微生物学沙门菌弧菌.ppt

第三节沙门菌属 Salmonella 1 种类繁多 血清型超过2500个 2 宿主范围广 多对动物致病3 只对人类致病的占少数伤寒沙门菌甲型副伤寒沙门菌肖氏伤寒沙门菌希氏伤寒沙门菌4 动物沙门菌也可对人致病鼠伤寒沙门菌 猪霍乱沙门菌 肠炎沙门菌 鸭沙门菌 1 一 生物学性状 形态染色 2 1 未接种细菌 3 分解乳糖和葡萄糖产酸产气 硫化氢阴性 2 分解乳糖和葡萄糖产酸不产气 硫化氢阴性 4 不分解乳糖 分解葡萄糖产酸不产气 硫化氢 5 不分解乳糖 分解葡萄糖产酸不产气 硫化氢 主要生化特性 3 4 5 主要沙门菌的生化特性 6 抗原结构 O抗原 H抗原 Vi抗原 1 沙门菌 O 抗原 耐热菌体抗原用阿拉伯数字1 2 3 表示 从1 67 实际上共有58种 不同沙门菌可有相同的O抗原 故将有共同O抗原沙门菌归一群 组 共可分40多组 引起人类疾病的沙门菌 其O抗原大多属于A E组 P126表10 5 7 2 沙门菌 H 抗原 不耐热鞭毛抗原H抗原分为第1相 第2相第1相特异性高 以英文小写字母表示第2相特异性较低 以阿拉伯数字表示各组沙门菌可依H抗原不同分种 型 H抗原为特异性抗原 化学本质为蛋白质 8 3 沙门菌 Vi 抗原 表面抗原少数沙门菌 伤寒杆菌等 新从病人体内分离标本常有表面抗原Vi virulence毒力Vi抗原可阻断O抗原与相应抗体的凝集 在细菌鉴定中应予注意 Vi抗原可刺激机体产生低效价抗体 随细菌清除 此抗体消失 故测定Vi抗体有利于检出带菌者 9 二 致病性 1 侵袭力沙门菌有毒株经口感染小肠末端派伊尔淋巴结M细胞被吞噬在吞噬细胞内增殖 不完全吞噬 致病物质 10 2 内毒素导致体温升高 白细胞数变化等 3 肠毒素个别沙门菌可产生肠毒素 鼠伤寒 作用与大肠杆菌 霍乱弧菌肠毒素相似 引起胃肠炎 致病物质 11 致病菌伤寒沙门菌 副伤寒甲 乙等沙门传染源病人 带菌者 尤为重要 传播途径经粪 口途径传播易感者人群普遍易感 所致疾病 1 肠热症 伤寒 副伤寒 12 血流 第 次菌血症 内毒素 全身淋巴组织中大量增殖 肝 脾 肾 骨髓 伤寒沙门菌 肠粘膜局部淋巴组织中增殖 局部炎症 症状 加重局部炎症溃疡 穿孔 全身症状 发热 不适 全身疼痛 潜伏期 前驱期 病程第1周 全身症状 稽留高热肝脾肿大等 极期 病程第2 3周 13 整个病期约一个月左右 少数患者病后带菌 肠道内 胆囊带菌 成为重要的传染源 感染后体内有抗体产生 但对胞内菌无免疫作用 常用抗体测定作为伤寒病的辅助诊断 肥达反应 细胞免疫逐渐增强细胞内细菌被清除 逐步痊愈 病后免疫以细胞免疫为主 终身免疫 14 因摄入大量 108 其它沙门菌污染食物后引起潜伏期6 12小时主要表现恶心 呕吐 腹痛 腹泻 发热持续3 5天 2 胃肠炎 食物中毒 15 3 败血症 多见小儿及免疫功能低下者病原菌为其它沙门菌 猪霍乱 鼠伤寒等 可致全身感染 败血症 脑膜炎 骨髓炎 心内膜炎等 局部胃肠炎少见 4 无症状带菌者 多见伤寒 副伤寒患者带菌部位胆囊与年龄性别关系密切 16 三 微生物学检查 伤寒病人按病程不同取不同标本 第一周 第二周起 病程全程 食物中毒者取排泄物 呕吐物 可疑食物 败血症患者取血液 细菌的分离鉴定 标本 血 尿 粪便 骨髓 17 细菌分离鉴定步骤 粪便 尿 增菌培养 SS中国兰 挑取不发酵乳糖菌落 血清学鉴定 直接玻片凝集 伤寒杆菌表现葡萄糖 乳糖 动力 H2S 双糖管 18 19 用已知的伤寒杆菌 O H 抗原及副伤寒甲 乙的 H 抗原与不同稀释度的病人血清作试管凝集试验 根据血清中抗体效价及动态变化 可作为伤寒 副伤寒病人的辅助诊断试验 血清学试验 肥达反应 Widaltest 概念 20 1 正常效价O抗体 1 80H抗体 1 160PA抗体 1 80PB抗体 1 802 病程中动态观察二份血清 第二次效价增长四倍以上有意义3 O H抗体的区别O Ab IgM 特点 H Ab IgG 特点 分析肥达反应结果 21 O H均不增高 伤寒 副伤寒可能性小 O增高 H不增高 感染早期 其它沙门菌感染 O不增高 H增高 预防接种后 非特异性回忆反应 O H均增高 伤寒 副伤寒可能性大4 抗体始终不升高的可能因素早期使用抗生素 免疫功能低下等 22 例 发热两周后入院 肥达反应结果如下 甲 O1 160H1 80PA1 40PB1 40 乙O1 80H1 320PA1 40PB1 40 丙O1 160H1 80PA1 40PB1 320 丁O1 320H1 640PA1 40PB1 40 23 伤寒病人微生物检查阳性率 系列1 尿液中细菌培养 系列2 血液中细菌培养 系列3 粪便中细菌培养 系列4 肥达反应抗体效价 阳性率 病程 发病后周次 24 细菌培养 按前面步骤进行 Vi抗体效价测定Vi抗体 1 10有意义 四 防治原则 了解 预防接种 死菌苗 活菌苗 Ty21a株 彻底治疗病人及带菌者 注意饮食卫生 防止病从口入 伤寒带菌者检查 25 变形杆菌属 简述P181 变形杆菌属肠杆菌科有周身鞭毛 运动活泼 培养基中迁徙生长能分解尿素 重要特征 主要引起各种创伤感染 尿路感染等 变形杆菌的迁徙生长现象 26 变形杆菌的迁徙生长现象 27 变形杆菌某些菌株的菌体抗原 与部分立克次体间有共同抗原成分 因此可用变形杆菌作为抗原与立克次体感染者血清做交叉凝集反应 称外裴试验 Weil Felixtest 辅助诊断斑疹伤寒等疾病 外裴试验 28 第11章弧菌属 Vibrio 为一大群菌体弯曲呈弧状的革兰阴性菌主要特点 有单鞭毛 运动活泼培养要求为碱性环境自然界广泛分布 尤其是水体中 致病菌主要有霍乱弧菌 副溶血性弧菌 与肠杆菌科不同的是氧化酶试验阳性 29 自1817年已发生过7次世界性霍乱大流行 前6次由霍乱弧菌古典生物型引起 第7次由霍乱弧菌ElTor生物型引起 霍乱弧菌古典生物型的发现与命名 1854年首次发现 1884年分离成功 Koch 第一节霍乱弧菌霍乱弧菌病原菌的发现与命名 30 EITor弧菌的发现与命名 1905年在埃及EITor检疫所检出 当时未发现与霍乱发病有关系 1961年确定为霍乱病原菌 命名为EITor型霍乱弧菌 1992年出现新流行菌株O139 是目前在东南亚各国流行的主要病原菌 这是首次由非O1群霍乱弧菌引起的流行 霍乱弧菌病原菌的发现与命名 31 一 生物学性状 形态与染色G 弧形 有单鞭毛 运动十分活泼 霍乱弧菌扫描电镜 15000 32 33 营养要求不高 普通培养基上生长良好 耐碱怕酸 pH8 8 9 0碱性蛋白胨水 碱性琼脂平板 霍乱弧菌可在无盐的环境中生长 其他弧菌不能 培养特性 34 35 霍乱弧菌具有O抗原 H抗原 O抗原目前发现的已有155个血清群 O1 O139群引起霍乱 其他血清群引起人类胃肠炎等疾病 O1群又可分为3个血清型 抗原构造与分型 36 霍乱弧菌O1群血清型 37 抗原构造与分型 根据表型差异 O1群霍乱弧菌的每一个血清型还可分为2个生物型 38 39 40 1992年在印度 盂加拉国暴发O139群霍乱流行 O139群在抗原性方面与O1群无交叉 WHO规定 霍乱的病原体包括O1群和O139群霍乱弧菌 O 1群有3个血清型 每一血清型均含有二种生物型 古典生物型 EITor生物型 二种生物型均可引起霍乱流行 41 抵抗力 对酸 含氯的化学消毒剂敏感正常胃酸4min漂白粉 水 1 4 1h 42 二 致病性 致病物质1 侵袭力鞭毛 穿透能力强 穿过肠道粘液层 有利于细菌粘附于肠壁上皮细胞 菌毛 定居因子 是细菌定居于小肠粘膜上皮细胞的重要因素 2 霍乱肠毒素 43 44 45 霍乱肠毒素化学结构与致病机理 性质外毒素 是肠毒素的典型代表 结构A B亚单位构成 A是毒性部分 B是运载和保护部分 致病机理B与肠粘膜上皮细胞受体 GM1 结合 形成穿膜孔道A进入细胞内 作用于细胞内腺苷环化酶细胞内cAMP分泌增多 再吸收剧烈吐泄 46 47 2 所致疾病 霍乱传染源病人 带菌者传播途径经口传播人类为唯一易感者霍乱弧菌对酸敏感 正常胃酸可杀死细菌 霍乱弧菌肠毒素作用后 引起剧烈腹泻 呕吐 典型病例大便为米泔水样 病人可严重脱水 酸中毒 最终因循环衰竭 死亡 未经治疗者死亡率高达50 75 48 3 免疫性 牢固的终身免疫以体液免疫为主 出现保护性抗肠毒素抗体 抗菌抗体 O139与O1之间无交叉免疫 抗原基因由rfb区域编码 O139弧菌O抗原基因大部分缺失 使O 1菌苗对O139弧菌不起作用 49 三 微生物学检查 霍乱为烈性传染病 传播速度极快 对首例病例要及时诊断 封锁疫区 上报疫情 一般根据病情诊断 必要时将可疑物密封保存于碱性蛋白胨水 送上级检疫部门 直接镜检 动力 染色 分离培养 碱性培养基 快速诊断 免疫荧光 血清学鉴定 检查步骤 50 51 O1群霍乱弧菌死菌苗肌肉注射 目前疫苗的研制转向口服疫苗 基因工程减毒活疫苗 治疗 补液 抗菌 防治原则 52 嘉兴市秀城区某餐厅因承办婚宴发生一起食物中毒事件 2004年4月28日中午12时左右 婚宴10桌 100人就餐 从当日17时起 就餐人群开始出现病人 至次日11时 中毒病人31人 罹患率为31 症状主要为腹痛 腹泻 恶心 呕吐等胃肠道症状 副溶血性弧菌广泛生存近岸海水和鱼贝类等食物中 温 热地带较多 我国华东沿海该菌的检出率为57 4 66 5 尤以夏秋季较高 海产鱼虾的带菌率平均为45 48 夏季可高达90 腌制的鱼贝类带菌率也可达42 4 53 第五节副溶血弧菌 了解 副溶血弧菌 原名 嗜盐弧菌 主要引起疾病 食物中毒特点 细菌嗜盐 易污染海产品 在海水中可存活50天 培养要求3 5 氯化钠潜伏期短 几小时即可发病 症状严重 可有水样 血水样便 恢复较快 54 TCBS培养基 显示绿色菌落 非蔗糖发酵 55 第12章幽门螺杆菌 HP G 杆菌 弧形 S形或螺旋状营养要求高 生长缓慢尿素酶试验强阳性抵抗力弱 易产生耐药性 生物学性状 Helicobacterpylori 是螺杆菌属的代表菌种 56 致病性 感染普遍 粪 口传播与胃炎 十二指肠溃疡及胃癌有关 1983年 澳大利亚皇家医院内科医生马歇尔 沃伦 2005年医学诺贝尔奖获得者 致病物质及致病机制不详 幽门螺杆菌 57 幽门螺杆菌 微生物学检查 有创检查 直接涂片 脲酶试验 分离培养无创检查 碳标记呼吸试验 血清学试验 传统方法