肠推进试验.doc

1.炭末推进法取1822g体重小鼠,随机分为5组,雌雄各半,每天灌胃给药1次,给药7天后,禁食14h,于未次给药1h后给各组动物灌胃10%活性碳与5%阿拉伯胶混悬液10mL /kg体重, 25min后将小鼠脱颈处死,剖腹剥离胃肠道,放在玻璃平板上,测定幽门至回盲部全长及幽门到碳墨前沿的距离,用公式计算碳墨推进百分率。炭墨推进百分率% =炭墨前端与幽门的距离/小肠全长100%2.酚红法末次给药前禁食12 小时, 给药后30分钟, 每只小鼠用0. 04% 酚红溶液( 含10%明胶) 灌胃, 20 分钟后处死动物, 同时取出胃及小肠。将小肠平铺于白纸上, 以酚红在小肠中的移行距离与小肠全长的百分比乘以100%作为小肠推进百分率来评价小肠推进速度;3.苯酚红测定法加以改进对照组予含有苯酚红2mg/mL 的0.85%NaCl 溶液0.5mL 灌胃；实验组予含有苯酚红2mg/mL 的不同浓度的药物溶液0.5mL 灌胃。 20min 后脱颈椎处死小鼠，迅速开腹钳夹贲门和幽门，摘取全胃及小肠。剪取上端至幽门下端至盲部的肠管，不加牵引，平铺于白纸上，测其全长和苯酚红前沿到幽门的距离。苯酚红前沿显示不清楚者，剪断小肠，滴加0.1mol/L 的NaOH（显示鲜艳的玫瑰红色）确认，并在其前和后1cm 处再次剪断滴加NaOH 加以检验，保证数据的准确。以苯酚红在小肠的推进长度占小肠全长的百分数计算小肠推进率，即小肠推进率（%）=苯酚红推进距离/小肠全长100%。4.葡聚糖蓝法分别经口灌服相应药物。灌服剂量均为0 2mL/ 10g。15 分钟后灌服2% 葡聚糖蓝2 000溶液, 每只小鼠04mL。再经30 分钟后脱臼处死动物, 开腹取全部肠, 分别量取自幽门括约肌至色素最前端及至盲肠距离( cm) , 以二者之百分比为小肠推进比, 并求各组均值。5.葡聚糖蓝法加以改进实验组及正常对照组，每组20 只.实验前禁食不禁水12 h.试验组灌服相应药物溶液，每只20 ml/kg（灌服量均按成人体表面积折算）.空白对照组灌服同体积的蒸馏水.灌服后30 min 再灌20 g/L 葡聚糖蓝 2 000 0.2 mL，20 min 后脱颈处死，剖腹取全胃肠.自幽门括约肌处取胃,沿胃大弯侧剪开，将胃内色素残留物充分洗于4 mL去离子水中，3 500 r/min 离心15 min，取上清滤液，用721 A 型分光光度计在620 nm 处测吸光度为胃内色素残留量，求出与对照组均值的百分比即为各样本的胃内色素相对残留量.同时量取幽门括约肌至色素最前段及至盲肠的距离，以二者之比为小肠推进比。6.BASO4法实验组给药前禁食不禁水，给药，给药30分钟后灌入钡餐适量，30分钟后经X光检测钡餐在胃肠道中位置对照组与实验组进行相同处理，先给实验动物灌入与实验组等量的钡餐，30分钟后，再给同等药物，30分钟都X光检查7.BASO4法改进给药30分钟后，动物腹腔注射麻醉，待麻醉满意后，无菌打开动物腹腔，找出胃及盲肠，在胃窦及距盲肠根部0.5cm处注入BASO4混悬液适量，后回纳，关闭腹腔，30分钟后，将小鼠脱臼处死，剖开腹腔，取出肠道，测量BASO4移动距离，计算胃肠推进率8.塑料球粒灌胃法18号穿刺针改制成大鼠专用的固体灌胃针，并以有色塑料为原料制成塑料球粒，在动物不禁食的情况下，灌胃塑料球，收集大鼠粪便中的球粒，将其数量作为检测大鼠肠道推进功能的量化指标。与经典炭末法相比的优点：1.活性炭和炭末具有抑制胃肠蠕动功能，导致便秘，甚至肠梗阻的副作用；墨汁也有止血、止痢、收敛的功能，用含有碳类的物质灌胃方法获得的实验结果不能完全客观反映动物胃肠推动功能的变化。2.应用塑料球粒灌胃法，每只动物可多次收集数据，实验结