免疫质控PPT课件.ppt

免疫质量控制 1 检验质量的重要性 医学检验是一门综合性应用学科 是现代医学不可缺少的组成部分 其检验质量直接影响着医疗工作的整体水平 2 免疫质量控制相关的几个概念质量Quality一组固有特性满足要求的程度 注1 术语 质量 可使用形容词如差 好或优秀来修饰 注2 固有的 其反义词是 赋予的 就是指存在某事或某物中本身就的 尤其是那种永久的特性 质量控制 QualityControl QC 质量管理的一部分 致力于满足质量要求质量保证 QualityAssurance QA 质量管理的一部分 致力于提供质量要求会得到满足的信任 3 室间质量评价 ExternalQualityAssessment EQA 能力验证 ProficiencyTesting PT 利用实验室间的比对确定实验室的检测能力 能力验证 室内质量控制采用每天随标本测定质控血清的方法 并将结果误差控制在一定限度之内系统误差通常表现为质控物测定均值的漂移 是由操作者所使用的试剂 仪器设备 标准品或校准物出现的问题而造成的 这种误差可以通过质量控制的措施和方法加以控制 是可以排除的 随机误差则表现测定SD的增大 主要是因为实验操作人员的操作等随机因素所致 其出现难以完全避免和控制 4 单波长与双波长单波长如 405nm 450nm 490nm 630nm等要设空白对照孔 所有孔要减空白对照值双波长如 主波长450nm 参考波长630nm等可不用设空白对照孔OD值与S CO值OD值 酶标仪比色的吸光度S CO值 标本OD值 判断值 CUT OFF 统计数据时要选用S CO 5 临界值 CUT OFF 是ELISA方法检测的阴阳性结果的判断值 不同项目的试剂盒CUT OF值不同 常见有以下几种方式 试剂盒直接提供的常数如HCV IgGCO 1 5与阴性对照相关的计算值如HBsAgCO 2 1N与阴阳性对照相关的计算值如HBcAbCO 1 2 N P 灰区 可疑结果的含义 把定量分析的正常值范围引入定性分析建立灰区概念 即将CO值上下的一段区域定为阳性可疑 需重复实验或换试剂重测以确定其阴阳性 如仍落在灰区范围内则报告 阳性 6 定性酶免疫测定的CUT OFF值 7 ELISA检测的 钩状 效应 HOOKEFFECT 一步法和二步法均存在 只是前者出现的更早些 大多数是高值低吸光度 很少阴性结果 8 质量控制血清 质控血清是已知靶值的血清 在每次的常规检验中加入一份或数份 通过所得结果来了解本次检验的情况 质控血清检验的结果如能控制其误差在一定范围内 就说明该检验没有发生不允许的误差 如果出现超过允许误差范围的异常结果 提示该检验不合格 应寻找原因 纠正后 重检待测标本 因此质控血清在质控工作中起重要作用 9 临界值质控血清 质量控制血清分定值和未定值两种 如只用一份质控血清定值 一般定在正常值与异常值交界点上 定性测定时处于弱阳性水平 称为临界值 乙肝标志物临界值的制定 应按临床需求 为临床提供统一的判断弱阳性的标准 临界值质控血清可以作为试剂盒中的阳性对照品和阴性对照品以外的第三个对照品 它可以灵敏地反映出试剂盒的检出水平 确保弱阳性反应的标本不漏检 10 质控品 临界血清 通常选用的浓度 卫生部临检中心提供 HBsAg1IU mlHBsAb10mIU mlHBeAg2NCU mlHBeAb4NCU mlHBcAb2NCU mlHCV IgG2NCU mlHIV Ab2NCU mlTP2NCU ml 11 质量控制的形式 按其进行范围和评价目的 室间质量评价室内质量控制 12 室间质量评价的目的是相互校正各参与实验室测定结果的准确性 要求保持在临床所能接受的误差范围内 从而使参加活动的实验室之间结果具有可比性 因此室间质量评价着重考察检验操作的整体状态 由于室间质量评价活动是借助外部力量来进行回顾性检查 而不能控制实验室每天所发生的报告质量 故绝不能代替室内质量控制 相反只有首先搞好室内质量控制 保证检验结果达到一定的精密度 才能得到较好的室间质量评价成绩 才谈得上室间结果的可比性 当室间质量评价某一项目出现明显差异时 又要从室内质量控制中寻找原因 重新制订改进计划 室间质量评价的目的 13 室内质量控制的目的 实验室为了监测和评价本室工作质量 决定常规检验报告能否发出所采取的一系列检查 控制手段 旨在检测和控制本室常规工作的精密度 并检测其准确度的改变 提高本室常规工作中批间和日间标本检测的一致性 14 室内质量控制的质量保证 提昌全程保证或全方位保证 主要因素 人质量体系实验前的质量保证实验中的质量保实验后的质量保证 15 人是质量保证的关键素质 热爱医学检验专业具有广泛的临床医学知识和检验基础知识具有高度的责任心具有闲熟的检验操作技能具有严谨的工作作风和实事求是的工作态度设立质量监督管理员 督促 检查 落实各项质量要求 16 质量管理体系建立各种管理文件 操作规程 包括 分析前 中 后各个环节相关表格的建立 填写及归档建立各项标准化操作程序 SOP 包括 仪器设备检验项目等 17 室内质量控制的基本内容包括 分析前的质控分析中的质控分析后的质控病人准备量具与测量计算结果标本采集试剂质量标准曲线标本转移仪器状态质控图绘制标本处理反应条件结果统计分析标本储存比色测定 18 免疫室内质控各种表格的填写 冰箱 水浴箱温度记录表仪器设备故障维修记录本各种仪器设备使用记录本各种仪器设备校准记录本各种仪器设备保养记录本环境温度 湿度记录表各种原始操作记录表尤瑞纳斯 I2000操作记录表杂项操作记录表自身抗体操作记录表TORCH操作记录表ASA ACA操作记录表体检项目操作记录表HIV Ab标本检测登记表HIV Ab原始记录 原始结果记录试剂 质控物批次更换记录免疫室内质控失控结果记录尤瑞纳斯室内质控即时审核记表即刻法 室内质控原始数据记录 计算 表HCV Ab阳性报告记录表HIV A结果登记表室内质控图月分析总结室间质评回报结果分析总结 19 免疫质控方法Levey Jennings法 回顾性 即刻审核 分析 20 L J 质控方法免疫质控目前没有统一的方法 最合适的质控方法尚待研究建立中 目前由各实验室根据各自的情况制定 但必须要满足临床的需要 本实验室引用 L J 质控方法 其内容基本上与临床化学测定的质控方法相同 但失控的判断标准不同 本室ELISA失控的判断标准暂定 1 标本OD值 CO值为阳性的 S CO值 1为失控 标本OD值 CO值为阳性的 S CO值 1为失控 2 S CO值 3S为失控 21 免疫质控的特点影响ELISA检测的因素很多 检测时 阴阳性对照物 质控物和标本同时同板进行检测 检测完成后要对空白孔 阴阳对照孔 质控物进行即刻审核 判定是否在控 该板结果可否发出 22 即时审核规则 UranusAE200 所有项目数据自动换算自动传输 设空白1孔 阴 阳性对照各2孔 室内质控1孔 乙肝两对半 HIV Ab HCV Ab TP CEA AFP EB 肝吸虫抗体 乙肝两对半 上海科华 在控的情况下 阳性结果必须符合特有的模式方可发出报告 对少见或不可能出现的模式必须复查 重点注意HBsAg 复查的方法有 金标 两步法 时间分辨 PCR 中和试验等 23 HBsAgHBsAbHBeAg CUT OFF值 2 1N N 阴性对照 OD值不到0 05按0 05算 通常CO值为0 105 结果判断阳性 CUT OFF值 阴性 CUT OFF值 HBeAbHBcAb CUT OFF值 1 2 N P N 阴性对照 P 阳性对照 通常CO值为1 5 1 7 结果判断阳性 CUT OFF值 阴性 CUT OFF值 24 HIV Ab 北京金豪 筛查阳性按条例规定用另一种方法和本法复查 3次2阳送确认 发 HIV Ab待复查 报告 3次2阴发 阴性 报告 CUT OFF值 0 1 N N 阴性对照 不到0 02按0 02算 通常为0 12阳性 0 12阴性 0 12HCV Ab 北京现代 阳性时应与PCR检测HCV RNA相比较 为防假阳性 HCV Ab阳性时应告知PCR室作进一步检验或做中和试验 CUT OFF值 0 1 N N 阴性对照 不到0 05按0 05算 通常为0 15阳性 0 15阴性 0 15 25 梅毒抗体检测采用的方法 TP ELISA 梅毒明胶凝集法 TPPA 梅毒血球凝集法 TPHA TRUST 非特异性 本室质控原则 先用ELISA试剂在UranusAE200上检测 若阳性标本应即时用TPPA复查 进一步确认后发出报告 TP ELISA CUT OFF值 2 1N N 阴性对照 OD值不到0 05按0 05算 通常CO值为0 105结果判断阳性 CUT OFF值阴性 CUT OFF值 26 AFP CEA定性 郑州安图 设空白1孔 阳性对照 高浓度 2孔 阴性对照 低浓度 2孔 不设室内质控 AFP高浓度 400ug L低浓度 20ug LCEA高浓度 80ug L低浓度 10ug LCUT OFF值 低浓度OD值为阳性阳性的标本审核时在 结果评价 栏注明 建议进一步做定量检查 27 EB病毒抗体 VCA IgA 深圳华康 设空白1孔 阳性对照2孔 阴性 正常 对照2孔 无室内质控物CUT OFF值 0 270 正常对照OD值结果判断EBVVCA IgA阳性 待测血清或血浆OD值 CO值 1 0EBVVCA IgA阴性 待测血清或血浆OD值 CO值 1 0 28 TORCH IgM CMV RUBE TOXO HSV 设阴 阳对照各1孔 CO值血请两孔 结果计算 标本OD值 CO的1 1倍为阳性 标本OD值处在CO值 10 的范围为可疑 质量要求 阳性OD CO值的1 5倍 阴性OD值 CO的OD值 0 6 符合以上要求方可发出报告 29 ELISA定量抗精子抗体ASA6个浓度的标准品 各单孔 操作要求高 相关系数r 0 96方可发出报告 抗心磷脂抗体ACA IgG IgA IgM 单个校正品 阴阳对照 结果计算 标本浓度值 OD值标本 OD值校准 CV 标于盒内标签上 质量要求 阳性对照OD值 0 5 阴性对照OD值 0 25 校正OD 0 3 阳性 校正 1 25 阴性 校正 0 9 符合以上要求方可发出报告 30 时间分辨荧光定量检测乙肝两对半 设A F6个不同浓度校准品 见说明书 和室内质控各1孔 室内质控采用卫生部临检中心乙肝两对半定性质控物 HBsAg结果判读 标本浓度值 0 2ng ml的判为阳性 否则为阴性 质量要求 1 A点计数值应 5000 F点计数值应 100万 2 相关系数r值应 0 983 典型的剂量反映曲线HBsAb结果判读 标本浓度值 10mIU ml的判为阳性 否则为阴性 质量要求 1 A点计数值应 5000 F点计数值应 8万 2 相关系数r值应 0 983 典型的剂量反映曲线HBeAg CUT OFF值 2 1Ncounts N 阴性对照 Ncounts值不到2250按2250算 Ncounts值高于2250 按实际计数值计算 结果判读 标本的counts与CUT OFF的比值 1 0判为阳性 否则为阴性 质量要求 1 阳性对照counts值应 60万 否则实验无效 全部重做 2 阴性对照counts值应 8000 否则实验无效 全部重做 1000 10000 100000 1000000 10000000 0 21525150 HBsAg校准品 ng ml 51040160640 抗 HBs校准品 31 HBeAb CUT OFF值 1 2Ncounts结果判读 CUT OFF与标本counts值的比值 1 0判为阳性 否则为阴性 质量要求 1 阳性对照counts值应 1万 否则实验无效 全部重做 2 阴性对照counts值应 30万 否则实验无效 全部重做 HBcAb CUT OFF值 1 2Ncounts结果判读 CUT OFF与标本counts值的比值 1 0判为阳性 否则为阴性 质量要求 1 阳性对照counts值应 1万 否则实验无效 全