罗氏CobasE601检测癌胚抗原的方法学性能评价.pdf

第3 0 卷 第6 期 2 0 1 3年 1 2月 医 学 研 究 与 教 育 Me d i c a l Re s e a r c h a n d E d u c a t i o n Vo 1 3 0 No 6 De c 2 0 1 3 罗氏 C o b a s E 6 0 1 检测癌胚抗原的方法学性能评价 苏维 王淑仙 陈 占良 冯惠清 段琳 李逸阳 河北大学附属医院检验科 河北 保定 0 7 1 0 0 0 摘要 目的 对罗氏C o b a s E 6 0 1 全自动电化学发光免疫分析仪检测癌胚抗原 C E A 的分析性能进行验证 方法 对C E A 的精密度 准确度 测量线性范围 参考区间和交叉污染率进行验证实验 结果 批内精密度高低两种浓度的 C V 分 别为 4 9 6 和 4 3 8 日间精密度高低两种浓度的 C V分别为 4 9 9 和 4 8 1 5 份室间质控品的检测结果与靶值的偏倚 在 1 4 9 3 5 7 测量线性范围与厂家提供的范围相近 C E A的测量数值有 9 6 3 在提供的参考区间内 交叉污染率为 0 1 2 结论 罗氏C o b a s E 6 0 1 检测 C E A的方法学性能良好 检验结果准确可靠 能够满足临床检测的要求 关键词 电化学发光免疫分析仪 性能评价 癌胚抗原 中图分类号 R 7 3 文献标志码 A 文章编号 1 6 7 4 4 9 0 X 2 0 1 3 0 6 0 0 3 0 0 5 Ev a l ua tio n of Roc he Co ba s E6 01 f o r De t e r m i ni ng CEA S U We i WANG S h u x i a n CHEN Z h a n l i a n g F E NG Hu i q i n g DUAN L i n L I Yi y a n g r C l i n i c a l L a b o r a t o r yo f A f fil i a t e dHo s p i t a l o f He b e i U n i v e r s i ty B a o d i n g0 7 1 0 0 0 C h i n a A b s t r a c t Ob j e c t i v e T o e v a l u a t e t h e e f f e c t s o f Ro c h e C o b a s E 6 0 1 a u t o ma t i c e l e c t r o c h e mi l u mi n e s c e n c e i mmu n o a s s a y a n a l y z e r f o r d e t e r mi n i n g CE A M e t h o d s T o a n a l y z e E 6 0 1 S me a s u r e me n t p r e c i s i o n a c c ur a c y me a s u r e me n t r a n g e r e f e r e n c e i n t e r v a l a n d c a r r y o v e r r a t e o f CE A v e r i f i c a t i o n e x p e r i me n t s we r e t a k e n t o me a s ure Re s u l t s Th e h i g h a n d l o w v a l u e s o f CV o f i n t e r a s s a y we r e 4 9 6 a n d 4 3 8 a n d b e t we e n d a y CV we r e 4 9 9 a n d 4 8 1 5 q u a l i t y c o n t r o l s e r u m s r e l a t i v e b i a s we r e b e t we e n 1 4 9 3 5 7 t h e r e wa s g o o d 1 i n e a r r e l a t i o n s h i p b e t we e n me a s u r e d v a l u e s a n d e x p e c t e d v a l u e s t h e r e wa s 9 6 3 o f t h e me a s u r e me n t d a t a i n t h e r e c o mme n d e d r e f e r e n c e i n t e r v a l c a r r y o v e r r a t e r a n g e wa s 0 1 2 Co n c l u s i o n Ro c h e Co b a s E6 01 a n a l y z e r i s s t a b l e p r e c i s e and a c c ura t e Ke y wo r ds e l e c t r oc he mi l u m i ne s c e n c e i mmu no a s s a y an a l y z e r pe r f o rm an c e e v a l ua t i o n CEA 按照医学实验室质量和能力认可准则 I S O 1 5 1 8 9 文件 对实验室质量的要求 实验室必须对仪器 的技术性能进行相关的评价 验证的性能指标主要包括精密度 准确度 测量线性范围 参考区间和交 叉污染率等 为了保证检验质量 以癌胚抗原 C E A 为检测项目 对罗氏C o b a s E 6 0 1 全自动电化学发 光免疫分析仪进行了性能评价 报道如下 收稿 日期 2 0 1 3 0 8 0 8 作者简介 苏维 1 9 7 9 一 男 河北高阳人 主管检验师 硕士 主要从事医学检验研究 E m a i l z h g f b 1 6 3 c o m 30 第6 期 苏维等 罗氏 C o b a s E 6 0 1 检测癌胚抗原的方法学性能评价 2 0 1 3 年 1 资料与方法 1 1 资料 1 1 1 材料 符合要求的本院门诊和住院送检标本 按美国临床标准化委员会 C L S I E P 0 9 一 A 2 一 I R 文件要求 标本均为新鲜标本 且无脂血 无溶血 1 1 2 仪器 罗氏 C o b a s E 6 0 1 全 自动电化学发光免疫分析仪 1 1 3 试剂 检测试剂 校准品及质控品均为罗氏诊断公司生产的配套产品 1 2方法 1 2 1 精密度评价实验 1 2 1 1 批内精密度评价实验参照 N C C L S E P 5 一 A 口 文件 选择罗氏公司生产的 T M1 低浓度 批号 1 5 7 9 6 1 和 T M 2 高浓度 批号1 5 7 9 6 2 两个浓度的质控品 连续重复测定 2 0次 分别计算其平均 值 标准偏差 S D 和变异系数 C V 参照厂家说明书标准 判断标准 C V 1 0 1 2 1 2 日问精密度评价实验选择 T M1 和 T M 2 两个浓度的质控品 每天测定一次 连续测定 2 0 d 分 别计算平均值 S D和 C V 1 2 2 准确度评价实验 参加 2 0 1 3年 6月卫生部临检中心组织的室间质量评价 E Q A 活动 对其发放的 5份室间质控品 进行检测 以临检中心回报的靶值为标准 用本实验室上报结果与靶值计算相对偏倚 验证本实验室结 果是否在允许范围内 1 2 3 测量线性范围评价实验 参照 N C C I S E P 6 一 A t 评价方案 选取高值血清样本 H 和低值血清样本 L 各一份 浓度接近 仪器给定的测量线性范围 将 H和 L按 5 H 4 H L 3 H 2 L 2 H 3 L H 4 L 5 L的比例混合成 6个样 品 每份样品重复测定 3次 计算均值 以理论值为横坐标 实测均值为纵坐标绘图 计算回归方程 v a x b 验证 C E A测量线性范围 要求a 值在 1 0 0 3 范围内 相关系数 O 9 7 5 1 2 4 参考区间评价实验 参考 N C C L S C 2 8 一 A 2 4 文件要求进行验证 选择 3 0 0份体检合格的健康人标本进行测定 对结果进 行统计并与仪器说明书提供的参考区间进行比较 若有 9 5 1 2 上的测量数据在推荐的参考区间内 则验 证实验通过 否则应进行参考区间的确立实验 1 2 5 交叉污染率评价实验 先连续测定 3次 1 份低浓度标本 测定结果为 L 1 L 2 L 3 再连续测定 3次 1 份高浓度标本 测 定结果为 H l H 2 H 3 按公式计算交叉污染率 交叉污染率 L 1 一 L 3 H 3 一 L 3 X 1 0 0 2 结 果 2 1 精密度评价实验结果 精密度评价实验 T M1 低浓度 和 T M 2 高浓度 两种浓度质控品的 C E A含量 批内精密度评 价实验 T M1 的平均值为 4 1 1 n g m L S D为 0 1 8 C V为 4 3 8 T M 2的平均值为 4 2 1 2 n g m L S D为 一3l一 第6 期 医 学 研 究 与 教 育 第3 O 卷 2 0 9 c v为 4 9 6 E t 问精密度评价实验 T M1的平均值为 4 1 6 n g m L S D为 0 2 0 c V为 4 8 1 T M 2的平均值为 4 1 8 7 n g m L S D为 2 0 9 c V为 4 9 9 实验结果显示 无论是批内还是 日 间结果 实 测 C V均小于 1 0 即小于说 明书给定 的允许范围 2 2 准确度评价实验结果 卫 生 部 临 检 中心 回报 的室 问质 评 结 果 显 示 5份 室 问质 控 品 的检 测 结 果 与 靶值 的偏 倚 在 4 9 3 5 7 评价结果均为 通过 见表 1 表 1 CE A准确度评价实验结果 2 3 测量线性范围评价实验结果 对 C E A的理论值和实测值作散点图 得到回归方程y 0 9 9 8 8 x 一 2 0 9 4 3 0 9 9 9 8 即实测值与理 论值呈较好的线性关系 见图 1 一 J E 仁 趔 露 5 0 0 1 0 0 0 1 5 0 0 理论值 n g mL 图1 CE A分析测量范围 2 4 参考区间评价实验结果 在本实验中共检测 3 0 0 份标本 有 2 8 9 份标本在厂家提供的参考区间之内 占所有标本的9 6 3 2 5 交叉污染率评价实验结果 3次连续检测 的低浓度标本结果分别是 L l 为 5 3 n g mL L 2为 5 3 n g mL L 3为 5 1 n g mL 3次连 续检测的高浓度标本结果分别是 Hl 为 1 6 8 1 n g mL H2为 1 6 8 0 n g m L H 3为 1 6 9 2 n g mL 按公式计算 交叉污染率为 0 1 2 3 讨论 罗氏 C o b a s E 6 0 1 免疫分析仪采用当今世界最先进的电化学发光检测技术 该技术是一种将电化学 发光与抗原抗体特异结合的免疫分析方法 与生物素 亲合素和固相微磁珠融于一体的新的标记免疫 分析技术 具有检测速度快 重复性好 试剂稳定等特点 可以检测包括肿瘤标志物 心肌损伤 贫 血 激素 传染病等在内的 8 0 多种项目 3 2一 O O O O O 0 0 0 柏 加 第6 期 苏维等 罗氏C o b a s E 6 0 1 检测癌胚抗原的方法学性能评价 2 0 l 3 年 国内外对罗氏公司上一代的电化学发光分析仪 C o b a s E l 7 0和 E 4 1 1 进行性能评价已有多篇报道 m 1 而作为罗氏公司生产的新一代电化学发光分析仪 E 6 0 l 还鲜有文章对其进行性能评价 与 E 4 1 1 和 E l 7 0相 比 E 6 0 1 拥有更多的试剂仓位和更快 的检测速度 适合标本量大 开展项 目多的大型医疗机构 使用 本实验室通过对肿瘤标志物 C E A的测定 对该仪器的分析性能进行了评价 实验室检测标本时 一般对每份标本只做一次检验便发出报告 这要求仪器的测量结果必须具有良 好的重复性 精密度是检测重复性的指标 因此对仪器进行精密度验证是最基本的要求 本研究中 E 6 0 1 检测 C E A批内精密度高低两种浓度的 c V分别为 4 9 6 和 4 3 8 日间精密度高低两种浓度的 c v分别 为4 9 9 和4 8 1 均远远小于说明书要求的 1 0 提示 E 6 0 1 检测 C E A精密度良好 室 间质量评价 E Q A 是多家实验室分析 同一标本且 由外部独立机构收集和反馈实验室上报结果 以评价实验室操作的过程 是评价实验室检测结果准确性 的重要依据 通过对室问质评 回报结果进行 分析 可以评价实验室采用的方法和试剂的准确性和稳定性 故我实验室参加卫生部临检中心组织的 E Q A活动 用其提供的质控品进行准确度的验证 这符合对准确度的评价要求 本实验室的检测结果 与靶值的偏倚介于 1 4 9 一 3 5 7 5 份质控品均在允许范围之内 顺利通过了室问质量评价 表明 E 6 0 1 准确度性能符合要求 分析测量范 围验证实验所得到的结果在坐标 图上呈现 良好的线性趋势 定量检测项 目的线性检测范 围 是整个检测系统对应于梯度分析物浓度的仪器最终输出的信号问是否呈恒定比例的性能 是一个很 重要的仪器性能指标 根据厂家提供的说明书 E 6 0 1 检测 C E A的测量线性范围为0 6 0 1 2 0 0 n g m L 本 实验室检测 C E A的最低检测值和最高检测值 分别为 0 6 2 n g mL和 1 1 8 3 n g m L 在上述范围之 内 且 不同浓度 的验证实验表明 线性关 系良好 根据罗氏产品说明书上的提示 不同的实验室应建立 自己的参考范同 本研究按照 N C C L S C 2 8 一 A 2 4 文件要求 对 C E A 的生物参考 区间进行了验证 结果为 C E A有 9 6 3 的测量数据在推荐参考区间之 内 大于 9 5 的文件要求 故可以直接引用厂家提供的参考区间作为 C E A的参考区间 但是该参考区 间毕竟是罗氏公司对欧洲人群进行统计得到的结果 其生活方式 习惯 饮食等各种原因均与亚洲人有 较大 区别 这会导致不 同的参考区间 故为了保证参考 区间的准确性和适用性 有必要建立本实验室 自 己的参考区间 这将是下一步的工作 交叉污染是为了防止检测结果可能受到其他标本 的污染影响所进行 的实验 由于 E 6 0 1在加入样本 和试剂前 会自动冲洗加样针 且使用了一次性的吸头和反应杯 这会最大限度降低样本问交叉污染的 概率 本实验室的验证结果表明 交叉污染率仅为 0 1 2 检验结果准确可靠 但是 E 6 0 1的测量池是 每次检测后清洗重复使用的 这是发生交叉污染 的潜在风险 所 以有必要对其进行周期保养 综上所述 罗氏 C O B A S E 6 0 1 电化学发光免疫分析仪检测 C E A的方法学性能良好 能够为临床提 供准确可靠 的检验结果 满足临床检测 的性能要求 参考文献 1 C L S I E P 0 9 A 2 I R Me t h o d c o mp a r i s o n a n d b i a s e s t i m a t i o n u s i n g p a t i e n t s a m p l e s a p p r o v e d g u i d e l i n e s e c o n d e d i t i o n i n t e r i m R e v i s i o n I S P A N C C L S 2 0 1 0 2 N C C L S E P 5 A 2 E v a l u a t i o n o f p r e c i s i o n p e r f o r ma n c e o f q u a n t i t a t i v e m e a s u r e m e n t me t h o d s A p p r o v e d g u i d e l i n e s e c o n d e d i t i o n S P A N C C L S 2 0 0 4 3 N C C L S E P 6 一 A E v a l u a t i o n o f t h e L i n e a r i t y o f q u a n t i t a t i v e me a s u r e me n t p r o c e d u r e s S t a t i s t e c a l a p p r o v e d g u i d e l i n e S P A N C C L S 一 3 3 第6 期 医 学 研 究 与 教 育 第3 0 卷 2 UU3 4 N C C L S C 2 8 一 A 2 Ho w t o d e fi n e a n d d e t e r mi n e r e f e r e n c e i n t e r v a l s i n t h e c l i n i c a l l a b o r a t o r y A p p r o v e d g u i d e l i n e s e c o n d e d i t i o n S P A NC CL S 2 0 0 0 5 E S HR A T K HA H B N AMV A R D R A J A B I A N H e t a 1 A g r e e m e n t b e t w e e n e l e c t r o c h e mi l u mi n e s c e n c e a n d r a d i o mm u n o a s s a y me t h o d s f o r d e t e r mi n a t i o n o f p l a s m a t h y r o i d h o rmo n e c o n c e n t r a t i o n s i n s h e e p J B u l g J V e t M e d 2 0 1 1 1 4 2 8 7 9 3 6 梁大立 邱瑞霞 陆灶其 罗 E1 7 0 全 自动电化学发光分析仪检测糖类抗原1 9 9 的性能评价f J 1 医药前沿 2 0 1 3 3 7 3 9 1 3 9 2 7 谭浩 电化学发光分析仪免疫分析系统El 7 0 的应用评价 J 实用预防医学 2 0 1 1 1 8 3 5 2 7 5 2 8 8 1 C HE N Y K I N N E Y L B O Z O V I C A e t a 1 P e r f o rm a n c e e v a l u a t i o n o f s i e me n s A D V I A c e n t a u r a n d r o c h e m o d u l a r El 7 0 t o t a l 2 5 一 O H v i t a mi n d a s s a y s J C l i n B i o c h e m 2 0 1 2 4 5 1 6 1 4 8 5 1 4 9 0 9 王炎 杨娟 张雪梅 E 4 1 l 电化学发光免疫分析系统性能评价及临床应用 J 1 检验医学与临床 2 0 1 1 8 2 3 2 8 7 2 2 8 7 3 1 0 S YME N R T OF T A D S T O D D A R T M e t a 1 C l i n i c a l p e r f o r m a n c e o f t h e R o c h e c o b a s e 4 1 1 a u t o ma t e d a s s a y s y s t e m for t h y r o t r o p i n r e c e p t o r a n t i b o d i e s for t h e d i a g n o s i s o f G r a v e s d i s e a s e J A n n C l i n B i o c h e m 2 0 1 1 4 8 5 4 7 1 4 7 3 1 1 刘映祥 云波 罗氏E 6 0 1 电化学发光自动免疫分析仪使用体会f J 医学信息 2 0 1 2 2 5 1 0 2 3 1 1 2 陆明洋 邓海峰 李敏 等 呻瘤标志物室间质评结果的评价 J J 标记免疫分析与临床 2 0 1 1 1 8 2 1 3 5 1 3 6 1 3 C H A U D HA R Y R D A S S S O J H A S e t a 1 T h e e x t e r n a l q u a l i t y a s s e s s m e n t s c h e m e fi v e y e a r s e x p e r i e n c e a s a p a r t i c i p a t i n g l a b o r a t o ry J A s i a n J T r a n s f u s S c i 2 0 1 0 4 1 2 8 3 0 责任编辑 裘永强 上接第4 页 2 0 1 3 4 2 6 3 6 6 4 1 3 曹志然 董炳梅 程君生 等 迁移性树突状细胞与淋巴结内树突状细胞在抗B s u i s 免疫应答中的作用 J 中国免疫学杂志 2 0 1 0 2 6 8 6 7 5 6 7 8 4 王蓓 戎瑞雪 张雷芳 等 布鲁菌s 株诱导小鼠腹腔巨噬细胞凋亡及免疫激活的研究 J 中国免疫学杂志 2 0 1 3 2 9 8 8 0 0 8 0 4 5 K O HL E R S MI C HA U X C HA R A C HO N S P O R T E F e t a 1 Wh a t i s t h e n a t u r e o f t h e r e p l i c a t i v e n i c h e o f a s t e a l t h y b u g n a m e d B r u c e l l a J T r e n d s Mi c r o b i o l 2 0 0 3 1 1 5 2 1 5 2 1 9 6 R O O P R M G A I N E S J M A N D E R S O N E S e t a 1 S u r v i v a l o f t h e fi t t e s t h o w B r u c e