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文档简介

链脲佐菌素链脲佐菌素是一种氨基葡萄糖-亚硝基脲,是一种DNA烷基化试剂,能通过GLUT2葡萄糖转运蛋白(GLUT2 glucose trasport protein)独自进入细胞。对胰腺胰岛胰岛素诱发的-细胞具毒性。链脲佐菌素对GLUT2阳性神经内分秘肿瘤细胞有毒性作用.基本信息链脲佐菌素(链氮霉素;) Streptozocin 链脲佐菌素MF:C8H15N3O7 MW:265.22 CAS:18883-66-4 性状:小片状或棱柱体结晶。有吸湿性。溶于水、低碳醇和酮。熔点115(分解)。在水溶液中很快变旋,比旋光度平衡值D25 +39。最大吸收波长(乙醇中):228nm( 6363)。半数致死量(雌小鼠,腹腔)360mg/kg。有毒。有致癌的可能性。 简介STZ对一定种属动物的胰岛细胞有选择性破坏作用,能诱发许多动物产生糖尿病,一般采用大鼠和小鼠制造动物模型。国外有学者报道选用雄性大鼠制造模型的成模率明显高于雌性大鼠。1型糖尿病与2型糖尿病动物模型的制备与STZ注射的剂量有关系:大剂量注射时,由于直接引起胰岛细胞的广泛破坏,可造成1型糖尿病模型;而注射较少量STZ时,由于只是破坏一部分胰岛细胞的功能,造成外周组织对胰岛素不敏感,同时给予高热量饲料喂养,两者结合便诱导出病理、生理改变都接近于人类2型糖尿病的动物模型。 型糖尿病模型:大鼠剂量为7065mgKg; 型糖尿病模型:高糖高脂喂养12个月的大鼠,STZ剂量在2540mgKg或参考文献(鼠均重不同,本剂量以200克均重为例)。 配制方法柠檬酸缓冲液的配制柠檬酸(FW:210.14)2.1g加入双蒸水100mL中配成A液。 柠檬酸钠(FW:294.10)2.94g加入双蒸水100mL中配成B液。 链脲佐菌素配制液用时将A、B液按一定比例混合(1:1.32也有按1:1的),PH计测定ph值,调节ph4.2-4.5,即是所需配置STZ的柠檬酸缓冲液。 注射时用柠檬酸缓冲液以1的浓度溶解STZ,按空腹体重注射相应的STZ,在30分钟内注射完毕。STZ容易失活,STZ快速称取后仍要求干燥避光,推荐用干燥铝箔(或锡箔)纸。 禁食12小时以上(一般过夜禁食,不禁水)。禁食的时间越长,STZ对胰岛细胞的破坏力越明显,即药效越高。所以相对禁食时间延长,可以降低STZ的用量。尾部注射即静脉注射,药物利用率较高,同比腹腔注射,可以节省药量,缺点是操作起来不如腹腔注射方便。 过夜禁食后称重,按大鼠总重量比称取STZ,放一干燥灭菌瓶内,外用锡纸包好,将柠檬酸缓冲液及装STZ的瓶子置冰浴,一起带到动物房,如果注射操作技术不熟练,应两组交替注射,建议分组溶解STZ,比如10只或15只鼠组。推注的速度快,更容易形成高血糖,推注的速度慢,相对的危险性较低,但也不容易成模,常规操作中多要求快速注射。当然,STZ的剂量是决定血糖高低的主要因素。 死鼠问题的解决鼠的个体差别和空腹(低血糖)抵抗力的差异而致死亡率的不同,开始死亡率高可能主要是血糖突然升高,鼠不适应,或发生了DKA(即酮症酸中毒)。 首先,一定要保证足够的饮水量(饮水量不足容易导致死鼠); 其次,高血糖和低血糖都会造成死鼠,避免死鼠可以通过注射胰岛素或暂时补糖,两种途径:1、常见为血糖过高。补胰岛素法,补一些中效胰岛素。例如给诺和灵n或NPH(中性鱼精蛋白锌胰岛素),每次2-3个单位,过了3-5天,大鼠一般死亡率就低了;2、补糖法,禁食后的鼠,注射的时候已经处于低血糖状态,造模4小时后腹腔注射百分之20的葡萄糖,可避免因注射时血糖过低死鼠; 再次,防止动物自相残杀。食物缺乏和供水不足的情况下,会互相撕杀、啃食同类,所以食物和饮水要供应充足,最好是两路供应; 最后,防止感染。糖尿病大鼠尿量多,垫料潮湿,需要勤换垫料,所以糖尿病大鼠较其他大鼠容易出现感染,特别是泌尿道感染和腹腔感染。腹腔注射、皮下注射及采血测血糖等侵入性操作前后,要注意消毒工作。如每次采血测血糖后可用四环素(或金霉素眼药膏)局部涂抹处理伤口预防感染。 模型不达标者,三天后补注STZ(以10mg-20mgkg体重剂量腹腔注射),也很容易成模,或让血糖恢复正常后再常规剂量注射;但要达到理想的效果,往往是恢复到正常状态下重新造模。 保存方法2-8,干燥避光保存。(注:本品易潮解,如需反复取量过程中,应避免接触其受水受潮,受潮后30分钟后失效,这和注射时要求其快速注射是一个道理,即其水溶液不稳定)。 链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)对机体组织毒性相对较小,动物存活率高,是目前国内外使用较多的制备糖尿病动物模型的药物。北京博爱港商贸有限公司,为广大糖尿病研究人员提供高质

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