微量加样器的质控.doc

微量加样器的质控微量加样器是微量酶免疫测定中加样时必用的设备，其使用和校准对酶免疫测定结果有直接的影响，以下对如何正确地使用微量加样器及其校准等进行介绍：1. 加样器的使用1.1 吸液 标准吸液步骤如下：1.1.1 把按钮压至第一停点；1.1.2 垂直握持加样器，使吸头浸入液样中，浸入液体深度视型号而定（见附表）不同加样器允许浸入液体深度加样器型号浸入液体深度P2和P101mmP20和P1002-3mmP200和P10002-4mmP50003-6mmP10ML5-7mm1.1.3 缓慢、平稳地松开按钮，吸液样。等一秒钟，然后将吸头提离液面。用药用吸纸抹去吸嘴外面可能附着的液滴，小心勿触及吸头口。1.2. 放液1.2.1 将吸头口贴到容器内壁并保持10-40倾斜1.2.2 平稳地把按钮压到第一停点。第一秒钟后再把按钮压至第二停点以排除剩余液体。1.2.3 压住按钮，同时提起加样器，使吸头贴容器壁察过。1.2.4 松开按钮。1.2.5 按吸头弹射器除去吸头（只有改用不同液体时才需要更换吸头）。1.3. 预洗 当装上一个新吸头（或改变吸取的容量值）时应预洗吸头，先吸入一次液样并将之排回原容器中。预洗新吸头能有效提高移液的精确度和重现性。这是因为第一次吸取的液体会在吸头内壁形成液膜，导致计量误差。而同一吸头在连续操作时液膜相对保持不变，故第二次吸液时误差即可消除。1.4. 致密及粘稠液体的吸取 对于密度高于水的液体，可将容量计的读数调到低于所需值来进行补偿。例如：用P20移液器转移10ml血清。先将读数调到10ml，吸取后以重量法测定。如实测体积为9.5ml，即偏差0.5ml并重复一次。如第二次测定仍不够准确，根据偏差再作调整。排放致密或粘稠液体时，宜在第一停点多等一二秒钟再压到第二停点。1.5. 加样器吸头 加样器吸头是整个移液系统的有机组成部分，对其基本要求是，必须有高机械、热力学和化学稳定性，且纯度高，生产过程纯净，无有机或化学物质（如染料）和重金属污染。选择密封良好的环口、薄壁和嘴口尖细的吸头，将使得在加样时，吸头的安装或卸脱更加容易。吸头管壁有弹性，加样吸液时不会产生旋涡，如此加样的精度就更高。吸头嘴口无毛刺，表面光洁平滑，使得其沾湿性极小，可避免液体留外壁引起的误差。吸头应与加样器上吸头套筒密封完好，可防止由于空气泄漏而造成加样精度或准确度的误差。此外，吸头还应有液体容积刻度线。D200吸头在20ml和100ml处有标记；D1000吸头在300ml处有标记，D10吸头在2ml处有标记。最后，吸头应可在1211Pa压力下消毒20min。如果在使用加样中，想绝对避免样品与样品、样品与加样器或样品与操作人员之间的污染，建议使用Diamond带滤芯吸头。Diamond带滤芯吸头可以经高温消毒，其内置滤芯不会损坏。2. 加样器的校准加样器容量性能的鉴定，可依据国际标准化组织（ISO）文件ISO/DIS8655和国家技术监督局颁发的有关定量、可调移液器的中华人民共和国国家计量检定规程定量、可调移液器试行检定规程（JJG646-90）规定的重量测试方法。这是目前用于此类仪器有效的校准方法。加样器校准标准操作程序2.1. 适用加样器范围 各种品牌、型号的固定、可调和多通道加样器。2.2. 校准环境和用具要求2.2.1 室温20-25，测定中波动范围不大于0.5。2.2.2 电子天平：放置于无尘和震动影响的台面上，房间尽可能有空调。称量时，为保证天平的湿度（相对湿度60%-90%），天平内应放置一装有10ml蒸馏水的小烧杯。2.2.3 小烧杯：5-10ml体积。2.2.4 测定液体：温度为20-25的去气双蒸水。2.3. 选定校准体积 拟校准体积；加样器标定体积的中间体积；最小可调体积（不小于拟校准体积的10%）。如为固定体积加样器，则只有一种校准体积。2.4. 校准步骤2.4.1 将加样器调至拟校准体积，选择合适的吸头。2.4.2 调节好天平。2.4.3 来回吸吹蒸馏水3次，以使吸头湿润，用纱布拭干吸头。2.4.4 垂直握住加样器，将吸头浸入液面2-3mm处，缓慢（1-3s）一致地吸取蒸馏水。2.4.5 将吸头离开液面，靠在管壁，去掉吸头外部的液体。2.4.6 将加样器以30角放入称量烧杯中，缓慢一致地将加样器压至第一档，等待1-3s，再压至第二档，使吸头里的液体完全排出。2.4.7 记录称量值。2.4.8 擦干吸头外面。2.4.9 按上述步骤称量10次。2.4.10 取10次测定值的均值作为最后加样器吸取的蒸馏水重量，按蒸馏水在不同温度及气压下的重量与体积的换算因子计算体积。然后，按校准结果调节加样器。2.5加样器的维护保养程序加样器应根据使用频率进行维护，但至少应每3个月进行一次，具体方法如下：2.5.1.一般维护可用中性洗涤剂清洁，或者用60的异丙醇，然后用蒸馏水反复洗涤，去除洗涤剂或异丙醇，晾干。清洁后活塞处可使用一定量的润滑剂。2.5.2.如果有液体进入加样器内的严重污染，可将加样器拆开后进行清洁，具体拆开步骤参照加样器说明书。2.5.3.高压消毒，有的加样器的吸管部分可高压消毒，但需注意的是消毒时不可超温超时，也不能挤压放置，以免造成变形。2.5.4.可调式移液器在不使用时应妥善地竖立放于支架上，远离潮湿及腐蚀性物质。2.5.5.在移液操作过程中为