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文档简介
dna的粗提取和鉴定【教学目标】1、通过尝试对植物或动物组织中的dna进行粗提取,了解dna的物理化学性质。2、理解dna粗提取与鉴定的原理【知识梳理】一、自主学习【学点1】基础知识1、提取dna的方法提取生物大分子的基本思路:利用它们的_物理或化学性质_不同进行分离。dna的粗提取,就是利用 dna 与 rna 蛋白质 脂质 等在物理和化学性质方面的差异,提取dna,去除其他成分。 dna粗提取的原理dna的溶解性特点:dna和蛋白质等其他成分在不同浓度的 nacl 中溶解度不同,利用这一特点,选择适当的盐浓度就能使 dna 充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以达到分离目的;_dna_不溶于酒精而_某些蛋白质_溶于酒精。dna的耐受性特点:蛋白酶能水解 蛋白质,但是对dna 没有影响。大多数蛋白质不能忍受6080oc的高温,而dna在80oc 以上才会变性。洗涤剂能够瓦解 细胞膜 ,但对dna没有影响。2、dna的鉴定原理:在_沸水浴_条件下,dna遇_二苯胺_呈现_蓝_色。学点1学习情况检测 1、dna在下列浓度的nacl溶液中,溶解度最低的是( c ) a2mol/l b0.015mol/l c0.14mol/l d5mol/l2、在dna鉴定过程中加入的试剂是(c )a双缩脲试剂 b斐林试剂 c二苯胺试剂 d甲基绿3、洗涤剂对dna没有影响,但能够瓦解( b )a细胞壁 b细胞膜 c细胞核 d细胞质【学点2】实验设计1、 实验材料的选取:凡是含有dna 的生物材料都可以考虑,选用dna含量相对高 的生物组织,成功的可能性更大。2、破碎细胞,获取含dna的滤液鸡血细胞液中加入一定量蒸馏水_并用玻棒搅拌,过滤后收集滤液;洋葱,加入一定的_和_,搅拌_,过滤后收集滤液。3、去除滤液中的杂质方案一的原理: dna在不同浓度_溶液中_不同: 当nacl溶液的浓度为2 mol/l,过滤除去不溶的杂质,再加蒸馏水调节nacl溶液浓度为0.14 mol/l,析出dna,过滤去除_中的杂质,再用2 mol/l的nacl溶液溶解dna。方案二的原理: _分解蛋白质,不分解_;方案三的原理:_耐高温_不耐高温。4、dna析出与鉴定加入与滤液_体积、冷却的 ,静置 ,出现_ 就是dna。试管_支,编号甲乙各加等量5ml_溶液甲中放入少量白色丝状物,使之溶解各加4ml_,混合均匀_5min观察颜色变化学点2学习情况检测1. 破译基因组成的遗传信息,首先要提取dna,下列不适于作为dna提取的实验材料的是( c )a.鸡血细胞 b.蛙的红细胞 c.人的成熟红细胞 d.菜花2、在“dna粗提取与鉴定”的实验中,将提取获得的含dna的粘稠物(还含有许多物质)分别处理如下:第一, 放入0.14mol/l的nacl溶液中,搅拌后过滤,得滤液a和粘稠物a。第二, 放入2mol/l的nacl溶液中,搅拌后过滤,得滤液b和粘稠物b。第三,放入冷却的95%的酒精溶液中,搅拌后过滤,得滤液c和粘稠物c。以上过程获得的滤液和粘稠物质中,因含dna少而可以丢弃的是 a b c 。【学点3】一、操作提示:1、以鸡血液为实验材料时,血液中需要加入 ,防止 。2、加入洗涤剂后,动作要_、_,否则容易产生大量的泡沫,不利于后续步骤的操作。3、加入酒精和用玻璃棒搅拌时,动作要 ,沿_方向,以免 。4、二苯胺试剂要 ,否则会影响鉴定的效果。二、实验步骤:讨论、回忆各步骤的目的:防止血凝; 加速血细胞破裂; 溶解dna; 使2 mol/l的nacl溶液稀释至0.14 mol/l,促dna最大限度地析出; 使含dna的黏稠物被留在纱布上; 使含dna的黏稠物尽可能多地溶于溶液中; 除去含dna的滤液中的杂质; 提取dna; a:出现蓝色。b:无变化。学点3学习情况检测下列可以作为dna粗提取与鉴定的实验材料的是(c )a人的全血 b鸡的全血 c鸡的血细胞液 d西瓜的汁液【典型例题】1、下列有关生物技术的说法,正确的是( a ) a dna粗提取时,用体积分数为95%的冷却酒精进一步纯化dna b制作果醋时应避免通入空气以保证有关菌种正常代谢c制作果酒时应反复冲洗葡萄以避免杂菌的影响d测定土壤中能分解尿素的细菌数目,应采用平板划线法2、在dna的粗提取过程中,初步析出dna和提取较纯净的dna所用的药品的浓度及其名称分别是(c )0.1g/ml柠檬酸钠溶液 2mol/l氯化钠溶液 0.14mol/l氯化钠溶液 体积分数为95%的酒精溶液 0.015mol/l氯化钠溶液 0.04mol/l氯化钠溶液a. b. c. d.3、从细胞核中提取核物质所用的提取液是(c )anacl溶液 b酒精 c蒸馏水 d柠檬酸钠4、以下说法不正确的是( c )adna在0.14mol/lnacl溶液溶解度最小,随着浓度的增加,溶解度将增大bdna在0.14mol/lnacl溶液溶解度最小,随着浓度的减少,溶解度将增大c加热60800c时,蛋白质和dna都将发生结构破坏,失去生物活性d在沸水浴的条件下,dna遇二苯胺会被染成蓝色5、制备鸡血细胞液的过程中,要除去上清液的主要原因是( c )a上清液中存在有毒物质 b上清液中的某些成分能与dna结合成复合物cdna分子不存在上清液中 d上清液中水分含量高,影响dna的提取6、在向溶解dna的nacl溶液中,不断加入蒸馏水的目的是( c )a加快溶解dna的速度 b加快溶解杂质的速度c减少dna的溶解度,加快dna析出 d减少杂质的溶解度,加快杂质的析出7在采用鸡血为材料对dna进行粗提取的实验中,若需进一步提取杂质较少的dna
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