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天水师范学院生化学院20102011学年度第二学期 生物技术专业2008级考试试题(参考答案)(A卷) 科目:分子生物学题目一二三四五六七总分得分一 名词解释(每题2分,共10分)1shine-dalgarno sequence:原核生物起始密码子AUG和其上游3-11个核苷酸处一段3-9个核苷酸序列,是16SrRNA结合的位点。2gene family:由于真核细胞的DNA都是单顺反子,许多相关的基因常常按功能成套组合,一套基因就是一个基因家族。家族中各成员的表达水平和酶活性可以很不相同,但通常是密切相关的。通常分为简单多基因家族、复杂多基因家族和发育调控的复杂多基因家族。 3Renaturation:热变性的DNA缓慢冷却,已分开的互补链按原有碱基排列顺序借助于氢键重新配对结合,致使DNA分子的许多天然性状得以恢复的特性,称为DNA的复性(Renaturation),也称退火(annealing)。4RNA interference 指用双链RNA去抑制特定mRNA的翻译而使该基因编码的蛋白不被表达, 从而使研究物种出现一定的表征(phenotype)。5cDNA library 利用纯化的总mRNA在逆转录酶的作用下,合成互补的DNA即cDNA,再按构建基因文库的类似方法对cDNA进行克隆,由此获得的克隆总称为cDNA文库。二、填空(每题2分,共10分)1. 紫外线引起的DNA损伤最容易形成的是TT二聚体,这类损伤可用可见光进行修复,这种修复方式属回复修复。2. 细菌的应急反应主要是由于氨基酸的合成全面匮乏引起,实施这一应急反应的信号是ppGpp或ppGppp,产生这一物质的诱导物是空载的tRNA。3. 在琼脂糖凝胶电泳中,加入的指示剂有溴酚蓝和二甲苯腈蓝,其中溴酚蓝的分子量相当于300bp的dsDNA,二甲苯腈蓝的分子量相当于4Kbp的dsDNA。用于核酸染色的荧光染料是溴化乙锭。 4.在RNAi技术中,双链RNA来源于RNA病毒的感染、转座子的转录产物,外源导入的基因。5. 真核生物的三种RNA聚合酶,是根据对-鹅膏蕈碱的敏感性不同来区分,其中最为敏感的是RNA polymerase ,其功能是合成mRNA。三、判断并改错(每题2分,不改错者不得分。共10分)1 RNA连接酶的底物是RNA,DNA连接酶的底物是DNA( )。2 色氨酸操纵子中含有衰减子序列( + )。3 原核生物RNA聚合酶全酶具有四个亚基2( )。4 真核生物mRNA的两端都有3羟基( )。5 有两个核酸制剂A和B,A的A260/A280=2.0,B的A260/A280=1.5,因此可判定制剂A的纯度比制剂B要高( + )。四、选择题(每题2分,共20分)1DNA结构中,活性最高的构象是:( B ) A A-DNA B B-DNA C Z-DNA D 超螺旋DNA2提出DNA双螺旋结构模型的是:( A ) A Watson and crick B Aershey and chase C Sanger and Gilbert D Smith and Berg3与pCAGCT互补的RNA是:( D ) A pAGCTA B pGTCGA C pGUCGA D pAGCUG4在乳操纵子中,阻遏蛋白结合的是:( A ) A 操纵基因 B 启动基因 C 结构基因 D 调节基因5组成细菌核糖体的亚基是( B )。 A 20S,40S B 30S,50S C 40S,60S D 50S,70S6对基因工程载体的描述,下列哪个不正确:( D )A.都可以转入宿主细胞B.都有限制性核酸内切酶的识别位点C.都可以连接进目的基因D.都是环状双链DNA分子E.都有筛选标志7RNA电泳转移后与探针杂交叫作:( B )A.SouthernblotB.Northernblot C.WesternblotD.Dotblot E.Situblot8一个mRNA的部分顺序和密码的编号是:( B )140 141 142 143 144 145 146CAGCUCCGGUAGUAAAACAGC以此mRNA为模板,经翻译生成多肽链含有的氨基酸为:A. 141B. 142C. 143D. 1449真核生物基因组中没有:( C )A.内含子B.外显子C.转录因子D.插入序列E.高度重复序列10真核生物中有3种RNA聚合酶,分别叫、。主要根据对-鹅膏蕈碱(-amanitine)的敏感性不同来区别。其中对-鹅膏蕈碱最为敏感的是( B )。ARNA聚合酶 B. RNA聚合酶 C. RNA聚合酶 D. RNA聚合酶和酶五、写出下列简写或单词的中文名称(每题1分,共10分)1Exon 外显子2Pseudogene 假基因3SV40 猿猴病毒404Cosmid 粘粒5Denaturation 变性6excision repair 切除修复7Inclusion body 包涵体8antisense strand 反义链9monocistronic mRNA 单顺反子mRNA10Deletion 缺失六、简答题(每题10分,共30分)1全长为100Kbp的dsDNA,将5末端标记后,经不完全水解得到4个具放射性的片断,分别为:100、70、60、18,完全水解后的电泳片断为:42、30、18、10。绘制其物理图谱。2简述检测DNA溶液纯度的方法和原理?用O.D260/280nm的比值,鉴定核酸的纯度,因DNA在280nm处的OD值是260nm处OD值的一半。DNA接近1.8,RNA接近2.0时较纯。比值偏高,酚类物质污染较多,比值偏低(1.8)说明有Pr污染。3说出在末端终止法测序中,引物的作用? (1)在DNA聚合酶的作用下,将dNTP 或ddNTP加到引物的3-OH末端。 (2)保证所测DNA序列的特异性和准确性。七、实验分析题(10分) 限制性内切核酸酶BamH和Pst切割某一DNA序列,结果如下: 5-GGATCC-3 BamH -G GATCC-3-C CTAGG-5 -C CTAG G- 5-CTGCAG-3 Pst -CTGCA G-3-GACGTC-5 -G ACGTC- 指出被切割DNA分子的5端和3端。(1分)如果将切割后的DNA同DNA聚合酶、4种dNTP在一起温育,这些DNA的末端会有什么样的变化?(3分)经过中的反应后,还能用T4 DNA 连接酶将BamH和Pst末端连接起来吗?(3分)经过连接后的DNA还能形成BamH和Pst的位点吗?(3分)答: 5-GGATCC-3 BamH 5-G GATCC-33-C CTAGG-5 3-C CTAG G-
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