞 因 此 必须进行筛选和克隆化 克隆化 培养基中生长的杂交瘤细胞 只有 少数是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞 因 此 必须进行筛选和克隆化 克隆化 即把培养孔中的细胞从单个细胞 进行培养繁殖 使之成为单克隆 其分泌的抗 体达到均一性 即把培养孔中的细胞从单个细胞 进行培养繁殖 使之成为单克隆 其分泌的抗 体达到均一性 Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only 有限稀释法有限稀释法 Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only 软琼脂培养法软琼脂培养法 以适当浓度杂交瘤细胞加入软琼脂培养以适当浓度杂交瘤细胞加入软琼脂培养 基中基中 形成由一个细胞增殖而成的细胞集落形成由一个细胞增殖而成的细胞集落 软琼脂培养法软琼脂培养法 以适当浓度杂交瘤细胞加入软琼脂培养以适当浓度杂交瘤细胞加入软琼脂培养 基中基中 形成由一个细胞增殖而成的细胞集落形成由一个细胞增殖而成的细胞集落 Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only 杂交瘤细胞的克隆化筛选 杂交瘤细胞的克隆化筛选 杂交瘤细胞的克隆化筛选 杂交瘤细胞的克隆化筛选 Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only 免疫球蛋白类别及亚类的鉴定免疫球蛋白类别及亚类的鉴定 七 单克隆抗体的鉴定七 单克隆抗体的鉴定七 单克隆抗体的鉴定七 单克隆抗体的鉴定 小鼠免疫脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合形 成的杂交瘤细胞 其分泌的特异性 小鼠免疫脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合形 成的杂交瘤细胞 其分泌的特异性McAb的本 质仍是小鼠的不同类型及其亚类的免疫球蛋白 的本 质仍是小鼠的不同类型及其亚类的免疫球蛋白 Ig 其中以 其中以IgG IgG1 IgG2a IgG2b和和 IgG3等亚类 最常見 其次为等亚类 最常見 其次为IgM Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only 抗体亲和力是指抗体与抗原或半抗原结 合的强度 其高低主要是由抗体分子结合表 位部位和抗原决定簇之间的互补程度决定 抗体亲和力是指抗体与抗原或半抗原结 合的强度 其高低主要是由抗体分子结合表 位部位和抗原决定簇之间的互补程度决定 特异性 是否与其他抗原有交叉反应特异性 是否与其他抗原有交叉反应 敏感性 对腹水和培养上清进行效价测定敏感性 对腹水和培养上清进行效价测定 亲和力测定亲和力测定 Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only 八 单克隆抗体的制备八 单克隆抗体的制备八 单克隆抗体的制备八 单克隆抗体的制备 动物体内诱生法动物体内诱生法 取取Balb c小鼠小鼠 首先腹 腔注射 首先腹 腔注射0 5ml液体石腊或 降植烷进行预处理 液体石腊或 降植烷进行预处理 1 2周后周后 腹腔内接种杂交 瘤细胞 杂交瘤细胞在小鼠 腹腔内增殖 并产生和分泌 单克隆抗体 腹腔内接种杂交 瘤细胞 杂交瘤细胞在小鼠 腹腔内增殖 并产生和分泌 单克隆抗体 Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only 约约1 2周周 可见小鼠 腹部膨大 用注射器 抽取腹水 即可获得 大量单克隆抗体 可见小鼠 腹部膨大 用注射器 抽取腹水 即可获得 大量单克隆抗体 Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only 将杂交瘤细胞置于培 养瓶 或灌 中进行培养 在培养过程中 杂交瘤细胞 产生并分泌单克隆抗体 收 集培养上清液 离心去除细 胞及其碎片 即可获得所需 要的单克隆抗体 不含无关 将杂交瘤细胞置于培 养瓶 或灌 中进行培养 在培养过程中 杂交瘤细胞 产生并分泌单克隆抗体 收 集培养上清液 离心去除细 胞及其碎片 即可获得所需 要的单克隆抗体 不含无关 Ig 但成本髙 但成本髙 体外培养法体外培养法 Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only 我国单克隆抗体的发展历史和前景我国单克隆抗体的发展历史和前景我国单克隆抗体的发展历史和前景我国单克隆抗体的发展历史和前景 早期研究阶段早期研究阶段 全军单克隆抗体研究协作组 单克隆抗体通迅 全军单克隆抗体研究协作组 单克隆抗体通迅 应用和市场化应用和市场化 HLDAHCDM 功能基因组研究中的重要地位功能基因组研究中的重要地位 国家重大科技项目 国家重大科技项目 973 863等 主要研究 内容之一 等 主要研究 内容之一 Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only 单克隆抗体的应用单克隆抗体的应用单克隆抗体的应用单克隆抗体的应用 基础理论研究 生命科学 基础理论研究 生命科学 发病机理的研究发病机理的研究 疾病的预防 紧急预防 疾病的预防 紧急预防 疾病的诊断 传染性疾病 肿瘤 自身免疫 性疾病 过敏性疾病 免疫缺陷病 疾病的诊断 传染性疾病 肿瘤 自身免疫 性疾病 过敏性疾病 免疫缺陷病 疾病的治疗 治疗性抗体 疾病的治疗 治疗性抗体 一项重要的生物技术和 一类生物高科技产品 一项重要的生物技术和 一类生物高科技产品 Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only 单克隆抗体在生命科学和医学中的广泛应用单克隆抗体在生命科学和医学中的广泛应用单克隆抗体在生命科学和医学中的广泛应用单克隆抗体在生命科学和医学中的广泛应用 从医学到生命科学的各个领域从医学到生命科学的各个领域 从基础研究到临床应用从基础研究到临床应用 从诊断到预防和治疗从诊断到预防和治疗 从医学到生命科学的各个领域从医学到生命科学的各个领域 从基础研究到临床应用从基础研究到临床应用 从诊断到预防和治疗从诊断到预防和治疗 MHCMHC 细胞表面分子细胞表面分子细胞表面分子细胞表面分子 血型血型血型血型 肿瘤相关抗原和分子肿瘤相关抗原和分子肿瘤相关抗原和分子肿瘤相关抗原和分子 抗抗抗抗IgIg的同种异型的同种异型的同种异型的同种异型 激素 细胞因子和血浆成分激素 细胞因子和血浆成分激素 细胞因子和血浆成分激素 细胞因子和血浆成分 纯化干扰素纯化干扰素纯化干扰素纯化干扰素 病原生物病原生物病原生物病原生物 Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only 传染性疾病传染性疾病 HIV 急性感染期和晚期急性感染期和晚期 核心抗原核心抗原p24升高升高 检测抗检测抗HIV抗体初筛抗体初筛 免疫印迹进一步确认免疫印迹进一步确认 CD4 T 细胞细胞 200 l病情严重病情严重 HAV HBV HCV 抗体抗体 HFRS 免疫荧光 免疫荧光 ELISA 特异性 特异性IgM 肿瘤肿瘤多种肿瘤的标志物 直肠结肠癌 多种肿瘤的标志物 直肠结肠癌 CEA 前列腺癌前列腺癌 PSA 原发性肝癌原发性肝癌 AFP 淋巴瘤和白血病淋巴瘤和白血病 CD分子分子 自身免疫性和过敏性疾病自身免疫性和过敏性疾病 自身抗体 抗核抗体 类风湿因子 放射免疫测定法 自身抗体 抗核抗体 类风湿因子 放射免疫测定法 RIA 检测特异性 检测特异性IgE 甲状腺素 胰岛素 生长激素甲状腺素 胰岛素 生长激素 其他其他 血型检测 凝集反应 直接和间接 早孕 血型检测 凝集反应 直接和间接 早孕 人绒毛膜促性腺激素 人绒毛膜促性腺激素 hCG 男性不育 男性不育 抗精子抗体抗精子抗体 单克隆抗体在临床诊断中应用单克隆抗体在临床诊断中应用单克隆抗体在临床诊断中应用单克隆抗体在临床诊断中应用 Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only Fab murine antibody chimeric mouse antibody Fv dAb engineered bispecific Ab ScFv Humanized F ab 2 Humanized antibody ScFv toxin intrabody Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only Number of therapeutic mAbs entering clinical study per year Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only Therapeutic categories for mAbs in clinical study Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only 通用名批准时间类型识别抗原适应症通用名批准时间类型识别抗原适应症 Muromonab CD31986mouseCD3急性肾移植移植排斥急性肾移植移植排斥 Daclizumab Basiliximab 1997 1998 humanized chimeric IL 2R CD25 急性肾移植移植排斥急性肾移植移植排斥 Rituximab Tositumomab Ibritumomab 1997 2002 2003 mouse chimericCD20 B细胞细胞 非何杰金氏淋巴瘤 类风湿性关节炎 非何杰金氏淋巴瘤 类风湿性关节炎 Alemtuzumab2001humanizedCD52慢性慢性B淋巴细胞性白血病淋巴细胞性白血病 Gemtuzumab ozogamicin 2000chimericCD33急性粒细胞性白血病急性粒细胞性白血病 Edrecolomab 1995mouseEP CAM结 直肠癌结 直肠癌 Trastuzumab1998humanizedHER 2HER 2过表达的转移性乳腺癌过表达的转移性乳腺癌 Cetuximab2004humanizedEGFR转移性结肠癌 头颈部癌症转移性结肠癌 头颈部癌症 Bevacizumab2004 2006humanizedVEGF转移性结肠癌转移性结肠癌 年龄相关性黄斑病变年龄相关性黄斑病变 Infliximab1998 2002 chimeric human TNF 节段性回肠炎 类风湿关节炎节段性回肠炎 类风湿关节炎 银屑病性关节炎银屑病性关节炎 强直性脊柱炎强直性脊柱炎 Efalizumab2003humanizedCD11a银屑病银屑病 Natalizumab2004human 4整合素多发性硬化症整合素多发性硬化症 Omalizumab2003humanizedIgE过敏性哮喘过敏性哮喘 Abciximab 1994 chimeric GP b a 冠心病血小板冠心病血小板 Palivizumab 1998 humanized RSV 呼吸道合胞病毒感染呼吸道合胞病毒感染 Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only Characteriztion of mAbs against EpCAM by IHC and IF Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only 肿瘤 器官移植排斥 自身免疫性疾病 其他 肿瘤 器官移植排斥 自身免疫性疾病 其他 CD20 CD52 CD33 HER 2 EGFR VEGF EP CAM CD3 IL 2R CD25 TNF CD11a 4整合素整合素 CD20 GP b a IgE RSVgpF Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only Mechanisms of mAb mediated killing Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only CD20 表达于表达于B 淋巴细胞 其抗体可促进细胞对化疗 的敏感性 诱导细胞凋亡 淋巴细胞 其抗体可促进细胞对化疗 的敏感性 诱导细胞凋亡 ADCC CDC CD33 表达于表达于90 以上的急性髓样白血病以上的急性髓样白血病 AML 细胞 但不表达于骨髓 细胞 但不表达于骨髓CD34 造血干细胞 其抗体可 诱导双链 造血干细胞 其抗体可 诱导双链DNA断裂和细胞死亡断裂和细胞死亡 CD52 可诱导可诱导ADCC和和CDC 治疗慢性 治疗慢性B淋巴细胞 白血病 淋巴细胞 白血病 T细胞白血病和细胞白血病和T细胞淋巴瘤细胞淋巴瘤 白血病及淋巴瘤白血病及淋巴瘤白血病及淋巴瘤白血病及淋巴瘤 Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only 抗抗HER2 CD340 ADCC 抑制肿瘤细胞增殖 和血管形成 抑制肿瘤细胞增殖 和血管形成 抗抗EGFR 阻断阻断EGFR与与EGF结合 诱导结合 诱导ADCC 抑制细胞增殖 抑制肿瘤血管形成 诱导凋亡 抑制细胞增殖 抑制肿瘤血管形成 诱导凋亡 抗抗VEGF 阻断阻断VEGF与与VEGF受体结合 抑制 肿瘤的血管生长和转移部位的发展 受体结合 抑制 肿瘤的血管生长和转移部位的发展 实质性肿瘤实质性肿瘤实质性肿瘤实质性肿瘤 Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only 抗抗CD3 补体依赖的细胞毒作用 补体依赖的细胞毒作用 CDC 清除 清除T细胞 阻断细胞 阻断T细胞功能细胞功能 抗抗CD25 补体依赖的细胞毒作用 补体依赖的细胞毒作用 CDC 阻断 阻断IL 2受体受体 预防肾移植急性排斥反应预防肾移植急性排斥反应预防肾移植急性排斥反应预防肾移植急性排斥反应 Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only 抗抗TNF 阻断阻断TNF 与受体结合 与受体结合 降低或消除 由 降低或消除 由TNF 刺激细胞所发生的炎症反应 刺激细胞所发生的炎症反应 抗抗CD11a 抑制抑制LFA 1与配体结合与配体结合 抑制白细胞 黏附 抑制白细胞 黏附 治疗斑状牛皮癣治疗斑状牛皮癣 抗 抗 4整合素整合素 抑制抑制VLA 4与配体结合与配体结合 抑制白细胞黏附抑制白细胞黏附 CD20 治疗治疗RA 自身免疫性疾病自身免疫性疾病自身免疫性疾病自身免疫性疾病 Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only 抗抗IgE 阻断阻断IgE与与IgE受体结合受体结合 抑制肥大细胞和嗜碱性 粒细胞脱颗粒和释放介质 治疗持续性哮喘 抑制肥大细胞和嗜碱性 粒细胞脱颗粒和释放介质 治疗持续性哮喘 抗抗gp b a抑制血小板凝血 止血 预防冠状动脉 血管形成术中血栓 抑制血小板凝血 止血 预防冠状动脉 血管形成术中血栓 抗抗RSVgpF中和病毒 抑制病毒融合和复制 预防儿童在高危期 中和病毒 抑制病毒融合和复制 预防儿童在高危期RSV感染感染 其他疾病其他疾病其他疾病其他疾病 Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only 抗抗IgE mAb 治疗过敏性疾病的信号传导途径治疗过敏性疾病的信号传导途径 Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only 通用名类型识别抗原治疗疾病通用名类型识别抗原治疗疾病 Catumaxomab Romovab 双特异性双特异性anti CD3 Epcam结肠癌结肠癌 Zanolimumab Humax CD4 人抗体人抗体 IgGCD4皮肤性皮肤性T细胞淋巴瘤细胞淋巴瘤 Epratuzumab Lymphocide 人源人源 IgG1CD22非何杰金淋巴瘤和某些自身免 疫性疾病 非何杰金淋巴瘤和某些自身免 疫性疾病 如如SLE 与与CD20mAb 联用可能会提高临床效果联用可能会提高临床效果 MDX 010 ipilimumab 人抗体人抗体 IgGCTLA 4黑素瘤黑素瘤 WX G250 Rencarex 嵌合嵌合 IgG1抗碳酸酐酶 晚期肾癌抗碳酸酐酶 晚期肾癌 AMG 162 denosumab 人抗体人抗体 IgG2RANKL绝期后骨质疏松症和防止治疗 肿瘤过程中激素部分切除治疗 引起的骨丢失 绝期后骨质疏松症和防止治疗 肿瘤过程中激素部分切除治疗 引起的骨丢失 Anti MRSAmAb Aurograb 人抗体人抗体 scFv抗甲氧苄青链素的金 黄色葡萄球菌 抗甲氧苄青链素的金 黄色葡萄球菌 MRSA 金黄色葡萄球菌感染金黄色葡萄球菌感染 Pexelizumab Alexion Eculizumab 人源人源 单链可