2007生物化学试题.doc

四川农业大学硕士研究生课程考试试题课程名称：高级生物化学(总分100)适用专业年级：2006级各专业 主考教师：杨婉身 陈惠 考试时间：2007.1.4考生姓名： 专业 学号 考生注意：第一、二题答案填写在答题卡内，其余答案写在答题纸上1. 一、单选题（,每题分，共20分，在答题卡上将选择的答案用铅笔涂黑） 1下列各三肽混合物，用阳离子交换树脂，pH梯度洗脱，哪一个最先被洗下来？A Met-Asp-Gln； B Glu-Asp-Val；C.Glu-Val - Asp； D Met-Glu-Asp2有一个环肽的组成是Ala，Asp，Gly，Leu2，Val，Met，下列方法中你首先选用什么方法作为你测定这一个肽的序列的第一步？A胰蛋白酶水解 B羧肽酶水解C溴化氰裂解 D氨肽酶水解3下面关于生物大分子沉降系数的叙述哪一个是错误的?A其大小与分子量有关 B其大小与分子形状有关C与其光吸收值的大小有关 D与其扩散系数有关下列关于cAMP的论述哪一个是错误的?A是由腺苷酸环化酶催化ATP产生的 B是由鸟苷酸环化酶催化ATP产生的C可被磷酸二酯酶水解为5-AMP D是细胞第二信息物质5下列关于某一酶的几个同工酶的叙述哪一项是正确的？A由不同的多聚复合体组成 B对同一底物具有不同的专一性 C对同一底物具有相同的Km值 D电泳迁移率往往相同 6 SDS-PAGE把混合的蛋白质分开，是根据各种蛋白质的什么性质？猪细小病毒A蛋白质分子带电性的不同 B分子大小不同C分子极性的不同 D溶解度的不同7下列常见抑制剂中，除哪个外都是不可逆抑制剂：A有机磷化合物 B有机汞化合物C氰化物 D磺胺类药物8当要把Cys、Ser、Gly和His四种氨基酸吸附于阳离子交换树脂柱上时，应调到什么pH值？ ApH 4.0 BpH 6.0 CpH 8.0 DpH10.0 9在下列检测蛋白质的方法中，哪一种取决于完整的肽链？A凯氏定氮法 B双缩脲反应 C紫外吸收法 D茚三酮法（D）10镰刀形红细胞贫血病是异常血红蛋白纯合子基因的临床表现。-链变异是由下列哪种突变造成的：A交换 B插入 C缺失 D点突变 11预测下面哪一种基因组在紫外线照射下最容易发生突变A双链DNA病毒 B单链DNA病毒 C线粒体基因组 D细胞核基因组12酶的活性中心多为一凹穴，其作用是为酶促反应营造一个疏水环境，这种结构特征是蛋白质分子在哪个结构层次上形成的？A.二级结构 B三级结构 C结构域 D超二级结构 13在酶催化机理中，侧链基团既是一个很强的亲核基团，又是一个很有效的广义酸碱基团的氨基酸是 AAsp BHis CGlu D Lys14DNA分子中拓扑连环数（L）、螺旋总数（T）、超螺旋数（W）三个参数之间的关系为 AL=T+W BL=T-W CT = L +W DW =T+ L 15线粒体蛋白的跨膜运送是一种 A类似细胞膜的吞噬作用 B蛋白质解折叠后的传送 C膜内外同类蛋白质交换传送D通过对各个蛋白质专一的载体传送16下面关于多聚酶链式反应（PCR）的叙述哪一个是不正确的？A是 Mullis 在1984年发明的一种体外扩增DNA的技术B根据DNA复制的基本原则，反应体系中需要加入RNA聚合酶以合成引物C在PCR反应体系中，需要特定引物、四种脱氧核苷酸三磷酸、镁离子等D需要模板DNA，即待测的DNA片段17别构酶与不同浓度底物发生作用常呈S型曲线，这说明A别构酶结合一个底物后，与下一个底物的结合能力增强B别构酶催化几个独立反应并最后得到终产物C与单条链的酶相比，别构酶催化反应的速度较慢D产物的量在不断增加18下列关于酶的磷酸化叙述错误的是A磷酸化和去磷酸化都是酶促反应B磷酸化或去磷酸化可伴有亚基的聚合和解聚C磷酸化只能使酶变为有活性形式 D磷酸化反应消耗ATP19 下列关于凝胶层析的叙述哪一项是正确的？A在凝胶层析中分子量小的分子最先流出 B凝胶层析可用于蛋白质分子量的测定 C凝胶层析主要基于蛋白质带电荷多少而达到分离的目的 D凝胶层析不能用于分子量的测定 20下列关于变构酶的叙述哪一项是错误的？A含有多个亚基 B在变构酶激活的情况下，v-S曲线为S形 C变构酶的活性中心与调节中心往往位于同一亚基上 D调节物可以是底物或其它代谢物 二、是非题（每题分，共20分，在答题卡上将选择的答案用铅笔涂黑）1型DNA与型DNA可以互相转化。2蛋白质分子中个别氨基酸的取代未必会引起蛋白质活性的改变。3因为丝氨酸，苏氨酸和酪氨酸都是蛋白质磷酸化的位点，因此所有蛋白质激酶均能使蛋白质中这三种氨基酸残基磷酸化。 4蛋白质亚基与结构域是同义词。5两个核酸样品A和B，如果A的OD260/OD280大于B的OD260/OD280，那么A的纯度大于B的纯度。6由1g粗酶制剂经纯化后得到10mg电泳纯的酶制剂，那么酶的比活较原来提高了100倍。7限制性内切酶切割的DNA片段都具有粘性末端。8在浮液中，即使加ATP、Na+和K+，也测不出Na+，K+-ATP酶活力。9呼吸作用和光合作用均能导致线粒体或叶绿体基质值pH升高。10朊病毒是一类高度保守的糖蛋白和核酸的复合物。11反竞争性抑制剂存在时Vm减少，Km增大。12能改变DNA分子的拓扑连环数的酶叫做DNA拓扑异构酶。13与本质为蛋白质的酶不同的是，ribozyme的活性不需要有特定的三维结构。14IP3引起胞内Ca2+的动员是其传递信号的方式。15DNA局部构象常是DNA结合蛋白之间结合的标志。16酶活力的测定实际上就是酶的定量测定。17蛋白质可逆磷酸化在介导信号物质生理效应中起到中心枢纽的作用。18生物膜中胆固醇的作用是降低膜的流动性。19产生限制性内切酶的细菌通过甲基化来保护自身的DNA不被降解。20密码子不重叠，但基因有可能重叠。三、名词解释（任选作6题，多选不计分，56=30）1noncoding RNA（非编码RNA）是近年来发现的一类能够转录但不能编码蛋白质，具有特定功能的RNA分子，在细胞中执行着许多功能，其中微RNA（miRNA）和小干扰RNA（siRNA）越来越受到人们的关注与其他RNA作用模式不同的是，他们均对编码RNA有干扰作用。 2核糖体循环 指在细胞内构成核糖体的大小两种亚单位（沉淀系数为50S或60S的大亚单位和30S或40S的小亚单位）与蛋白活体合成开始会合（70S或80S粒子形成），合成后又分离的这一反复循环而言3信号肽假说 (1)分泌蛋白的结构基因包含有独一无二的、由高度疏水氨基酸残基组成的编码N末端的序列；(2)新去链氨基末端信号序列的翻译以及这段序列出现于核糖体外触发核糖体结合到膜上，这是由信号肽序列的疏水性质以及核糖体上有与膜结合的特殊位点的结果；(3)膜结合的核糖体多肽链的延伸垂直进行，将新生链穿过膜释放；(4)信号序列在分泌中或分泌后由信号肽酶从多肽链上水解除去。其实简单的说，就是蛋白质分选时候N端的一段蛋白质具有信号作用，故称信号肽4mulecular chaperone（分子伴侣） 一类可以介导蛋白质正确折叠与装配，但其本身并不构成被介导蛋白质的组成部分的蛋白因子。5酶联免疫分析 是将酶作为标记物质，使之和抗原（或抗体）结合形成酶与抗原（或抗体）复合物，然后再根据待测抗体（或抗原）与复合物专一且定量的结合关系，通过测定待测抗体（或抗原）结合的标记酶活力，从而计算出抗原或抗体的量。6蛋白质组学研究某一物种、个体、器官、组织、及细胞中的全部蛋白质，获得整个个体系内所有蛋白质组分的生物学和理化参数，揭示生命规律的一门科学。7亲和标记法 根据酶与底物特异结合的性质，设计或合成一种含有反应基团的底物类似物作为活性部位基团的标记试剂。这种试剂象底物一样进入活性部位，接近结合位点，并以其活泼的化学基团与活性部位的某一基团共价结合，而指示出酶活性部位的特征。8Kcat型抑制剂根据酶与底物特异结合的性质，设计或合成一种含有反应基团的底物类似物作为活性部位基团的标记试剂，这种试剂象底物一样进入活性部位，接近结合位点，并以其活波的化学基团与活性部位的某一基团共价结合，而指示出酶活性部位的特征。四、问答题（任选作三题，多选不计分，103=30）1阐述生物信息学的介入对核酸、蛋白质结构与功能研究的影响。2何谓guanylate binding protein?请写出其亚基组成、主要类型及各类型主要功能，并用箭头图示 guanylate binding protein偶联的受体信号传递途径。G 蛋白:一般是指一类与膜受体偶联的异三聚体结合蛋白，其具有和GTP结合并催化GTP水解成GDP的能力，由、三个亚基组成，可充当细胞膜上受体和靶酶之间的信号传递体。Gs：能活化腺苷酸环化酶(ACase)Gi、Go、Gt系列：Gi：抑制ACase、电位门控Ca2+通道和磷脂酰肌醇专一的PLC，活化K+通道和Na+通道等；Go：抑制神经元Ca2+通道 Gt：活化cGMP专一的PDEGQ系列：活化磷脂酰肌醇专一的PLCG12系列：功能不详，可能和活化JNK、Na+/K+交换系统和活化立早基因 转录有关3阐述 DNA指纹法(fingerprintting)为什么可用于不同个体基因组的比较？RFLPDNA指纹法是指：由限制性内切酶把很大的DNA分子降解成很多长短不同的较小片段，其数目和长度反映了限制性内切酶的切点在DNA分子上的分布，它能作为某DNA或含有这种DNA生物所特有的“指纹”。因为不同个体的等为基因之间碱基代换、重排、插入、缺失等都会引起这种“指纹的多态性。4一种分子量为150,000d的酶，其活性部位含有一个半胱氨酸残基。已知使5ml含有1.2mg/ml的酶溶液完全失活需要3.0*10-2mg的碘乙酰胺（ICH2CONH2，分子量185d）.问该酶是由几个亚基组成的？ 1.25185/3.0*10-2=37000150000/3700045从一种植物中叶中得到了粗酶提取液，每mL含蛋白质32mg。在提取条件下，10uL提取液的催化反应速度为0.14mol/min，取50ml提取液用硫酸胺盐析分离。将饱和度0.3-0.6的沉淀物溶于10 mL水中，此溶液的蛋白浓度为50mg/mL，从中取出10uL，测定其反应速度为0.65umol/min。计算：1）提取过程中酶的回收百分率；2）酶的提纯倍数。（10分）总活力=单位活性*酶原液总体积比活力=单位活力（u/ml）/单位蛋白质浓度(mg/ml)=总活力（u）/总蛋白质（mg）1）粗提取液的总活力=0.14mol/min（10uL*10-3）50Ml=700IU盐析后的总活力=0.65mol/min（10uL*10-3）10ML=650IU提取过程中酶的回收百分率=650/700*100%=92.86%2）粗提取液的比活力=0.14mol/min（10uL*10-3）32mg/Ml=7/16盐析后的比活力=0.65mol/min（10uL*10-3）50mg/mL=1.3酶的提纯倍数=1.37/16=2.976有一个七肽，经分析它的氨基酸组成是：Lys,Gly,Arg,Phe,Ala,Tyr,Ser。此肽未经胰凝乳蛋白酶处理时，与FDNP反应不产生DNP-氨基酸。经胰凝乳蛋白酶(Phe,Tyr,Trp)处理后，此肽断裂成两个肽段，其氨基酸组成分别为Ala，Tyr，Ser和Gly，Phe，Lys，Arg。这两个肽段分别与FDNP反应，可分别产生DNP-Ser和DNP-Lys。此肽与胰蛋白酶（Lys,Arg）反应，同样能生成两个肽段，它们的氨基酸组成分别是Arg,Gly和Phe,Tyr,Lys,Ser,Ala。试问此七肽的一级结构是怎样的？给出分析过程。，并阐述理由。1）此肽未经胰凝乳蛋白酶处理时，与FDNP反应不产生DNP-氨基酸：此肽为环肽2）胰凝乳蛋白酶处理后，此肽断裂成两个肽段，其氨基酸组成分别为Ala，Tyr，Ser和Gly，Phe，Lys，Arg：（Ala-Ser）- Tyr或 （Se