临床研究类医学优秀论文 (8).doc

血清-3多不饱和脂肪酸与急性冠状动脉综合征的临床关系研究作者：李谊文1，贾绍斌2，熊爱琴1，李 鹏3 作者单位：1. 解放军第五医院,宁夏 银川 7500042. 宁夏医科大学附属医院，宁夏 银川 750004 3. 宁夏大学，宁夏 银川 750004 【摘要】 目的 探讨急性冠状动脉综合征(ACS)患者血清-3多不饱和脂肪酸(-3PUFA:十八碳三烯酸，ALA;二十碳五烯酸，EPA;二十二碳六烯酸，DHA)的含量变化及其与冠状动脉病变支数之间的关系。方法 120例冠脉造影患者分为对照组和ACS组。根据冠状动脉造影结果将ACS组分为单支病变(SVD)组和多支病变(MVD)组。应用气相色谱/质谱(GC/MS)法测定血清-3PUFA含量。结果 ACS组血清EPA和DHA含量较对照组明显下降(P0.05，P0.05)。MVD组和SVD组患者血清EPA和DHA含量均低于对照组(P0.05)，各组ALA含量差异无统计学意义(P0.05)。经Logistic多因素回归分析，EPA和DHA与ACS独立相关。结论 ACS患者血清EPA和DHA含量明显降低，其水平与ACS的发生有关;血清EPA和DHA含量可能是预测冠状动脉病变的指标;血清EPA和DHA可能是冠心病的保护性因子。 【关键词】 -3多不饱和脂肪酸;急性冠状动脉综合征Study on relationship between acute coronary syndrome and serum omega-3 polyunsaturated fatty acidsLI Yi-wen, et al. (The 5th Hospital of PLA, Yinchuan 750004, China)Abstract Objective To investigate the changes of serum omega-3 polyunsaturated fatty acids (-3PUFA: ALA, EPA, DHA) content with acute coronary syndrome (ACS), also to analyze the relationship between the serum content of -3PUFA and number of diseased vessel in coronary artery disease (CAD).Methods One hundred and twenty patients was divided into ACS group and control group. After coronary angiography, ACS was also divided into two groups according to the number of diseased vessel: single-vessel disease group (SVD) and multi-vessel disease group (MVD). The content of serum -3PUFA was determined by the gas chromatography/ mass spectrometry (GC/MS) method.Results Comparing with control group, EPA and DHA content decreased (P0.05) in the ACS group. ALA content showed no significant difference between two groups; Comparing with control group, EPA and DHA content decreased (P0.05) in the MVD group and SVD group. No differences of both EPA and DHA content were found between SVD group and MVD group. The ALA content showed no significant difference among those three groups; with multivariate logistic stepwise regression analysis, EPA and DHA independently correlated with ACS. Conclusion EPA and DHA content may be related to the development of ACS. The serum content of EPA and DHA may be used to predict CAD. Serum EPA and DHA may be the protective factor of coronary heart disease.Key words Omega-3 polyunsaturated fatty acids; Acute coronary syndrome急性冠状动脉综合征(ACS)是西方国家人群中的常见病和死亡的主要原因，其发病机制复杂，至今尚未完全阐明。许多临床试验发现，-3多不饱和脂肪酸(-3PUFA)可减少心脏性猝死和总死亡率1-2。本研究旨在通过气相色谱/质谱(gas chromatography/mass spectroscopy,GC/MS)法测定血清-3PUFA的含量，初步探讨ACS患者-3PUFA含量变化以及与冠状动脉病变支数之间的关系,为ACS的防治提供理论依据。1 资料与方法 1.1 研究对象:选择2007年3月-2007年10月宁夏医科大学附属医院心脏中心行冠状动脉造影患者120例。其中男78例,女42例,平均年龄(56.910.7)岁。冠脉造影正常并结合临床排除冠心病45例,设为对照组,其中男29例，女16例，平均年龄(56.69.2)岁。结合临床症状和相关检查诊断为ACS 75例,设为ACS组,其中男49例，女26例，平均年龄(57.111.3)岁。ACS的诊断标准参照美国心脏病协会(AHA)、美国心脏病学会(ACC)指南。依据累及冠状动脉病变血管数量分为以下三个组：对照组45例、单支血管病变组40例和多支血管病变组35例。单支血管病变组平均年龄(56.911.9)岁;多支血管病变组平均年龄(57.410.8)岁。对照组所有入选者均接受肝肾功能、血脂、心肌酶等检查。心肌酶学阴性。常规心电图、超声心动图、冠状动脉造影正常。部分患者接受单光子发射计算机断层成像术(SPECT)正常或平板运动试验阴性。所有患者排除有充血性心力衰竭或心源性休克、慢性肝肾疾病、甲状腺功能亢进、肿瘤、慢性感染性疾病，合并周围血管疾病或者周围血管栓塞性疾病。均为汉族，饮食习惯相近。1.2 冠状动脉造影： 所有入选对象均经桡动脉行选择性冠状动脉造影,根据冠状动脉造影对左冠状动脉主干、左前降支、左回旋支、右冠状动脉进行评判，每支血管至少有两个角度以上投影，结果由有经验的医师判断，冠状动脉病变狭窄50%(直径法)为有意义的狭窄。按狭窄所累及的血管支数分为：单支血管狭窄(SVD);多支血管狭窄(2支及以上血管狭窄,MVD)。1.3 血糖、血脂的测定： 研究对象禁食10h后于次日清晨空腹采集静脉血，保留全血及分离血清。应用日本OLYMPUS AU-640全自动生化分析仪测定甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)。葡萄糖氧化酶法测定血清葡萄糖浓度。1.4 -3PUFA含量的测定： 取血清500l加入试管中，加入无水甲醇-苯-氢氧化钠(CH3OH- C6H6-NaOH, 45g20g1g)2ml,混匀后静置20min;再加入0.5mol/L甲醇-盐酸(CH3OH-HCl)1ml、环己烷1ml，充分混匀，4500g/min离心15min，取环己烷层,得到甲酯化后的脂肪酸。然后应用日本岛津公司GC/MS-QP2010仪对脂肪酸甲酯化产物进行分析，测定-3PUFA的含量。1.5 统计学方法：采用SPSS11.0统计软件整理分析。计量资料以均数标准差(s)表示。两组间样本均数的比较采用t检验。多个样本均数的比较采用单因素方差分析，多个样本均数间的多重比较采用最小有意义差异(LSD)t检验。ACS相关危险因素进行多元逐步Logistic回归分析。P0.05)。2.2 血清-3PUFA的测定：GC/MS仪对脂肪酸甲酯化产物进行分析，鉴定并确认了3种-3PUFA，检测结果，见表1。表1 脂肪酸甲酯化后产物分析结果2.3 各组血清-3PUFA含量比较：ACS组血清EPA和DHA含量明显低于对照组(P0.05，P0.01)。MVD组和SVD组血清EPA和DHA含量明显低于对照组(均P0.05)。ALA含量在各组间的差异均无统计学意义(均P0.05)，见表2、3。2.4 ACS危险因素的Logistic回归分析： 以ACS发病为因变量，年龄、体质指数、TC、TG、HDL-C、LDL-C、吸烟、高血压病史、糖尿病史、ALA、EPA、DHA等指标作自变量，进行Logistic回归分析，结果显示EPA和DHA对ACS影响显著且是ACS的保护因素，见表4。表2 对照组与ACS组血清-3PUFA的含量 注：与对照组比较，#P0.05，P0.01表3 不同病变支数组与对照组血清-3PUFA含量的比较注：与对照组比较，#P0.05，有统计学意义表4 Logistic回归分析(前向法)最终结果 3 讨论ACS发病主要取决于两大因素，其一是冠状动脉粥样硬化斑块形成。其二由于斑块破裂，血小板激活，导致血栓形成，造成血管腔阻塞。动物研究发现EPA和DHA有抗动脉粥样硬化(AS)的作用3-4。尸检结果表明脂肪组织中-3PUFA的含量与冠状动脉粥样硬化进程呈负相关5。体内研究发现6血清DHA可延缓冠状动脉粥样硬化的进程。膳食研究表明补充-3PUFA或鱼油可降低冠心病的发病率、减少AS的程度7-8。最近，日本学者9首次发现补充高纯度的EPA(1.8g/d)可减少2型糖尿病患者颈动脉内-中膜的厚度。本研究结果显示：MVD组和SVD组血清EPA和DHA含量均明显低于对照组(P0.05);ALA在各组无统计学意义。支持EPA、DHA具有抗AS的作用，同时也提示EPA和DHA仅仅是影响AS的因素之一。国内学者10报道冠心病组血清EPA、DHA和ALA含量均较对照组明显降低，且三者的含量有与本实验有一定差异，可能与测定方法、测定例数、种族，以及不同地域及膳食结构有关。易损斑块的存在是发生ACS的病理基础,而易损斑块的破裂则是ACS发生的始动环节。易损斑块的特征是薄的纤维帽、大的脂质核和活动性炎症。因此，斑块的组成对斑块稳定性有重要影响。-3PUFA可通过改变动脉粥样斑块的组成，从而影响斑块的稳定性。国外学者11对有多种AS的病人口服大剂量的EPA+DHA(20g/d)后，发现EPA+DHA可进入动脉粥样斑块中。另有学者12观察-3PUFA对动脉斑块稳定性的影响，发现-3组颈动脉斑块中EPA和DHA的比例明显高于对照组;薄帽纤维粥样斑块和有炎症表现的斑块明显少于对照组，而厚帽纤维粥样斑块和没有炎症表现的斑块明显增多;-3组斑块中巨噬细胞的数量明显减少于对照组。-3PUFA也可降低金属蛋白酶的活性，增加斑块的稳定性13。本研究结果表明，ACS组血清EPA和DHA含量低于对照组(P0.05,P0.05)，这可能与本研究中该患者例数较少有关。【参考文献】 1 Marchioli R, Barzi F, Bomba E, et al. Early protection against sudden death by n-3 polyunsaturated fatty acids and after myocardial infarction: time-course analysis of the results of the Gruppo Italiano per Io Studio dela Sopravvivena nells Infarto Miocardico (GISSI)-ProventionJ.Circulation,2002,105(16): 1897-1903.2 Studer M, Briel M, Leimenstoll B, et al. Effect of different antilipidemic agents and diets on mortality: a systematic reviewJ.Arch Intern Med,2005,165(7): 725-730.3 Zampolli A,Bysted A,Leth T, et al.Contrasting effect of fish oil supplementation on the development of atherosclerosis in murine modelsJ.Atherosclerosis,2006, 184(1):78-85.4 De Caterina R, Zampolli A. n-3 fatty acids:antiatherosclerotic effectsJ.Lipids, 2001,36S: S69-78.5 McLaughlin J, Middaugh J, Boudreau D, et al. Adipose tissue triglyceride fatty acids and atherosclerosis in Alaska Natives and non-NativesJ.Atherosclerosis, 2005,181(2):353-362.6 Arja T. Erkkil1, Nirupa R, et al. Higher plasma docosahexaenoic acid is associated with reduced progression of coronary atherosclerosis in women with CADJ. J Lipid Res, 2006, 47(12):2514-2519.7 Baldassarre D, Amato M, Eligini S, et al. Effect of n-3 fatty acids on carotid atherosclerosis and haemostasis in patients with combined hyperlipoproteinemia: a double-blind pilot study in primary preventionJ. Ann Med, 2006,38(5):367-375.8 Hjerkinn EM, Abdelnoor M, Breivik L, et al. Effect of diet or very long chain omega-3 fatty acids on progression of atherosclerosis, evaluated by carotid plaques, intima-media thickness and by pulse wave propagation in elderly men with hypercholesterolaemiaJ. Eur J Cardiovasc Prev Rehabil,2006,13(3):325-333.9 Mita T,Watada H,Ogihara T,et al. Eicosapentaenoic acid reduces the progression of carotid intima-media thickness in patients with typ