【组培技术】活性炭在组织培养中的应用.doc

建组培系统、买组培设备、组培耗材就找亚龙组培 【组培技术】活性炭在组织培养中的应用活性炭在组织培养中的应用：在植物组织培养生根过程中,活性炭(AC)可提供生根的暗环境,防止褐变,提高培养体内可溶性蛋白和总糖的含量,吸附植物生长调节剂与其他有利生根的物质,应选择合适的活性炭浓度,利于生根的适宜浓度为0.1%0.5%。1促进芽的增殖、茎和苗的生长。济南亚龙生物科技有限公司在茎尖培养和茎段培养时，为防止褐变和有害物质的积累,常在培养基中加入适量活性炭。汤浩等研究表明，果蔗茎 尖培养时培养基中加入0.05%的活性炭对防止培养基褐变有良好的效果，有利芽的诱导和增殖。在防止褐变方面，王敬驹等研究表明，活性炭的防褐效果优于 Vc和半胱氨酸。黄霞等在香蕉茎尖培养时也发现，活性炭可改善外植体褐变情况，而Vc不仅不能改善外植体褐变情况，反而使其褐化程度加深。但当Vc与活性 炭配合使用时，其合适的浓度组合却比只使用相同浓度的活性炭时更能改善外植体褐变情况。在库拉索芦荟芽增殖培养中发现，将消毒嫩茎接种于附加不同糖、生长调节剂和活性炭的培养基，当活性炭为0.3%时，平均增殖芽30个；当活性炭为 0.5%时，平均增殖芽41个。活性炭对葡萄试管苗的生长有促进作用，不仅表现在株高和叶片数上，而且其植株也比对照生长健壮、叶色深绿。唐菖蒲培养中， 在成苗培养基上添加0.21.0%的活性炭，对提高成苗率和提高大苗的百分比有着显著的效果，且在此范围内活性炭的用量与其促进效果成正相关。活性炭还 可促进中国水仙、百合、大花蕙兰小球茎，马铃薯微型薯的形成，加快繁殖速度。但邢世岩等（1989）认为活性炭对苦楝和臭椿的丛生芽及嫩茎的诱导有抑制作 用。亚龙生物专注于植物组织培养的研发与实战推广，是中国植物组织培养系统建设第一品牌。植物组织培养系统建设、植物组培技术人员培训与输出、组培 工厂规划设计与施工、组培苗订单生产及技术研发，根据客户需求研发专项植物培养与育苗技术。主营：组培技术、组培设备、组培系统、红枫组培种苗、白芨组 培、植物组培技术人员培训等组培。韩文璞等（2001）在甜樱桃组织培养培养中发现甜樱桃组织培养时，在培养基中加入250mg/L的活性碳，生长表现最好，试管苗增殖5.1倍， 苗高4.5cm；活性炭为500mg/L时，增殖4.3倍，苗高3.6cm；当活性炭浓度增至7501000mg/L时，增殖效果明显下降并受到抑制。 可见在适宜的浓度范围内，活性炭对试管苗的生长有促进作用，而高浓度时，则起抑制作用。2用于生根培养基活性炭最广泛的应用是用于培养物的生根。一般认为活性炭创造的黑暗环境有利于根的诱导和根系的生长。在甜樱桃组织培养中，添加 5001000mg/L活性炭生根率为95.7%100%，添加20004000mg/L活性炭时，生根率大幅度下降，茎的木质化程度也随浓度的增 加而增加。不加活性炭的试管苗根系愈伤化加重，根的组织疏松并褐化，需降低生长素浓度。加入活性炭培养的生根苗移栽成活率均高于对照，且随浓度的增加 （10004000mg/L）成活率由92.6%提高到100%，移栽后6天即产生次生根，茎叶开始生长，而对照的生根苗成活率仅46.3%。但王乔春 （1991）在梨生根培养基中加入活性炭不仅不能促进生根，反而显著的抑制生根，主要原因可能是活性炭吸附了培养基中的生长素。亚龙组培-中国植物组织培 养系统建设第一品牌刘用生等（1997）在苹果试管苗生根中发现，在培养基中仅含0.5mg/LNAA时，新稍基部产生愈伤组织，没有生根；在0.05%活性炭存在 条件下，0.5mg/L和3mg/LNAA均未能表现作用，与仅含0.05%活性炭处理相似，附加5.5mg/LNAA能表现一定作用，8mg/LNAA 效果较佳。这表明活性炭吸附生长素，但生长素浓度大时，被吸附后还有一定剩余，与活性炭同时发挥作用。甜柿试管苗生根困难，添加活性炭有利于其生根，且根 健壮，移栽易成活，这可能与活性炭能够提供暗环境和对培养基中的代谢有害物质的吸收的双重效应有关。另外在葡萄试管苗生根中，添加活性炭根生长加快，而且 质地柔韧不易折断，对照的根虽，稍多些，但粗短质脆。3用于胚培养，促进成苗在许多植物的胚培养时，也用到了活性炭。甜柿含酚类物质较多，组培时褐变严重，从而增加了胚培养的难度，需添加抗氧化剂，艾鹏飞（2002）等研 究发现，活性炭抗褐化效果比柠檬酸、聚乙烯吡咯烷酮效果都好。Cain等在培养葡萄胚珠时也发现，培养基中加入0.1%活性炭可减轻组织变褐和培养基变 色，并产生较少愈伤组织，而不加活性炭则组织变褐，并因产生愈伤组织过多而最终死亡。朱际君等（1983）在培养基中加入活性炭能促进早熟桃萌发成正常 苗，且促进根系生长，幼苗健壮，提高了试管苗的质量。济南亚龙生物科技有限公司核果类果树的一些品种，特别是早熟品种的胚往往发育不全，在胚培过程中，一般需经过2-3个月的低温处理（1-40C），才能打破休眠。近年来一 些研究表明，在培养基中加入GA或BA可代替低温打破休眠。早熟杏胚培养中，活性炭存在情况下，打破休眠所需BA的浓度大幅度提高。在培养基中活性炭为 0.02%时，10mg/LBA和5mg/LIAA配合效果最好，成苗率达到83.3%，与对照相比，幼苗健壮，根系发达；在培养基中活性炭为0.05% 时，上述激素组合，成苗率仅为25%，与20mg/LBA和5mg/LIAA配合成苗率达50%，苗高与0.02%活性炭与10mg/LBA和5mg /LIAA组合无显著差异，但根长显著高于后者。刘用生等发现，无活性炭时仅需0.5mg/LBA即可有效打破杏和苹果胚的休眠，而在加有200mg/L 活性炭的桃幼胚培养基中则需要10mg/L的BA才能打破休眠。4用于花药培养花药培养的主要目的是诱导花粉发育成单倍体，可以快速地获得纯系，缩短育种周期。但实践表明，小孢子的启动发育对药壁组织有相当大的依赖关系。目 前对小孢子启动和进一步发育的机理