苦瓜化学成分提取及含量测定.doc

学术资源苦瓜化学成分提取及含量测定摘要：对近年有关苦瓜化学成分提取及含量测定方法的研究进展作一介绍。 关键词：苦瓜；化学成分；提取；测定 中图分类号：R284.2文献标识码：A文章编号：1672-979X(2007)05-0032-02 Extraction and Determination of Chemical Constituents of Bitter Melon LIU Hong-na1, GAO Xu-hui2 (1. Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine, Nanchang 330004, China; 2. Shaanxi Institute of Metrology, Xian 710048, China) Abstract：This article introduces the extraction and determination of the chemical constituents of bitter melon in these years. Key words：bitter melon; chemical constituents; extraction; determination 苦瓜（Momordica charantia L.）为葫芦科苦瓜属植物苦瓜的果实，性味苦寒，具有清热解凉、滋阴强壮、降低血糖等功效1，我国已有500多年的应用历史。苦瓜果实药食兼用，含有三萜类、甾类、生物碱及氨基酸类等活性成分。近年苦瓜的药用功效受到国内外学者的关注，相应的研究文献也较多。现就苦瓜有效成分的提取方法及测定方法的研究进展作一介绍。 1提取 1.1溶剂提取法 1.1.1乙醇提取乙醇可用于提取苷类、生物碱或有机酸盐类，作为安全的提取溶剂常用于工业化生产。侣丽红等2比较了水和乙醇对苦瓜中总甾（醇）苷的提取，结果表明，30 g药材中，水最佳提取工艺所得甾（醇）苷总量为0.169 6 g， 乙醇最佳提取工艺所得甾（醇）苷总量为0.560 3 g，乙醇提取收率高于水提取。 崔恒林3、高中松4用乙醇水浴回流提取苦瓜皂苷，得出的最佳提取条件分别为：提取温度60，70 ；提取时间6 h，2 h ；乙醇浓度70 ，60 ；料液比15，110。 1.1.2水提取水可用于提取糖类、氨基酸、蛋白质等水溶性成份。刘金福等5用水提取苦瓜多糖，得出的最佳提取条件为料水比120，浸提温度100 ，浸提时间1 h，乙醇沉淀浓度85 。 1.2酶法提取 酶法提取是利用酶的高度专一性破坏细胞壁，从而提高有效成分的提取率。高晓明等6研究了苦瓜皂苷的酶法提取，结果表明，与高温水提法相比，复合酶解提取苦瓜皂苷具有提取速度快、条件温和等优点。 1.3微波提取法 高文等7用微波提取法提取苦瓜苷，并用平行对照试验对比了水煮法、60醇提法及微波法从鲜苦瓜中提取苦瓜苷，3种方法从100 g鲜苦瓜中提取苦瓜苷的量分别为 51，67，88 mg，证明微波法明显优于前2种提取法。确定微波提取的最佳工艺条件为投料物液比15，微波输出功率750 W，提取时间10 min。 1.4大孔树脂法 陈勋等8用大孔树脂法分离法提取苦瓜皂苷，结果表明，此工艺操作简单，分离速度快，最佳提取工艺条件为 80 乙醇浸提12 h，80乙醇洗脱。 1.5其他方法 提取苦瓜中有效成分的方法还有超声提取法、柱提取法及水浴振荡法等。靳小舜等9考察了溶剂用量、浸泡时间、超声时间对苦瓜的籽、果实、叶中成分的影响。结果表明，超声波对同一样品中不同组分有效果相反的作用，在降解破坏某些组分的同时会提高另外一些组分的提取率。姚毅等10用一种新的提取方法，即中空夹层套管提取柱提取法提取苦瓜总皂苷，得出最佳的提取工艺条件：提取溶剂为70的工业酒精，提取温度75，流速每1 h 4.5 BV（柱床体积），柱提取220 min。实验证明，此种提取方法省时、溶剂用量较小、便于控制、设备简单。李健等11 比较了水浴振荡提取、回流提取、索氏提取等3种方法提取苦瓜总皂苷，结果表明，水浴振荡法提取效果最佳，最佳工艺条件为提取温度60，固液比114，乙醇浓度70 %，提取时间3 h，提取2次。 2含量测定 2.1高效液相色谱法（HPLC）高效液相色谱法操作简便、分离效率高、测定范围广、定量准确，广泛用于测定药物中有效成分或生理活性成分的含量。石雪萍12 用HPLC-ELSD法测定苦瓜中皂苷B的含量。样品用甲醇回流提取后，以HPLC检测。色谱柱Zorbax SB C18，检测器ELSD，柱温 30 ，流动相为甲醇-水（7030）。结果表明，此法具有良好的稳定性和较高的灵敏度。 2.2薄层色谱法（TLCS） 薄层扫描法常用于药品鉴别、杂质检查和含量测定。关键等13用薄层扫描法对我国不同产地苦瓜中苦瓜苷的含量进行了测定和方法学研究。结果表明，此法操作简便、结果准确，推广可行。何新益等14 以硅胶G 60为固定相，氯仿-乙醚-丙酮-冰醋酸-水-吡啶为流动相，建立了苦瓜胡萝卜甾苷的高效薄层色谱分析法。 2.3分光光度法 张中伟等15用香草醛-高氯酸比色法测定苦瓜总皂苷。徐斌等16以香草醛高氯酸氧化苦瓜皂苷化合物，用紫外分光光度法，于546 nm处测定吸光度，建立了苦瓜总皂苷含量测定法。 2.4气相色谱法（GC） 程霜等17用气相色谱法对苦瓜中水溶性多糖酯化后进行定性及定量分析。色谱柱为21 000 mm0.2 mm 弹性石英毛细管色谱柱，固定相 OV-225，柱室温度 220 ，汽化温度 270 ，载气为氮气 0.195 MPa，助燃气为空气 0.13 MPa，燃气为氢气 0.06 MPa，氢火焰离子化检测器（FID）。 综上所述，近年苦瓜成分的提取检测技术有了很大进展，提取方法主要有溶剂提取法、酶提取法、微波提取法及大孔树脂法等；检测方法主要包括HPLC，TLCS，GC及分光光度法等。这将为进一步研究分析苦瓜化学成分奠定良好基础，从而促进对苦瓜的药理、药效研究，对开发临床用药有着重要意义。苦瓜作为药食同源的植物，具有较高的药用和食用保健价值。从苦瓜中提取有效活性成分，并对其进行分析研究和开发利用，已成为重要的研究课题。随着提取检测技术的发展和完善，苦瓜的研究及开发将具有广阔的前景。 参考文献 1江苏新医学院. 中药大辞典（上册）M. 上海：上海科技出版社，1986：1281. 2侣丽红，赵余庆. 苦瓜降血糖有效物质的提取工艺研究J. 中药研究与信息，2005，7（8）：14-15. 3崔恒林，徐斌，董英，等. 苦瓜皂苷的提取过程研究J. 江苏大学学报（自然科学版），2004，25（5）：372-375. 4高中松，丁文，彭密军，等. 苦瓜皂甙的提取及含量测定J. 安徽农业科学，2006，34（4）：608，627. 5刘金福，张平平，赵鑫，等. 苦瓜多糖提取工艺的研究J. 天津农学院学报，2003，10（3）：31-33. 6高晓明，张效林，李振武，等. 苦瓜皂甙的复合酶法提取与大孔树脂纯化工艺研究J.化学与生物工程，2006，23（3）：51-52. 7高文，朱晓韵，刘丽君，等. 微波技术在苦瓜甙提取中的应用J. 广西轻工业，2004，（5）： 13-15. 8陈勋，于海宁，唐德松，等. 苦瓜皂甙快速分离纯化方法研究J. 食品科学，2004，25（5）：115-117. 9靳小舜，张晓昀，张海霞，等. 苦瓜成分的提取工艺探索J. 分析化学，2004，32（6）：805-807. 10 姚毅，姚惠源，商靓靓，等. 苦瓜皂甙柱提取工艺的研究J. 粮油食品科技，2006，14（4）：41-47. 11 李健，张令文，刘宁，等. 苦瓜总皂苷提取工艺的研究J. 食品工业科技，2005，26（10）：117-119. 12 石雪萍，姚惠源. HPLC-ELSD测定苦瓜皂甙的含量J. 天然产物研究与开发，2006，l8：471-473. 13 关健，童然询，赵余庆，等. 薄层扫描法测定不同产地苦瓜中苦瓜苷的含量J. 中国现代中药，2006，8（3）：19-21. 14 何新益，刘仲华，王克勤，等. 苦瓜中胡萝卜甾苷的高效薄层色谱分析方法研究J. 食品与机械，2006，22（2