江苏省射阳县第二中学高三生物教学资料 DNA的粗提取与鉴定活动导学案（无答案）.doc

dna的粗提取与鉴定活动导学案 【学习目标】： 通过尝试对植物或动物组织中的dna进行粗提取，了解dna的物理化学性质，理解dna粗提取以及dna鉴定的原理。【重点难点】：dna粗提取以及dna鉴定的原理【活动方案】： 活动一：基础知识梳理：1. 提取dna的基本思路是：选用一定的 或 方法分离具有不同 或 的生物大分子。2原理：利用与 、 和 等在物理和化学性质方面的差异，提取dna，去除其他成分。（1）dna的溶解性 dna和蛋白质等其他成分在不同浓度的 溶液中溶解度不同，利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使 充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。当nacl的浓度为，的溶解度最小，而析出。（2）酒精溶解：dna不溶于 溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理，可以将dna与蛋白质进一步的分离。（3）dna对酶、高温和洗涤剂的耐受性 蛋白酶能水解 ，但是对 没有影响。大多数蛋白质不能忍受6080oc的高温，而dna在 以上才会变性。洗涤剂能够瓦解 ，但对dna没有影响。（4）dna的鉴定 在 条件下，dna遇 会被染成 色，因此二苯胺可以作为鉴定dna的试剂。活动二、实验设计：1、实验材料的选取 凡是含有 的生物材料都可以考虑，但是选用 的生物组织，成功的可能性更大。2、破碎细胞，获取含dna的滤液 以鸡血细胞为例，在鸡血细胞液中加入一定量的 ，同时用 搅拌，过滤后收集滤液即可。如是植物细胞，需要先用 溶解细胞膜。如提取洋葱的dna时，在切碎的洋葱中加入一定的 和 ，进行充分的搅拌和研磨，过滤后收集研磨液。3、去除滤液中的杂质 （）方案一：利用在不同浓度的溶液中溶解度不同。（）方案二：直接在滤液中加入，反应分钟，因为木瓜蛋白酶能够分解蛋白质。（）方案三：将滤液放在保温分钟。4、dna的析出与鉴定 将处理后的溶液过滤，加入与滤液体积 、冷却的 ，静置 ，溶液中会出现 ，这就是粗提取的dna。用玻璃棒 搅拌，卷起丝状物，并用滤纸吸取上面的水分。取两支20ml的试管，各加入物质的量浓度为 的nacl溶液5ml，将丝状物放入其中一支试管中，用玻璃棒搅拌，使丝状物溶解。然后，向两支试管中各加入4ml的 。混合均匀后，将试管置于 中加热5min，待试管冷却后，比较两支试管溶液颜色的变化，看看溶解有dna的溶液是否变 。活动三、操作提示1、以血液为实验材料时，每100ml血液中需要加入3g ，防止 。2、加入洗涤剂后，动作要 、 ，否则容易产生大量的泡沫，不利于后续步骤地操作。加入酒精和用玻璃棒搅拌时，动作要 ，以免 ，导致dna分子不能形成絮状沉淀。3、二苯胺试剂要 ，否则会影响鉴定的效果。4提取鸡血中dna时，要除去血液中的上清液，这是因为什么？【反馈练习】：1.下列有关“利用菜花进行dna的粗提取与鉴定”实验的叙述中，正确的是a采用不同浓度的nacl溶液反复溶解与析出dna的方法可去除部分蛋白质等杂质 b在切碎的菜花中加入一定量的蒸馏水，充分研磨后过滤获取滤液c用蒸馏水将nacl溶液浓度调至014moll，滤去析出物 d将白色丝状物溶解在2mollnacl溶液中，加入二苯胺试剂即呈蓝色2. 某同学用洋葱进行dna粗提取和鉴定实验，操作错误的是a加入洗涤剂后用力进行快速、充分的研磨b用蛋白酶纯化过滤后的研磨液中的dnac加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌d加二苯胺试剂摇匀后沸水浴加热3.下表为某生物兴趣小组利用鸡血细胞进行dna粗提取与鉴定的实验过程： 。 。 。 。 。【课后作业】：1在研究dna的基因样本前，采集来的血样需要蛋白水解酶处理，然后用有机溶剂除去蛋白质。用蛋白水解酶处理血样的目的是 a.除去血浆中的蛋白质 b.除去染色体上的蛋白质 c.除去血细胞表面的蛋白质d.除去血细胞中的所有的蛋白质，使dna释放，便于进一步提纯2洗涤剂能够瓦解（ ），但对dna没有影响。 a.细胞壁 b.细胞膜 c.细胞核 d.细胞质3在物质的提取过程中常使用合适的溶剂来溶解所需提取的物质。下表各选项中的物质不溶于对应溶剂的是选项物质溶剂a叶绿体中的色素无水乙醇b细胞膜中的脂质丙酮c细胞中的dna2mol/l的氯化钠溶液d红细胞中的血红蛋白甲苯4下列对“dna的粗提取和鉴定”实验的叙述，正确的是 a利用dna能溶于酒精溶液，而蛋白质不溶于酒精溶液，可将dna与蛋白质分离b利用85的高温能使蛋白质变性，却对dna没有影响的特性，可将dna与蛋白质分离c利用dna在0.14 moll1nacl溶液中溶解度最大的特点，可将dna与杂质分离d在dna滤液中加入嫩肉粉，通过木瓜蛋白酶的作用，可将dna与蛋白质分离5.下列实验过程中，出现的正常现象有 a制作果酒时，发酵瓶中溶液产生较多泡沫 b用果酒制作果醋过程中，液面出现一层褐色菌膜c制作腐乳过程中，豆腐表面发黏且长有白色菌丝d用固定化酵母进行酒精发酵，凝胶珠逐渐浮上液面6（多选）与析出dna粘稠物有关的叙述，正确的是 a.操作时缓缓滴加蒸馏水，降低dna的溶解度 b.在操作a时，用玻璃棒轻缓搅拌，以保证dna分子完整 c.加蒸馏水可同时降低dna和蛋白质的溶解度，两者均可析出d.当丝状粘稠物不再增加时，此时nacl的浓度相当于0.14mol/l7（多选）关于dna的粗提取与鉴定的实验中，依据的原理包括 adna在nacl溶液中的溶解度，随nacl浓度的不同而不同b利用dna不溶于酒精的性质，可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的dnacdna是大分子有机物，不溶于水而溶于某些有机溶剂d在沸水中，dna遇二苯胺会出现蓝色反应8（多选）下表是有关淀粉酶的探究实验，“+”表示加，“”表示不加。下列叙述正确的是a本实验的目的之一是探究温度对淀粉酶活性的影响b本实验不能用碘液代替斐林试剂对实验结果进行检测c根据实验结果可以得出淀粉酶的最适温度是60d根据试管的实验结果说明淀粉酶具有专一性9（多选）右图为人体细胞正常分裂时有关物质和结构数量变化的相关曲线，正确的是a若曲线表示减数第一次分裂中核dna分子数目变化的部分曲线，则n等于23b若曲线表示有丝分裂中染色体数目变化的部分曲线，则n等于46c若曲线表示减数分裂中每条染色体上dna分子数目变化的部分曲线，则n等于1d若曲线表示有丝分裂中染色体组数目变化的部分曲线，则n等于210下列有关固定化酶和固定化细胞的叙述，正确的是a可用包埋法制备固定化酵母细胞b反应产物对固定化酶的活性没有影响c葡萄糖异构酶固定前后专一性不同d固定化细胞可以催化各种反应底物的一系列反应11“dna的粗提取与鉴定”实验中，a、b、c、d、e五个小组除下表中所列处理方法不同外，其他操作步骤均相同，而且正确，但实验结果却不同。 组别 实验材料 提取核物质时 加入的溶液 去除杂质时 加入的溶液 dna鉴定时 加入的试剂 a 鸡血 蒸馏水 95的酒精(25c) 二苯胺 b 菜花 蒸馏水 95的酒精(冷却) 双缩脲 c 人血浆 蒸馏水 95的酒精(冷却) 二苯胺 d 人血细胞 2moll的氯化钠 014moll的氯化钠 双缩脲 e 鸡血 蒸馏水 95的酒精(冷却) 二苯胺 (1)实验材料选择错误的组别是 。其原因是(2)除选材外其他实验步骤均正确，但得不到dna的组别是 。 (3)沸水浴中试管颜色变蓝的组别是 ；蓝色较淡的是，其原因是 。 (4)b组实验不成功的最主要原因是 。 11.胡萝卜素是一种常用的食用色素，可分别从胡萝卜中或产胡萝卜素的微生物菌体中提取获得。流程如下：（1）选产胡萝卜素的酵母菌r时，可选用 或平板划线法接种，采用平板划线法接种时需先灼