普通微生物学课程习题.pdf

1 微生物学课程习题微生物学课程习题 绪 论绪 论 一 填空题 1 世界上第一个看见并描述微生物的人是荷兰商人安东 列文虎克荷兰商人安东 列文虎克 他的最大贡献不在 商界 而是利用自制的显微镜发现了微生物世界 2 微生物学发展的奠基者是法国的巴斯德法国的巴斯德 他对微生物学的建立和发展作出卓越的贡 献 主要集中体现在彻底否定了 自生说 学说 免疫学 预防接种和证实发酵是由 微生物引起的 而被称为细菌学奠基者是德国的柯赫德国的柯赫 他也对微生物学建立和发展作出 卓越贡献 主要集中体现建立了细菌纯培养技术和提出了柯赫法则 3 微生物学发展史可分为 3 期 其分别为形态学发展时期形态学发展时期 生理学免疫学发展时期生理学免疫学发展时期 现代微生物发展时期现代微生物发展时期 4 微生物的特点是体积小 面积大 吸收多 转化快 生长旺 繁殖快 适应性强 体积小 面积大 吸收多 转化快 生长旺 繁殖快 适应性强 易变异 分布广 种类多易变异 分布广 种类多 二 问答题 1 什么是微生物 它包括那些种类 主要特点 至今人类发现的最大和最小的微生物类 群各是什么 微生物是存在于自然界的一大群体形微小 结构简单 必须借助光学显微镜或电子 显微镜放大数百倍 数千倍 甚至数万倍才能观察到的微小生物 可分为三类 原核细 胞型微生物 包括细菌 真细菌和古生菌 螺旋体 支原体 立克次体和衣原体 真 核细胞型的微生物 包括真菌 酵母菌 霉菌 和蕈菌 藻类和原虫 非细胞型的微 生物 包括病毒和亚病毒 最大的微生物 最小的微生物 特点 个体小 结构简单 繁殖快 易培养 易变异 分布广 一方面具有其它生 物不具备的生物学特性 另一方面也具有其它生物共有的基本生命特征 2 什么是微生物学 微生物学的发展过程可分哪几个时期 微生物学 microbiology 是研究微生物的类型 分布 形态 结构 代谢 生长 繁殖 遗传 进化 以及与人类 动物 植物等相互关系的一门科学 微生物学的发展分为形态学发展时期 生理学免疫学发展时期 现代微生物发展时 期 第一章 原核细胞型微生物第一章 原核细胞型微生物 2 一 填空 1 微生物包括的主要类群有原核细胞型微生物 真核细胞型微生物和非细胞生物原核细胞型微生物 真核细胞型微生物和非细胞生物 2 细菌的基本形态有球状 杆状和螺旋状球状 杆状和螺旋状 3 根据分裂方式及排列情况 球菌分有单球菌 双球菌 链球菌 四联球菌 八叠单球菌 双球菌 链球菌 四联球菌 八叠 球菌 和葡萄球菌球菌 和葡萄球菌等 螺旋菌又有螺旋体 螺旋状和弧状螺旋体 螺旋状和弧状 及其它形态的菌有星形 方 形 柄杆状和异常形态 4 细菌的基本构造有细胞壁 细胞膜 细胞质和核区细胞壁 细胞膜 细胞质和核区等 特殊构造有鞭毛 菌毛 荚鞭毛 菌毛 荚 膜和芽孢膜和芽孢等 5 引起细菌形成异常形态 衰老型或退化型 的主要原因是受环境条件受环境条件的影响 比如 培养时间 培养温度和培养基的组成和浓度等 6 细菌的染色方法有 简单染色法 鉴别染色法 负染色法 简单染色法 鉴别染色法 负染色法 其中 又可分为革 兰氏染色法 抗酸性染色法 芽孢染色法和姬姆萨染色法 7 革兰氏染色的步骤分为结晶紫初染 碘液媒染 酒精脱色和番红花红 沙黄 或品结晶紫初染 碘液媒染 酒精脱色和番红花红 沙黄 或品 红复染红复染 其中关键步骤为酒精脱色酒精脱色 而染色结果 G 为红色红色 G 为蓝紫色蓝紫色 如大肠杆菌 是革兰氏阴性菌 葡萄球菌是革兰氏阳性菌 8 G 细胞壁的主要成份是肽聚糖肽聚糖和磷壁酸磷壁酸 9 脂多糖由类脂类脂 A 核心多糖 核心多糖和 O 特异侧链特异侧链三部分组成 而糖被的主要成份是多糖多糖 多肽或蛋白质多肽或蛋白质 尤以多糖多糖为主 10 缺壁细菌的主要类型有 L 型细菌型细菌 原生质体原生质体 原生质球 或球状体 和支原体原生质球 或球状体 和支原体 11 原生质体的特点 有无完整细胞壁细胞呈球状对渗透压极其敏感和细胞不能分裂有无完整细胞壁细胞呈球状对渗透压极其敏感和细胞不能分裂 12 观察细胞膜的方法有质壁分离后结合鉴别性染色质壁分离后结合鉴别性染色在光学显微镜下观察 原生质体原生质体 破裂和薄切片电镜观察破裂和薄切片电镜观察 13 芽孢具有很强的抗热抗酸碱抗热抗酸碱 抗辐射抗辐射 抗渗透压和抗化学药物抗渗透压和抗化学药物等性能 14 放线菌是一类呈菌丝生长和以孢子繁殖的原核生物菌丝生长和以孢子繁殖的原核生物 其菌丝有营养菌丝 气生菌营养菌丝 气生菌 丝和孢子丝丝和孢子丝三种类型 15 在一定的培养基中的菌落形态 大小 色泽 气味等是细菌学鉴定细菌学鉴定的重要内容 各 种细菌在固体培养基上形成的菌落 在大小 形状 颜色 气味 透明度 表面光滑或大小 形状 颜色 气味 透明度 表面光滑或 粗糙 湿润或干燥 边缘整齐与否 以及在血琼脂平板上的溶血情况等粗糙 湿润或干燥 边缘整齐与否 以及在血琼脂平板上的溶血情况等均有不同表现 这些有助于识别和鉴定细菌 二 是非题 3 1 细菌的异常形态是细菌的固有特征 2 光学显微镜的分辨率与所用波长成正比 3 环境条件渗透压大于细菌内渗透压时 细菌会变小 4 脂多糖是革兰氏阳性细菌特有的成份 5 菌落边缘细胞的菌龄比菌落中心的细胞菌龄长 6 所的细菌的细胞壁中都含有肽聚糖 7 细菌的荚膜只能用荚膜染色法观察 8 放线菌具有菌丝 并以孢子进行繁殖 它属于真核微生物 9 放线菌孢子和细菌的芽孢都是繁殖体 10 支原体是一类无细胞壁 也是整个生物界中尚能找到的能独立营养的最小原核生物 11 立克次氏体是一类只能寄生于真核细胞内的 G 原核生物 12 细菌是一类细胞细而短 结构简单 细胞壁坚韧 以二等分裂方式繁殖 水生性较 强的真核微生物 13 细菌形态通常有球状 杆状 螺丝状三类 自然界中杆菌最常见 球菌次之 螺旋 菌最少 14 芽孢有极强的抗热 抗辐射 抗化学物和抗静水压的能力 同时具有繁殖功能 15 蓝细菌是一类含有叶绿素 a 具有放氧性光合作用的原核生物 和光合细菌同属一 类 三 名词解释 1 细菌 是一类细胞细短 直径约 0 5 m 长度约 0 5 5 m 结构简单 胞壁坚韧 多以二分裂方式繁殖和水生性较强的原核生物 2 菌落 colony 单个细菌在适当的固体培养基表面或内部 经过一定时间的培养后 多数为 18 24h 生长繁殖出数量巨大的菌体 形成一个肉眼可见的 有一定形态的 独立群体 称为菌落 菌落相互连接成片 称为菌苔 3 芽孢 是指某些细菌在生长发育后期于细胞内部形成的一个圆形 椭圆形或圆柱形 的抗逆性休眠体 4 放线菌 是具有菌丝 以孢子进行繁殖 革兰氏染色阳性的一类原核微生物 属于 真细菌范畴 5 立克次氏体 是一类大小介于通常的细菌与病毒之间 在许多方面类似细菌 专性 4 活细胞内寄生的原核微生物 6 蓝细菌 Cyanoobacteria 旧名蓝藻或蓝绿藻 是一类进化历史悠久 革兰氏染色阴 性 无鞭毛 含叶绿素 a 但不含叶绿体 能进行产氧性光合作用的大型原核生物 9 支原体 mycoplasma 又称霉状体 菌质体 是最小的 G 菌 无细胞壁 细胞柔软 形态不规则 菌落呈典型的 油煎蛋 状 是一类无细胞壁 介于独立生活和细胞内寄生 生活间的最小型原核生物 10 鞭毛 某些细菌长在体表的长丝状 波曲状的附属物 称为鞭毛 其数目一至十根 具运动功能 12 荚膜 某些细菌细胞壁外存在的一层厚度不定的胶状物质 主要成分为多糖 13 菌毛 菌毛又称纤毛 繖毛等 是长在细菌体表的纤细 中空 短直的附属物 数 量较多 结构简单 常见于 G 菌 14 间体 mesosome 是由细胞膜内褶形成的一种管状 层状或囊状结构 一般位于细 胞分裂部位或其邻近 15 衣原体 chlamydia 衣原体是一类在脊椎动物细胞中专性寄生的小型 G 原核生物 16 原生质体 protoplast 指在人工条件下用溶菌酶除尽原有细胞壁或用青霉素抑制细 胞壁的合成后 所留下的仅由细胞膜包裹着的圆球状渗透敏感细胞 一般由 G 菌形成 17 原生质球 spheroplast 革兰阴性菌肽聚糖层受损后尚有外膜保护 称为原生质球 即还残留部分细胞壁的原生质体 一般由 G 菌形成 18 L 型细菌 指细菌自发 或经诱导剂诱导形成的遗传性稳定的细胞壁缺陷菌株 细 菌 L 型在体内或体外 人工诱导或自然情况下均可形成 诱发因素很多 如溶菌酶和溶 葡萄球菌素 青霉素 胆汁 抗体 补体等 四 选择题 1 细菌形态通常有球状 杆状 螺丝状三类 自然界中最常见的是 B A螺旋菌B杆菌C球菌 2 自界长期进化形成的缺壁细菌是 A A支原体BL 型细菌C原生质体D原生质球 3 G 菌由溶菌酶处理后所得到的缺壁细胞是 C A支原体BL 型细菌C原生质体D原生质球 4 G 菌由溶菌酶处理后所得到的缺壁细胞是 D A支原体BL 型细菌C原生质体D原生质球 5 5 实验室中自发突变形成的缺壁细菌称作 B A支原体BL 型细菌C原生质体D原生质球 6 革兰氏阳性菌细胞壁特有的成分是 D A肽聚糖B几丁质C脂多糖D磷壁酸 7 革兰氏阴性菌细胞壁特有的成分是 C A肽聚糖B几丁质C脂多糖D磷壁酸 8 原核细胞细胞壁上特有的成分是 A A肽聚糖B几丁质C脂多糖D磷壁酸 9 下列微生物中鞭毛着生类型为周生的是 C A红螺菌B蛭弧菌C大肠杆菌D反刍月形单胞菌 10 放线菌具吸收营养和排泄代谢产物功能的菌丝是 A A基内菌丝B气生菌丝C孢子丝D孢子 11 产甲烷菌属于 A A古细菌B真细菌C放线菌D蓝细菌 12 在革兰氏染色中一般使用的染料是 C A 美蓝和刚果红 B 苯胺黑和碳酸品红 C 结晶紫和番红 D 刚果红和番红 13 酵母菌的细胞壁主要含 D A肽聚糖和甘露聚糖 B 葡聚糖和脂多糖C 几丁质和纤维素 D葡聚糖和甘露聚糖 14 下列微生物中 A 属于革兰氏阴性菌 A 大肠杆菌 B 金黄葡萄球菌 C 巨大芽孢杆菌 D 肺炎双球菌 五 问答题 1 试述 G 菌和 G 菌细胞壁的特点 并说明革兰氏染色的机理及重要意义 革兰阴性菌细胞壁较薄 10 15nm 但结构较复杂 除含有 1 2 层的肽聚糖结构 外 尚有其特殊组分外膜 outer membrane 和周质间隙 periplasmic space 组成 革 兰阳性菌的细胞壁较厚 20 80nm 除含有 15 50 层肽聚糖聚合体结构外 大多数尚 含有大量的磷壁酸 teichoic acid 约占细胞壁干重的 50 少数是磷壁醛酸 革兰氏染色机理 通过结晶紫液初染和碘液媒染后 在细菌的细胞膜内可形成不溶 与水的结晶紫与碘的复合物 G 菌由于其细胞壁较厚 肽聚糖网层次多和交联致密 故 遇脱色剂乙醇处理时 因失水而使网孔缩小 再加上它不含类脂 故乙醇的处理不会溶 6 出缝隙 因此能把结晶紫和碘的复合物牢牢留在壁内 使其保持紫色 而 G 菌因其细胞 壁薄 外膜层类脂含量高 肽聚糖层薄和较联度差 遇脱色剂乙醇后 以类脂为主的外 膜迅速溶解 这时薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘的复合物的溶出 因此细胞 退成无色 这时 再经沙黄等红色染料复染 就使 G 菌呈红色 而 G 菌仍为紫色 意义 证明了 G 和 G 主要由于其细胞壁化学成分的差异而引起了物理特性 脱色 能力 的不同 正由于这一物理特性的不同才决定了最终染色反应的不同 2 根据鞭毛的数量和部位 可将鞭毛菌分成哪几类 根据鞭毛的数量和部位 可将鞭毛菌分成 4 类 单毛菌 只有一根鞭毛 位于 菌体一端 如霍乱弧菌 双毛菌 菌体两端各有一根鞭毛 如空肠弯曲菌 丛毛 菌 菌体一端或两端有一丛鞭毛 如铜绿假单胞菌 周毛菌 菌体周身遍布许多鞭 毛 如伤寒沙门菌 3 试述细菌核体的结构特征 细菌核体与真核细胞核有何区别 细菌的遗传物质称为核质或拟核 集中于细胞质的某一区域 无核膜 核仁和有丝 分裂器 因其功能与真核细胞的染色体相似 故习惯上亦称之为细菌的染色体 真核细胞的细胞核高度分化 有核膜 核仁 含 DNA 和 RNA 细胞核能进行有丝分 裂 4 简述细菌荚膜的化学组成及功能 荚膜多为疏水性多糖或蛋白质的多聚体 其功能表现在以下几个方面 1 抗吞噬 作用 1 抗吞噬作用 2 粘附作用 3 抗有害物质的损伤作用 5 细菌荚膜 鞭毛 芽孢的在细菌鉴定方面有何意义 细菌荚膜的生成在正常情况下具有种的特异性 细菌是否产生鞭毛 以及鞭毛的数 目和排列方式都具有种的特征 芽孢的大小 形状 位置等随菌种而异 所有这些有重 要的鉴别价值 第二章 真核细胞型的微生物第二章 真核细胞型的微生物 一 填空题 1 真核微生物具有的三种主要特征是 细胞具有完整细胞核细胞具有完整细胞核 能进行有丝分裂能进行有丝分裂 和 细细 胞质中存在内质网 线粒体等细胞器胞质中存在内质网 线粒体等细胞器 其主要类群有真菌 藻类和原虫真菌 藻类和原虫 2 酵母菌细胞形态有球状 卵圆形 圆形 圆柱形或梨形球状 卵圆形 圆形 圆柱形或梨形等多种 其繁殖方式有 有有 性繁殖和无性繁殖性繁殖和无性繁殖 其中无性繁殖无性繁殖又有芽殖 裂殖和产无性孢子 7 3 霉菌的无性孢子有分生孢子 孢子囊孢子 厚垣孢子 节孢子和芽孢子分生孢子 孢子囊孢子 厚垣孢子 节孢子和芽孢子 有性孢子 有卵孢子 接合孢子和子囊孢子卵孢子 接合孢子和子囊孢子 其有性繁殖过程为质配 核配和减数分裂质配 核配和减数分裂 4 霉菌的菌落较大 菌落质地一般比放线菌疏松 外观干燥 不透明 呈现或紧或松的 蛛网状 绒毛状或棉絮状蛛网状 绒毛状或棉絮状 5 同一种霉菌 在不同成分培养基上的菌落特征可能有变化 但各种霉菌 在同一培 养基上的菌落形状 颜色等相对稳定菌落形状 颜色等相对稳定 故菌落特征也是鉴定霉菌的重要依据之一 6 一般处于霉菌菌落中心的菌丝菌龄较大菌丝菌龄较大 位于边缘的则较年幼较年幼 7 霉菌的孢子具有小 轻 干 多 以及形态色泽各异 休眠期长和抗逆性强小 轻 干 多 以及形态色泽各异 休眠期长和抗逆性强等特点 8 酵母菌一般以无性繁殖无性繁殖为主 无性繁殖中以芽殖芽殖为多见 个别为横分裂 9 构成霉菌营养体的基本单位是菌丝菌丝 菌丝可伸长并产生分枝 许多分枝的菌丝相互 交织在一起 叫菌丝体菌丝体 10 担孢子 双核菌丝 锁状联合担孢子 双核菌丝 锁状联合是担子菌的基本特征 二 名词解释 1 霉菌 是丝状真菌的一个俗称 通常指那些菌丝体较发达又不产生大型肉质子实体 结构的真菌 2 蕈菌 又称伞菌 也是一个通俗名称 通常是指那些能形成大型肉质子实体的真菌 包括大多数担子菌类和极少数的子囊菌类 3 无隔膜菌丝 呈长管状分支 菌丝中无隔膜 整团菌丝体就是一个单细胞 其中含 有多个细胞核 菌丝生长过程只表现为细胞核的分裂和原生质的增长 而没有细胞数目 的增多 这是低等真菌 即鞭毛菌亚门和接合菌亚门中的霉菌 所具有的菌丝类型 如 毛霉和根霉 4 有隔膜菌丝 菌丝中有隔膜 被隔膜隔开的一段菌丝就是一个细胞 菌丝体由很多 个细胞组成 每个细胞内有 1 个或多个细胞核 在隔膜上有 1 至多个小孔 使细胞之间 的细胞质和营养物质可以相互沟通 菌丝生长 细胞的数目也随之增多 这是高等真菌 即子囊菌亚门和半知菌亚门中的霉菌 所具有的菌丝类型 如青霉 曲霉等 5 无性繁殖 是指不经过两性细胞的结合而形成新个体的过程 无性繁殖产生的孢子 叫无性孢子 霉菌的无性孢子直接由生殖菌丝的分化而形成 常见的有芽孢子 节孢子 厚垣孢子 孢囊孢子和分生孢子 6 有性繁殖 是经过两性细胞的质配与核配后 产生有性孢子来实现的 经过两性细 胞结合而形成的孢子称为有性孢子 8 三 简答题 1 真菌的有性繁殖过程可分为那几个阶段 请说明每个阶段的内容 质配 两个单倍体性细胞相接触 细胞质及内含物融合在一起 但染色体数目仍为 单倍体 核配 质配后双核细胞中的两个核融合 产生出二倍体的接合子核 染色数目是双 倍的 减数分裂 双倍体核进行两次连续的核分裂 核的染色体数目减半 形成单倍体的 有性孢子 第三章病 毒第三章病 毒 一 是非题 1 一个病毒的毒粒内既含有 DNA 又含有 RNA 2 一个病毒的毒粒内既含有双链 DNA 又含有双链 RNA 3 一个病毒的毒粒内只含有一种核酸 DNA 或 RNA 4 植物病毒侵入依靠细胞受体吸附 5 溶源性细菌在一定条件诱发下 可变为烈性噬菌体裂解寄主细胞 6 DNA 即是与 mRNA 序列互补的 DNA 7 朊病毒是只含有侵染性蛋白质的病毒 8 溶原噬菌体是整合在宿主 DNA 上的 DNA 片段 它不能独立进行繁殖 9 病毒具有宿主特异性 即某一种病毒仅能感染一定种类的微生物 植物或动物 二 填空 1 病毒是侵害各种生物的分子病原体 现分为真病毒和亚病毒真病毒和亚病毒两大类 而亚病毒包括 类病毒 拟病毒和朊病毒类病毒 拟病毒和朊病毒 2 病毒纯化方法有盐析 等电点沉淀 凝胶层析 超速离心 有机溶剂沉淀盐析 等电点沉淀 凝胶层析 超速离心 有机溶剂沉淀 和 离子交换离子交换 等 其纯化标准是纯化的病毒制备物应保持其感染性保持其感染性和纯化的病毒制备物的 毒粒大小 形态 密度 化学纯度及抗原性应具有均一性毒粒大小 形态 密度 化学纯度及抗原性应具有均一性 3 毒粒的基本化学组成是核酸核酸和蛋白质蛋白质 有包膜的病毒还含有脂类和糖类脂类和糖类 它对大多 数抗生素抗生素不敏感 但对干扰素干扰素敏感 4 毒粒的形状大致可分为球状 杆状 转状 丝状 蝌蚪形球状 杆状 转状 丝状 蝌蚪形等几类 病毒衣壳的对称 类型有螺旋对称壳体螺旋对称壳体 二十面对称壳体二十面对称壳体和复杂对称结构复杂对称结构 9 5 病毒核酸存在的主要类型 ssDNA dsDNA ssRNA 和和 dsRNA 四种 6 病毒蛋白质根据其是否存在于毒粒中可分为结构蛋白结构蛋白和非结构蛋白非结构蛋白两类 其中结构 蛋白又有衣壳蛋白衣壳蛋白 囊膜蛋白囊膜蛋白和存在毒粒中的酶存在毒粒中的酶 7 裂性噬菌体以裂解性周期进行繁殖 从生长曲线上可将其分为潜伏期潜伏期 裂解期裂解期和平平 稳期稳期三个时期 8 病毒是严格的细胞内寄生物细胞内寄生物 它只能在活细胞内繁殖 其繁殖过程可分为吸附 侵入 吸附 侵入 脱壳 病毒大分子合成和装配与释放脱壳 病毒大分子合成和装配与释放五个阶段 9 病毒侵入宿主细胞有融合 细胞胞饮和直接进入 转位 融合 细胞胞饮和直接进入 转位 等方式 三 名词解释 1 噬菌斑 当寄主细胞被噬菌体感染后细胞裂解 在菌苔上出现的一些无色透明空斑 负菌落 2 病毒 一类超显微的 无细胞结构的 专性活细胞内寄生的分子生物 3 温和噬菌体 凡吸附并侵入细胞后 噬菌体的 DNA 只整合在宿主的染色体上 并可 长期随寄主 DNA 的复制而进行同步复制 不进行增殖和引起寄主细胞裂解的噬菌体 称为温和噬菌体 4 烈性噬菌体 能够完成增殖周期 引起寄主细胞裂解的噬菌体 称为烈性噬菌体 5 溶源性 染色体上整合有前噬菌体的细菌称溶源菌 溶源菌所表现出来的一些特性 如自发裂解 诱发裂解 免疫性 复愈等称为溶源性 6 病毒子 或称毒粒 指一个结构齐全 功能完整而具有感染性的成熟病毒颗粒 7 类病毒 类病毒是一个裸露的闭合环状 RNA 分子 它能感染寄主并在其中进行自我 复制使寄主产生病症 8 朊病毒 prion 是一类能动物并在宿主细胞内复制的小分子无免疫性的疏水蛋白质 9 包涵体 病毒感染细胞后 可在胞核或胞浆内形成嗜酸性或嗜碱性的圆形 卵圆形 不规则的团块状结构 称为包涵体 10 自我复制 由于病毒缺乏完整的酶系统 不具有合成自身成份的原料和能量 也没 有核糖体 因此决定了它的专性寄生性 因此病毒必须侵入易感的宿主细胞 依靠宿主 细胞的酶系统 原料和能量 以病毒基因为模板 复制病毒的核酸 借助宿主细胞的核 糖体翻译病毒的蛋白质 病毒这种增殖的方式叫做 自我复制 11 复制周期 从病毒靠近宿主细胞 并进入宿主细胞 到复制出子代病毒后释放出来 的全过程称为复制周期 一个完整的复制周期包括吸附 穿入与脱壳 生物合成 组装 10 与释放等步骤 12 隐蔽期 从侵入细胞的病毒颗粒完全消失开始 到新的子代病毒颗粒出现为止 这 阶段称为隐蔽期 晦暗期或隐晦期 13 感染性核酸 infectious nucleic acid 将从病毒毒粒或病毒感染的细胞抽提分离的病 毒核酸实验性地导入细胞 若都启动病毒复制循环 产生子代毒粒 此种病毒核酸称为 感染性核酸 否则称为非感染性核酸 14 病毒的非增殖感染 有些宿主细胞不能全部提供病毒复制所需的必要因子 致使所 复制的病毒为不完整的 无感染性的病毒颗粒或亚颗粒称为非增殖性感染 15 缺损病毒 有些病毒由于缺乏某些基因 单独感染细胞时不能复制出完整的 具有 感染性的病毒颗粒 需要其它病毒基因组或病毒基因的辅助活性 否则 即使在活细胞 内也不能复制 这些病毒称为缺损病毒 16 结构蛋白 指构成一个形态成熟的有感染性的病毒颗粒所必需的蛋白质 包括衣壳 蛋白 囊膜蛋白以及病毒中的酶 17 非结构蛋白 是指病毒组分以外的蛋白质 是病毒复制过程中的一些中间产物 不 存在于病毒体内而仅存在于感染细胞内 例如抑制细胞生物合成的蛋白或抑制病毒抗原 经组织相容性抗原 MHC 递呈的蛋白等 18 细胞病变效应 又称 CPE 是指病毒在细胞内增殖及其对细胞产生损害的明显表现 例如细胞发生凝缩 团聚 肿大 细胞融合形成多核现象 细胞脱落 裂解 细胞内出 现包涵体等 四 问答题 1 病毒的基本特征是什么 病毒具有以下几个重要基本特征 病毒非常微小 无细胞结构 绝大多数病毒 只能用电子显微镜观察 病毒由核酸和蛋白质构成 仅具有一种类型的核酸 即 RNA 或 DNA 病毒无细胞壁 对抗生素不敏感 而绝大多数病毒对干扰素敏感 病 毒没有核糖体和转移 RNA tRNA 也无合成蛋白质所必需的酶 其 mRNA 进行转录 时 完全利用宿主细胞的物质 所以病毒只能在一定的活的宿主细胞内复制和装配新的 子代病毒 病毒不能长大 不经分裂繁殖 而由核酸通过复杂的生物合成 获得大 量组分 进行装配而增殖 病毒进入细胞后 根据核酸的指令 改变细胞的一系列活动 大量复制出子代病毒 具有受体连结蛋白 receptor binding protein 与敏感细 胞表面的病毒受体连结 进而感染细胞 11 2 试述病毒的主要化学组成及其功能 病毒的主要化学组成包括核酸 蛋白质以及脂类与糖 病毒核酸携带病毒的全部遗传信息 是病毒的基因组 病毒蛋白质由病毒核酸编码 可分为结构蛋白和非结构蛋白两种 结构蛋白包括衣 壳蛋白 囊膜蛋白以及病毒中的酶 是决定病毒对宿主细胞嗜性的重要因素 病毒的蛋 白是良好的抗原 可激发机体发生免疫反应 非结构蛋白是指病毒组分以外的蛋白质 其中有些具有酶功能的蛋白 有些非结构蛋白具有转化宿主细胞的作用 有囊膜的病毒的囊膜内含有来自宿主细胞的脂类化合物 主要是磷脂 其次为胆固 醇 糖类一般以糖蛋白的形式存在 是某些病毒纤突的成分 3 简述病毒的基本结构 病毒子或称毒粒 指一个结构齐全 功能完整而具有感染性的成熟病毒颗粒 病毒 的基本结构 芯髓 衣壳 囊膜 芯髓 位于病毒体的中心 由一种类型的核酸构成 含 DNA 的称为 DNA 病毒 含 RNA 的称为 RNA 病毒 是病毒的基因组 决定病毒遗传 变异和复制 衣壳 核酸外包裹的蛋白质外壳称为衣壳 不仅起保护病毒核酸的作用 还能介导 病毒进入宿主细胞并具有抗原性 核衣壳 核酸连同衣壳合称核衣壳 囊膜 比较复杂的病毒核衣壳外包裹的一层或几层外膜 称为囊膜 纤突 囊膜表面有许多球杆状的糖蛋白 称为纤突 也叫膜粒 4 衣壳有哪些功能 1 致密稳定的衣壳结构除赋予病毒固有的形状外 还可保护内部核酸免遭外环 境 如血流 中核酸酶以及其他破坏性因素的破坏 2 衣壳蛋白质是病毒基因产物 具有病毒特异的抗原性 可刺激机体产生免疫应答 3 介导病毒进入宿主细胞 与病 毒吸附作用有关 病毒表面特异性受体连结蛋白与细胞表面相应受体有特殊的亲和力 是病毒选择性吸附宿主细胞并建立感染灶的首要步骤 5 试述动物病毒的增殖的过程 从病毒靠近宿主细胞 并进入宿主细胞 到复制出子代病毒后释放出来的全过程称 为复制周期 一个完整的复制周期包括吸附 穿入与脱壳 生物合成 组装与释放等步 骤 吸附吸附是指病毒附着于敏感细胞的表面 它是感染的起始期 包括静电吸 12 附和特异性受体吸附两个阶段 静电吸附是可逆的联结 是非特异性的 特异性受体吸 附是病毒表面连接蛋白与宿主细胞表面的受体特异性结合 这种结合是牢固 得非可逆 的 穿入穿入是指病毒核酸或感染性核衣壳穿过细胞进入胞浆 开始病毒感染的 细胞周期 主要有融合 胞饮和直接进入三种方式 融合是病毒囊膜与细胞膜融合 病 毒的核衣壳进入胞浆 副粘病毒以融合方式进入 如流感病毒 胞饮是病毒穿入的主要 方式 也是哺乳动物细胞本身具有一种摄取各种营养物质和激素的方式 某些无囊膜病 毒可直接穿过细胞膜进入细胞浆 如小 RNA 病毒即为典型 脱壳脱壳是指病毒进入细胞后 再溶酶体和蛋白水解酶的作用下 脱掉衣壳 释放出核酸的过程 病毒在细胞内必须脱去衣壳 其核酸方可在宿主细胞中发挥指令作 用 穿入和脱壳是连续的过程 生物合成病毒的生物合成发生在隐蔽期 非常活跃 包括 mRNA 的转录 病毒核酸复制以及合成蛋白质衣壳等 多数 DNA 病毒在宿主细胞核内合成核酸 而多 数 RNA 病毒则在细胞浆中合成核酸 病毒的蛋白质只能在细胞浆中合成 生物合成的 步骤 按亲代病毒的模板转录病毒 mRNA 早期转录 正单链 RNA 病毒的 RNA 基因组不仅可作为模板复制子代病毒 RNA 还同时具有 mRNA 的功能 可直接附着于 胞质的核糖体 转译出病毒的非结构蛋白与结构蛋白 除此之外的其它病毒基因组均需 转录为 mRNA 然后转移到胞浆核糖体上 才能进行蛋白表达 由早期 mRNA 翻译 早期蛋白 早期蛋白一般为非结构蛋白 如复制所需的 聚合酶 调控蛋白等 主要参与病毒基因组表达 以及改变或抑制宿主细胞的大分子物 质的合成 病毒核酸复制 以亲代核酸为模板 在早期蛋白的作用下 按核酸半保留形式复 制子代核酸 由于病毒核酸的类型及股数不同 核酸复制的过程各有差异 由子代核酸翻译 晚期蛋白 在病毒 DNA 复制之后出现 子代核酸转录晚期 mRNA 再翻译为晚期蛋白 主要包括病毒的结构蛋白 衣壳及囊膜 装配与释放装配指新合成的病毒核酸和病毒结构蛋白在感染细胞内组合成病 毒颗粒的过程 释放指装配好的病毒颗粒从细胞内转移到细胞外的过程 大多数 DNA 病毒 在核内复制 DNA 在胞浆内合成蛋白质 转入核内装配成熟 而痘苗病毒其全部成份及装配均在胞浆内完成 RNA 病毒多在胞浆内复制核酸及合成 13 蛋白 病毒装配成熟后释放的方式有 宿主细胞裂解病毒释放到周围环境中 见于无 囊膜病毒 如腺病毒 脊髓灰质炎病毒等 以出芽的方式释放 见于有囊膜病毒 如 疱疹病毒在核膜上获得囊膜 流感病毒在细胞膜上获得囊膜而成熟 然后以出芽方式释 放出成熟病毒 也可通过细胞间桥或细胞融合邻近的细胞 这种释放方式 对细胞膜无 明显损伤 6 如何绘制病毒的一部生长曲线 一部生长曲线可分为几个期 各期有何特点 一步生长曲线是研究病毒复制的一个实验 具体操作是将适量病毒接种于高浓度敏 感细胞培养物 或高倍稀释病毒细胞培养物或以抗病毒血清处理病毒细胞培养物以建立 同步感染 以感染时间为横坐标 病毒的效价为纵坐标 绘制出的病毒特征曲线即为一 步生长曲线 一步生长曲线包括潜伏期 裂解期和平稳期 特点 潜伏期 不同病毒潜伏期长短不一 噬菌体一般有几分钟 动物病毒和植物病毒以 小时或天计 烈解期 病毒效价在潜伏期后急剧增加 平稳期 烈解期末 受染细胞将子代病毒粒子全部释放出来 病毒效价在此时期稳 定在最高处 7 人工培养病毒的方法有哪些 各有何特点和用途 由于病毒具有严格的细胞内寄生性 故应根据病毒要求的不同而选用敏感动物 鸡 胚或组织细胞培养进行病毒的分离与鉴定 动物接种是最原始的病毒分离方法 常用动物有鼠类 兔等 有的病毒分离 需接种珍贵动物 如雪貂 猴 猩猩等 接种后主要观察动物的发病及死亡作为感染的 指标 可用于病毒病原性的测定 疫苗效力试验 疫苗生产 抗血清制造及病毒性传染 病的诊断等 鸡胚培养是简单 方便而经济的方法 接种 2 天后观察鸡胚的活动与死亡 情况 取尿囊液或羊水 用血凝及血凝抑制试验测定病毒 流感病毒 用鸡胚培养法 可进行病毒分离 鉴定 也可大量复制病毒 组织细胞培养细胞培养法比鸡胚法更经济 效果更好 用途更广 可用于多 种病毒的分离 增殖 病毒抗原疫苗制备 中和试验 病毒空斑测定及克隆纯化等 8 试述病毒的释放方式 病毒不同其释放形式各异 可归纳为以下 4 种释放方式 14 爆破式 细胞在感染病毒后 病毒在胞浆或核内蓄积 由于代谢障碍 细胞发 生变性及死亡 细胞部分或全部破裂 释出病毒颗粒 无囊膜的 DNA 病毒和 RNA 病毒 才用这种方式释放 出芽式 某些有囊膜的病毒在胞浆膜上获得囊膜 其以出芽方式释放 其过程 跟吞饮作用相反 当病毒颗粒脱离细胞膜则完成出芽过程 使宿主细胞膜无明显损害 排泄式 黄病毒 冠状病毒等穿越高尔基体复合物或粗面内质网的膜出芽 病 毒颗粒进入空泡 再移入胞浆膜 与之融合 以胞吐 exocytosis 方式释放 疱疹病毒在 核膜的内薄层出芽 经内质网的储泡 cisternae 排出细胞外 转移式 某些病毒 如疱疹病毒 很少释放于细胞外 而是通过细胞间桥或融 合细胞而传播 使病毒子在细胞间转移 9 病毒的非增殖感染有哪几种类型 这类感染过程有以下 3 种类型 流产感染 流产感染分为依赖于细胞的流产感染 和依赖于病毒的流产感染 依赖于细胞的流产感染病毒感染的细胞是病毒不能复制 的非允许细胞 将导致依赖于细胞的流产感染 非允许细胞内 缺失某些参与病毒复制 的酶 tRNA 或细胞因子 往往仅有少数病毒基因表达 不能完成病毒复制循环 允许细 胞和非允许细胞是相对的 一种病毒的允许细胞可能是另一种病毒的非允许细胞 反之 亦然 依赖于病毒的流产感染是由基因组不完整的缺损病毒引起 无论是感染允许 细胞还是非允许细胞都不能完成复制循环 限制性感染因细胞的瞬时允许性产生 其结果或是病毒持续存在于受染细胞内 不能复制 直到细胞成为允许性细胞 病毒才能繁殖 或是一个细胞群体中仅有少数细 胞产生病毒子代 潜伏感染在受染细胞内有病毒基因组持续存在 但并无感染性病毒颗粒产生 而且受染细胞也不会被破坏 潜伏感染的另一个极端情况是由于病毒基因的功能表达导 致宿主基因表达的改变 以致正常细胞转化为恶性细胞 10 什么是病毒的致细胞病变效应 在光学显微镜下有何表现 病毒在组织细胞内增殖引起细胞变性 死亡裂解的作用称病毒的致细胞病变效应 病毒的致细胞病变效应在普通光学显微镜下可见到 细胞肿胀 脱落甚至溶解 细胞间彼此融合形成多形核巨细胞 细胞核或浆 内形成包涵体 11 试述真核细胞感染病毒的类型 15 杀细胞性感染 稳定性感染多见于包膜病毒 病毒在细胞内增殖 不影响细胞正常的代谢 不造成细胞的溶解 当成熟的病毒以出芽方式从细胞中释放时可引起细胞膜的改变 诱 发机体自身免疫应答 损伤和破坏感染的细胞 细胞膜的改变主要表现为细胞融合和细 胞膜出现新抗原 整合感染某些 DNA 病毒的全部或部分 DNA 以及逆转录病毒合成的 cDNA 插入宿主细胞基因中 形成前病毒 Provirus 导致细胞遗传性状的改变 称为整合感染 整合的宿主细胞不复制期间为潜伏感染 偶尔复制出完整病毒时为复发感染 在适宜条 件下细胞也可转化为癌细胞 细胞膜上出现肿瘤抗原 HTLV 1 EBV HPV HBV 均 可造成这一类型的感染 细胞凋亡细胞凋亡是指细胞在一定的生理或病理条件下 受内在遗传机制的控 制自动结束生命的过程 细胞凋亡是以细胞核浓缩 染色体 DNA 被以核小体为单位切 成梯状片段 ladder 细胞缩小 最终形成细胞凋亡小体等形态变化为特征 不引起周 围细胞的溶解 第四章 微生物的生理 一 微生物的营养与生长 第四章 微生物的生理 一 微生物的营养与生长 一 填空 1 培养基应具备微生物生长所需要的六大营养要素是碳源 氮源 无机盐 生长因子碳源 氮源 无机盐 生长因子 和水和水 2 碳源物质对微生物的功能是提供碳素来源碳素来源和能量来源能量来源 微生物可用的碳源物质主要 有糖类 有机酸 脂类 烃 糖类 有机酸 脂类 烃 CO2 及碳酸盐及碳酸盐等 微生物利用的氮源物质主要有蛋白质 铵盐 硝酸盐 分子氮 酰胺蛋白质 铵盐 硝酸盐 分子氮 酰胺等 而常用的 速效 源如玉米粉 它有利于菌体生长 迟效 源如黄豆饼粉 花生饼粉 它有利于代 谢产物的形成 无机盐对微生物的生理功能是作为酶活性中心的组成部分作为酶活性中心的组成部分 维持生物大分子和细胞维持生物大分子和细胞 结构的稳定性 调节并维持细胞的渗透压平衡结构的稳定性 调节并维持细胞的渗透压平衡和控制细胞的氧化还原电位控制细胞的氧化还原电位和作为某些微作为某些微 生物生长的能源物质生物生长的能源物质等 5 微生物的营养类型可分为光能无机自养型光能无机自养型 光能有机异养型光能有机异养型 化能无机自养型和化化能无机自养型和化 能有机异养型能有机异养型 微生物营养类型的可变性有利于提高微生物对环境条件变化的适应能 16 力 6 生长因子主要包括维生素 氨基酸和嘌呤及嘧啶维生素 氨基酸和嘌呤及嘧啶 它们对微生物所起的作用是作为作为 酶的辅基或辅酶参与新陈代谢 维持微生物正常生长 为合成核苷 核苷酸和核酸提供酶的辅基或辅酶参与新陈代谢 维持微生物正常生长 为合成核苷 核苷酸和核酸提供 原料原料 7 营养物质进入细胞的方式有单纯扩散 促进扩散 主动运输和基团移位单纯扩散 促进扩散 主动运输和基团移位 而金黄色 葡萄球菌是通过主动运输方式运输乳糖 大肠杆菌又是通过基团移位方式运输嘌呤和嘧 啶的 8 影响营养物质进入细胞的主要因素是营养物质本身 微生物所处的环境和微生物细营养物质本身 微生物所处的环境和微生物细 胞的透过屏障胞的透过屏障 9 实验室常用的有机氮源有蛋白胨和牛肉膏蛋白胨和牛肉膏等 无机氮源有硫酸铵和硝酸钠硫酸铵和硝酸钠等 为节 约成本 工厂中常用豆饼粉等作为有机氮源 10 培养基按用途分可分为 基础培养基 营养培养基 鉴别培养基和选择培养基基础培养基 营养培养基 鉴别培养基和选择培养基四种 类型 11 测定微生物的生长量常用的方法有测体积 测干重 测蛋白质含量和测测体积 测干重 测蛋白质含量和测 DNA 含量含量 而测定微生物数量变化常用的方法有直接计数法 间接计数法 比浊法和膜过滤法直接计数法 间接计数法 比浊法和膜过滤法 以 生理指标法来测定微生物的方法又有呼吸强度 生物热 耗氧量和酶活性呼吸强度 生物热 耗氧量和酶活性等 12 获得细菌同步生长的方法主要有机械方法和环境条件控制技术机械方法和环境条件控制技术 其中机械法中常用 的有离心方法 过滤方法和硝酸纤维素滤膜法离心方法 过滤方法和硝酸纤维素滤膜法 13 连续培养与单批培养相比 其优点有高效 便于自动控制 产品质量稳定和经济节高效 便于自动控制 产品质量稳定和经济节 约约 而缺点主要是菌种退化菌种退化 其次是易遭杂菌污染易遭杂菌污染 控制连续培养的方法有恒化连续培有恒化连续培 养和恒浊连续培养养和恒浊连续培养 14 影响微生物生长的主要因素有营养物质 水的活度 温度 营养物质 水的活度 温度 pH 光线和氧等 光线和氧等 二 是非题 1 细菌分裂繁殖一代所需时间为倍增时间 2 在群体生长的细菌数量增加一倍所需时间为代时 3 分子氧对专性厌氧微生物的抑制和制死作用是因为这些微生物内缺乏过氧化氢酶 4 一切好氧微生物都含有超氧化物歧化酶 5 分批培养时 细菌首先经历一个适应期 此期间细胞处于代谢活动的低潮 所以细 胞数目并不增加 17 6 最适的生长繁殖温度就是微生物代谢的最适温度 7 最低温度是指微生物能生长的温度下限 最高温度是指微生物能生长的温度上限 8 通常一种化合物在某一浓度下是杀菌剂 而在更低的浓度下是抑菌剂 9 在固体培养基中 琼脂的浓度一般为 0 5 1 0 10 EMB 培养基中 伊红美蓝的作用是促进大肠杆菌的生长 11 碳源对配制任何微生物的培养基都是必不可少的 12 被动扩散是微生物细胞吸收营养物质的主要方式 13 主动运输是广泛存在于微生物中的一种主要的物质运输方式 三 名词解释 1 培养基 medium 是人工配制的 适合微生物生长繁殖或产生代谢产物的营养基质 根据其物理状态的不同可分为液体 固体和半固体三大类 2 生长因子 通常指那些微生物生长所必需而且需要量很小 但微生物自身不能合成或 合成量不足以满足机体生长需要的有机化合物 3 水活度值 表示微生物生长的环境中水的有效性 指在一定温度和压力条件下 溶液 的蒸气压力与同样条件下纯水蒸气压力之比 4 碳氮比 是指在微生物培养基中所含的碳源中碳原子的摩尔数与氮源中氮原子的摩尔 数之比 5 鉴别培养基 用于鉴别不同类型微生物的培养基 在培养基中加入某种特殊化学物质 某种微生物在培养基中生长后能产生某种代谢产物 而这种代谢产物可以与培养基中的 特殊化学物质发生特定的化学反应 产生明显的特征性变化 根据这种特征性变化 可 将该种微生物与其他微生物区分开来的培养基 6 合成培养基 synthetic medium 由化学成份完全了解的物质配制而成的培养基 也称 化学限定培养基 7 选择培养基 在培养基内加入某种化学物质或去除某些营养物质以抑制杂菌 8 同步培养 指使群体中不同步的细胞转变成能同时生长或分裂的群体细胞的培养方 法 9 连续培养 是在微生物的整个培养期间 通过一定的方式使微生物能以恒定的比生长 速率生长并能持续生长下去的一种培养方法 10 真菌的酵母细胞 菌丝和孢子 无形孢子和有性孢子 都可以长成新的个体 真 18 菌的分离有三种方法 菌丝分裂法 组织分离法 孢子分离法 11 细胞培养从其生长方式可分为单层细胞和悬浮细胞两种 从其来源及传代次数等又 可分为原代细胞 二倍体细胞与传代细胞等三种类型 12 化能自养 以 CO2 为唯一或主要碳源 氧化还原态无机物获得能量的微生物 13 化能异养型 以有机物为能源和碳源的微生物 14 测定微生物生长的方法有 微生物细胞数目的测定和微生物生长量的测定 15 光能无机营养型 或称光能自养型 这是一类能以 CO2 作为唯一或主要碳源并利用 光能进行生长的微生物 16 光能有机营养型 或称光能异养型 这类微生物不能以 CO2 为唯一或主要碳源 需 以简单的有机物酸 醇等作为供氢体 利用光能将 CO2 还原成细胞物质 17 基团移位 指一类既需特异性载体蛋白的参与 又需耗能的 溶质在运送前后分发 生分子结构变化的一种物质运送方式 四 选择题 1 适合细菌生长的 C N 比为 B A5 1B25 1C40 1D80 1 2 实验室常用的培养细菌的培养基是 A A牛肉膏蛋白胨培养基B马铃薯培养基C高氏一号培养基D麦芽汁培养基 3 下列物质属于生长因子的是 D A 葡萄糖 B 蛋白胨 C NaClD 维生素 4 培养料进入细胞的方式中运送前后物质结构发生变化的是 D A主动运输B被动运输C促进扩散D基团移位 5 E coli 大肠杆菌 属于 D 型的微生物 A光能自养B光能异养C化能自养D化能异养 6 蓝细菌属于 A 型的微生物 A光能自养B光能异养C化能自养D化能异养 7 硝化细菌属于 C 型的微生物 A光能自养B光能异养C化能自养D化能异养 8 发酵工业上为了提高设备利用率 经常在 C 放罐以提取菌体或代谢产物 A延滞期B对数期C稳定期末期D衰亡期 9 专性厌氧微生物是由于其细胞内缺少 D 从而不能解除分子氧对细胞的毒害 19 ABODBCODCNODDSOD 超氧化物歧化酶 五 问答题 1 细菌生长繁殖必须具备那些条件 细菌生长繁殖必须具备以下条件 营养足够的水分 碳源物质 氮源物质 无机盐及生长因子等 温度细菌生长各有其可生长的温度范围和最适生长温度 在最适温度下细菌 生长最快 氢离子浓度 pH 值 不同的细菌所需要的pH值是不同的 大多数嗜中性细菌生长的pH范围是6 0 8 0 嗜酸性细菌最适生长 pH 可低至 3 0 嗜碱性细菌最适生长 pH 可高达 10 5 多数病原菌 最适 pH 为 7 2 7 6 在宿主体内极易生存 个别细菌如霍乱弧菌在 pH8 4 9 2 生长最 好 结核杆菌生长的最适 pH 为 6 5 6 8 渗透压需适宜的渗透压 一般为等渗环境 少数细菌如嗜盐菌需要在高浓度 3 的 NaCl 环境中生长良好 气体主要影响细菌生长的气体是 O2和 CO2 不同呼吸类型的细菌所需气体环境 不同 2 细菌的生长曲线分为哪几期 有何意义 各期有何特点 将一定数量的细菌接种于适宜的液体培养基中 连续定时取样检查活菌数 以培养 时间为横坐标 培养物中活菌数的对数为纵坐标 可绘制出一条生长曲线 根据生长曲线 细菌的群体生长繁殖可分为四期 迟缓期 细菌进入新环境后的短暂适应阶段 该期菌体增大 代谢活跃 为细菌 的分裂繁殖合成并积累充足的酶 辅酶和中间代谢产物 但分裂迟缓 繁殖极少 迟缓 期长短不一 按菌种 接种菌的菌龄和菌量 以及营养物等不同而异 一般为 1 4 h 对数期 又称指数期 细菌在该期生长迅速 活菌数以 2 n指数的几何级数增长 生长曲线图上细菌数的对数呈直线上升 达到顶峰状态 此期细菌的形态 染色性 生 理活性等都较典型 对外界环境因素的作用敏感 因此 研究细菌的生物学性状 大小 形态染色 生化反应 药物敏感试验等 应选用该期的细菌 一般细菌对数期在培养后 的 8 18h 稳定期由于培养基中营养物质消耗 有害代谢产物积聚 该期细菌繁殖速度 渐减 死亡数逐渐增加 细菌形态 染色性和生理性状常有改变 一些细菌的芽孢 外 20 毒素和抗生素等代谢产物大多在稳定期产生 衰亡期 稳定期后细菌繁殖越来越慢 死亡数越来越多 并超过活菌数 该期细 菌形态显著改变 出现衰退型或菌体自溶 难以辨认 生理代谢活动也趋于停滞 因此 陈旧培养的细菌难以鉴定 3 培养基有哪些种类 各有何用途 培养基按其营养组成和用途不同 分为以下几类 基础培养基 营养培养基 是配制特殊培养基的基础 可作为一般培养基用 基础 培养基和营养培养基若不加凝固剂即为液体培养基 用于大量繁殖细菌 在液体培养基 中加入 1 2 的琼脂粉 即凝固成固体培养基 常用于细菌的分离和纯化 琼脂粉含量 在 0 3 0 5 时 则为半固体培养基 用于观察细菌的动力和短期保存细菌 增菌培养基 有利于目的菌的生长繁殖 选择培养基 将目的菌从混杂的标本中分离出来 鉴别培养基用于培养和区分不同种类的细菌 厌氧培养基 专供厌氧菌的分离 培养和鉴别 4 试述选用和设计培养基的原则和方法 选择合适的营养物质 营养物质浓度及配比 控制 pH 条件 控制氧化还 原电位 原料来源的选择 灭菌处理 5 营养物质进出微生物细胞内的方式有哪几种 各有何特点 1 单纯扩散小分子物质营养物质通过半透性原生质膜上的小孔 随浓度梯度 由高浓度向低浓度的一侧扩散 不消耗能