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文档简介

农杆菌 Agrobacteriumtumefaciens 是一种革兰氏阴性土壤杆菌 它含有Ti质粒 能诱导被侵染的植物细胞形成肿瘤 即诱发冠瘿瘤 Ti质粒 包括Ri质粒 上有一段转移DNA 在农杆菌侵染宿主植物时 这段DNA可以转移进植物细胞 并稳定地保留在植物细胞染色体中 变为植物细胞新增加的一群基因 最终能通过有性世代遗传给子代 农杆菌介导转化法 根瘤 存在于能引起植物形成冠瘿瘤的农杆菌中 诱导双子叶冠瘿瘤形成 又称肿瘤诱导质粒 tumorinducingplasmid Ti质粒 4 改造后的Ti质粒载体模式 第一步 植物受伤 植物受伤后能分泌酚类化合物 如乙酰丁香酮 羟基乙酰丁香酮 诱导Ti质粒上的毒性基因表达 农杆菌的感染和生存 第二步感染植物 农杆菌吸附于植物的表面伤口部位 常在茎的基部 第三步毒性基因 vir 表达 T DNA上的产物催化产生过量的生长素和细胞分裂素 形成植物冠瘿瘤 virA virG virD virB 第四步T DNA转移 第五步诱导冠瘿瘤 T DNA被vir基因产物切下来 并运送到植物细胞核里 整合到植物基因组中 第六步土壤农杆菌代谢冠瘿碱 1 共培养法包括原生质体共培养 悬浮细胞共培养和愈伤组织共培养 2 叶圆盘法3 活体接种法 农杆菌转化的方法 1 共培养法 Theco integrationmethod 农杆菌共培养侵
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