USP32残留溶剂完整版.docx

USP32：残留溶剂 完整翻译概述该通则适用于现有的原料药，辅料和成品。所有原料药和成药均需对可能存在其中的溶剂进行控制。凡例中包含了对残留溶剂控制的总的要求，通则将对溶剂残留所使用的检测方法与限度做出详细的规定，由于各药品厂家使用的溶剂种类大相径庭，因此各论中不再涉及。本通则的建立目的是保障病人的服药安全，提供残留溶剂的可接受限度。USP建议尽量使用低毒性的溶剂，并描述了对于某些残留溶剂而言其毒性可接受的限度水平。药物中的残留溶剂系指在原料药或辅料的生产中，以及在制剂制备过程中使用或产生的，但在工艺过程中未能完全去除的有机溶剂。在原料药的合成以及赋形剂的生产过程中，适当的溶剂可提高产量、影响药物的外观与形状（如晶型、纯度、溶解度等）。因此，有机溶剂是合成过程的关键因素。本通则虽然没有对作为辅料直接使用的溶剂以及溶剂化物形态的溶剂进行单独的强调，不过此类产品中的溶剂含量同样应该进行评估与论证。药物中残留的溶剂不能产生药效，应尽最大可能去除，以满足GMP或其它质量标准的要求。药品中含有的残留溶剂应该不超过已有安全数据所支持水平。一类溶剂（见表1）为避免使用的溶剂，有不可接受的毒性，除非它们的使用有风险-收益评估结果的强力支持，应避免在生产中使用。二类溶剂（见表2）为限制使用的溶剂，有较弱毒性的溶剂，应限制使用以免出现潜在的不良影响。三类溶剂（见表3）为低毒溶剂，对人体及环境的危害较小，应尽量使用。注：本通则涉及的所有溶剂见附件1，这些表格中的溶剂及限度并非全部，随着医药工业的发展，今后会将新的溶剂添加到列表中。表1：一类溶剂（应避免使用）溶剂浓度（ppm）备注苯2致癌四氯化碳4毒性和环境污染1,2-二氯乙烷5毒性1,1-二氯乙烯8毒性1,1,1-三氯乙烷1500环境污染表2：二类溶剂（应限制使用）溶剂PDE（mg/day）浓度（ppm）乙腈4.1410氯苯3.6360氯仿0.660环己胺38.838801,2-二氯乙烯18.718701,2-二甲氧乙烷1.0100N,N-二甲基乙酰胺10.91090N,N-二甲基甲酰胺8.88801,4-二氧杂环乙烷3.83802-乙氧基乙醇1.6160乙烯基乙二醇6.2620甲酰胺2.2220(正)己烷2.9290甲醇30.030002-甲氧基乙醇0.550甲基丁酮0.550甲基环己烷11.81180二氯甲烷6.0600N-甲基吡咯啉5.3530硝基甲烷0.550吡啶2.0200四氢噻吩砜1.6160四氢呋喃7.27201,2,3,4-四氢化萘1.0100甲苯8.9890三氯乙烯0.880二甲苯*21.72170*通常含有9%邻二甲苯、60%间二甲苯、14%对二甲苯、17%乙苯。 表3：三类溶剂（GMP或其他质量要求限制使用，对人体低毒的溶剂）醋酸庚烷乙醇丙酮乙酸异丁酯醋酸乙酯苯甲醚醋酸异丙酯(二)乙醚1-丁醇乙酸甲酯甲酸乙酯2-丁醇3-甲基-1-丁醇甲酸醋酸丁酯甲基乙基（甲）酮1-戊醇叔丁基甲基乙醚甲基异丁基（甲）酮2-丙醇，异丙醇异丙基苯2-甲基-1-丙醇1-丙醇，（正）丙醇二甲基亚砜戊烷乙酸丙酯本版药典为了保障人们的用药安全，特做出以下规定：当生产商通过法规部门的批准，被授权允许使用不在本版USP药典清单上的溶剂或允许使用溶剂的残留量高于规定限度时，生产商有责任将相关信息（溶剂的鉴别方法，残留溶剂允许限度，采用的检测方法）报送给USP，USP会及时的在相应的各论中引入该事项，更新完善药典章程。另外，如果今后ICH有新的溶剂要求被检测溶剂残留，USP同样会将其更新加入溶剂列表中，并规定相关的限度要求。USP规定，残留溶剂的检查仅限于在主药、辅料、成品的生产和纯化过程所涉及到的已知的有机溶剂，不考虑其它。在检测过程中，生产商可能倾向于直接测试药品成品中的溶剂残留量，这里指出，生产商也可以通过加和药品中各成分的残留溶剂量来计算得到总的溶剂残留量，这两种方法都是可行的。针对第二种方法，累加计算得到的溶剂残留值若不高于规定的限定值，则无需进行药品成品的再测试；若高于规定的限定值，应再进行成品的残留溶剂检测，以确定是否降低某过程中使用的相关溶剂的量，使最终结果在可接受量范围内。如果一种残留溶剂在药品生产中出现，也应当进行检测。另外强调一点，药品生产过程中使用到的溶剂，必须进行残留溶剂项的检测。注：附件2为残留溶剂的相关背景资料。根据安全风险对残留溶剂进行分类TDI：表示“可耐受日摄入量”，是国际化学品安全规划署ICPS用于描述有毒化学物质残留限度的专用词。ADI：表示“可接受日摄入量”，是世界卫生组织WHO和其他国际健康权威机构对于残留限度的专用描述。PDE：表示“允许日接触量”，定义为残留溶剂的药效学可接受摄入量，应注意避免与ADI相混淆。本通则所涉及的残留溶剂依据其通用名和结构列于附录1，通过其对人类可能存在的风险进行评估，可以将其归入以下三类中的某一类：类别分类依据1类溶剂应避免使用的溶剂人体致癌物质以及强烈疑似人体致癌物质环境危害物质2类溶剂应限制使用的溶剂有非遗传毒性致癌（动物实验）、或可能导致其他不可逆毒性（如神经毒性或致畸性）、或可能具有其他严重的但可逆毒性的有机溶剂。3类溶剂GMP或其他质量规定要求限制使用的，对人体低毒的溶剂对人体或环境的危害较小（注：3类溶剂PDE上限约为50mg/天）*PDE上限50mg/天的3类溶剂，在残留溶剂检测项下“3类溶剂”专门章节中进行讨论残留溶剂限度PDE的确定方法有关残留溶剂限度PDE的确定方式在附件3中给出。对于指定为“仅用作兽药”的药品，应基于其实际剂量、目标种群、实验相关独立数据，并综合药物对人类的间接安全影响，制定残留溶剂限度值。当某生产商从权威监管机构获得较高限度溶剂残留的许可时，其有责任通知USP在此药品中该批准残留溶剂的限度和依据。之后，USP将会在具体的各论中涉及此主题。2类溶剂残留限度标准允许日接触量（permitted daily exposure，PDE）是指某一有机溶剂被允许摄入而不产生毒性的日平均最大剂量，PDE的单位为mg/天。在PDE的基础上，引入了浓度（ppm）的表示（表2中列出的限度即以ppm为单位表示）。当衡量2类溶剂的溶剂残留是否在限度要求内时，有以下两种方法衡量。衡量方法1：假设每日服用10克药物，溶剂浓度可用公式（1）来计算。浓度 (ppm) = (1000 g/mLPDE)/剂量 .公式（1）PDE单位 mg/天；剂量单位 g/天无论是原料药、辅料、制剂均可以采用这种方法来计算残留溶剂的浓度。因此，在服用剂量（g/天）不明确的情形下，这样浓度计算方法特别适用。如果原料药、辅料的残留溶剂量均在限度范围内，则药品生产过程中，这些成分可以以任意比例进行投料使用，产品的残留溶剂结果均符合要求。服药剂量不超过10克/天，只要组分中的残留溶剂量符合规定，则无需进一步的计算成品残留溶剂的限度值。服药剂量大于10克/天，则要进一步采用方法2的形式表达。衡量方法2：在某些原料、辅料或制剂的有机溶剂残留量不符合浓度限度时，可根据实际测定的各种有机溶剂残留量及用法用量计算实际日接触量，并与PDE值比较，如符合限量要求则也属可行。 表2所列的药物PDE（mg/天）为已知的最大日剂量，代入公式（1）即可测定药物制剂中允许的残留溶剂浓度。只要已经证实残留的溶剂已经被减少到可实现的最小量，这样的限度就被认为可以接受。此限度在分析精密度、生产能力、生产工艺中的合理差异等方面应该是现实的。这些限度可反映当代的生产标准。举例说明：例1：以药物制剂中乙腈浓度为例，乙腈允许日接触量（PDE）为4.1mg/天，可由衡量方式1得到限度标准为10004.110=410ppm如药物成品的最大处方量（日摄入量）为5.0g，且含2种辅助剂，成品的组成由表可知，则计算的残留乙腈最大浓度限度列于下表：组分组分的量（g）乙腈含量（ppm）每日接触量（mg）原料药0.38000.24辅助剂10.94000.36辅助剂23.88003.04成品药5.07283.64结论：辅助剂1符合衡量方法1的最大限度（410ppm），但是原料药、辅助剂2、成品药中的乙腈含量均超出了衡量方法1的最大限度，不能用衡量方法1。换用衡量方法2，成品药的每日接触量为3.64mg，小于PDE（4.1mg），因此该药品乙腈溶剂残留量符合本通则中要求，认为在限度范围内，可以接受。例2思考另外一个以乙腈作为残留溶剂的范例。某药物成品的最大处方量（日摄入量）为5.0克，且含2种辅助剂，成品的组成由表可知，则计算的残留乙腈最大浓度限度列于下表：组分组分的量（g）乙腈含量（ppm）每日接触量（mg）原料药0.38000.24辅助剂10.920001.80辅助剂23.88003.04成品药5.010165.08结论：所有组分均超出衡量方法1的最大限度（410ppm），不能用衡量方法1。换用衡量方法2，成品药的每日接触量为5.08mg，大于PDE（4.1mg），因此该药品乙腈溶剂残留量不符合本通则中要求，认为超出限度范围，溶剂残留不合格。这种情况下，生产商应对成品药进行检测，考察能否通过配方工艺的改变使成品药中的残留溶剂量减少到合格限度内。如果上述办法不可行，生产商则必须考虑通过其他步骤的调整来控制最终成品药中的残留溶剂量。当某生产商从权威监管机构获得较高限度溶剂残留的许可时，其有责任通知USP在此药品中该批准残留溶剂的限度和依据。之后，USP将会在具体的各论中涉及此主题。分析过程残留溶剂的定量检测方法的建立通常要基于色谱手段，特别是气相色谱法来完成。本通则在“残留溶剂鉴别、控制、定量”部分对残留溶剂的检测方法进行详细的描述。某些特定的情况下可能用到的其他检测方法在通则中有阐述（见“测试和定量分析 ”）。某些情况下也可能用非常规方法来进行检测，例如3类溶剂的残留溶剂定量可以用干燥失重法完成。残留溶剂的报告本通则要求药品生产商提供关于原料药、辅料、成品药中残留溶剂项信息，信息的提供方式可以选择以下样例之一的表达方式进行描述。l 可能存在的仅有3类溶剂。经干燥失重法检测，溶剂残留量低于0.5%，符合要求。l 仅可能存在2类溶剂X、Y。各溶剂残留量经过“衡量方法1”，均低于限度，符合要求。l 仅可能存在3类溶剂，以及2类溶剂X、Y。经检测，3类溶剂残留量低于0.5%，各2类溶剂残留量经过“衡量方法1”，均低于限度，符合要求。上述表达中，药物“可能存在”溶剂系针对在原辅料、成品药生产工艺的个步骤中涉及到的，但未能完全去除的有机溶剂。一旦可能存在1类溶剂，则必须在报告中提供其定性定量检测数据。如果2类“衡量方法1”超限，或3类溶剂残留量超过0.5%，则必须在报告中提供其定性定量检测数据。残留溶剂的限度环氧乙烷 注意: 仅在具体的各论中有明确的要求时，才进行环氧乙烷残留量的检测。 标准溶液的配制方法以及检测步骤在具体各论中会有叙述，这里不再详细说明。除非各论中另有规定，环氧乙烷的残留量不得高于10g/g。 1类溶剂（应避免使用）第一类溶剂是指人体致癌物、疑为人体致癌物或环境危害物的有机溶剂。因其具有不可接受的毒性或对环境造成公害，在原料药、辅料以及制剂生产中应该避免使用。如果工艺中不可避免的使用了第一类溶剂，则需要严格控制残留量（如表1）。当1类残留溶剂在原料药、辅料以及制剂生产中使用或生成并且没有被该工艺去除时，则要求必须定性定量。在本通则的“残留溶剂的鉴别、控制、定量 ”部分中会有详细的描述。表1：一类溶剂（应避免使用）溶剂浓度（ppm）备注苯2致癌四氯化碳4毒性和环境污染1,2-二氯乙烷5毒性1,1-二氯乙烯8毒性1,1,1-三氯乙烷1500环境污染 2类溶剂（应限制使用）第二类溶剂（见表2）是指有非遗传毒性致癌（动物实验）、或可能导致其他不可逆毒性（如神经毒性或致畸性）、或可能具有其他严重的但可逆毒性的有机溶剂。此类溶剂具有一定的毒性，但和第一类溶剂相比毒性较小，建议限制使用，允许日接触量（PDE）约为0.1mg/天，浓度约10ppm。注意：上述限定值不代表其分析的精密度。精密度另需在方法学验证过程中说明。如果2类溶剂“衡量方法1”超限，则要求必须提供其定性定量检测数据。在本通则的“残留溶剂的鉴别、控制、定量 ”部分中会有详细的描述。 注意: 不能按照本通则“残留溶剂的鉴别、控制、定量 ”的顶空进样法检测以下溶剂：甲酰胺、2-乙氧基乙醇、2-甲氧基乙醇、乙二醇、N-甲基吡咯烷酮、环丁砜。上述残留溶剂的检测应选用其他方法，并要求对选用方法进行方法学验证（方法步骤应符合USP中相关章节的要求）。另外提示一点：可以用USP混合物C-2类残留溶剂标准对照品混合物，进行替代研究。表2：二类溶剂（应限制使用）溶剂PDE（mg/天）浓度特殊检测要求乙腈4.1410顶空进样氯苯3.6360氯仿0.660环己胺38.838801，2二氯乙烯18.718701，2二甲氧乙烷1.0100N,N-二甲基乙酰胺10.91090N,N-二甲基甲酰胺8.88801，4二氧杂环乙烷3.83802乙氧基乙醇1.6160非顶空进样乙烯基乙二醇6.2620甲酰胺2.2220非顶空进样(正)己烷2.9290甲醇30.030002甲氧基乙醇0.550甲基丁酮0.550甲基环己烷11.81180二氯甲烷6.0600N甲基吡咯啉5.3530非顶空进样硝基甲烷0.550吡啶2.0200四氢噻吩砜1.6160非顶空进样四氢呋喃7.27201,2,3,4-四氢化萘1.0100甲苯8.9890三氯乙烯0.880二甲苯*21.72170*通常含有9%邻二甲苯、60%间二甲苯、14%对二甲苯、17%乙苯。 3类溶剂（低毒溶剂）3类残留溶剂（见表3）与1类和2类溶剂相比毒性较小，对人体毒性较低。但是，3类残留溶剂中的许多溶剂并未进行长期毒性或致癌能力研究。不过，目前尚没有针对3类残留溶剂进行长期毒性以及致癌性的研究。从仅有的短期研究资料表明，3类溶剂低毒，且基因毒性的研究结果阴性。除另有规定外，3类溶剂日摄入量不应超过50mg/天（相当于“衡量方法1”中5000ppm或0.5%），满足此条件则无需进行论证。如超过50mg/天，则必须对其进行定性定量，在本通则的“残留溶剂的鉴别、控制、定量 ”部分中会有详细的描述。表3：三类溶剂（GMP或其他质量要求限制使用，对人体低毒的溶剂）醋酸庚烷乙醇丙酮乙酸异丁酯醋酸乙酯苯甲醚醋酸异丙酯(二)乙醚1-丁醇乙酸甲酯甲酸乙酯2-丁醇3-甲基-1-丁醇甲酸醋酸丁酯甲基乙基（甲）酮1-戊醇叔丁基甲基乙醚甲基异丁基（甲）酮2-丙醇，异丙醇异丙基苯2-甲基-1-丙醇1-丙醇，（正）丙醇二甲基亚砜戊烷乙酸丙酯其他残留溶剂表4中列举的其他残留溶剂是指在药物的生产过程中可能会使用到，但目前尚无足够的毒理学资料的溶剂。对于这类溶剂，建议药物研发者根据生产工艺和溶剂的特点，必要时进行残留量的研究。 随着对这类溶剂毒理学等研究的逐步深入，将根据研究结果将对其进行进一步的归类。表4 其它残留溶剂（缺乏足够的毒物学方面的资料）1，1-二乙氧基丙烷甲基异丙基酮1，1-二甲氧基甲烷甲基四氢呋喃2，2-二甲氧基丙烷溶剂己烷异辛烷三氯醋酸异丙醚三氟醋酸以下内容选读：残留溶剂的鉴别、控制、定量残留溶剂的检测过程要求供试样品必须完全溶解，才允许进行测定，以保证残留溶剂被释放完全。若某些组分不能完全溶解，则需先将药品研磨成细粉，以保证残留溶剂释放完全，研磨操作要尽可能快的完成，以减少此过程导致的挥发性溶剂损失。注意：在下列规程中涉及到的水，应使用不含任何有机物的纯化水，以保证其在色谱分析时不产生明显的干扰峰。1类和2类残留溶剂如果物料中残留的溶剂信息未知，则要求按照下述规程进行残留溶剂的定性识别和定量分析。如果具体的残留溶剂信息已知，只需按“Procedure C”定量检测即可。具体的检测方式可见流程图1.流程图1：溶剂检测以及限度表达全流程样品液、对照液的准备Procedure A比较待测残留溶剂峰与相应的对照峰之间的峰面积大小对照的峰面积大Ok，结束尝试待测样品的峰面积大Procedure B比较待测残留溶剂峰与相应的对照峰之间的峰面积大小对照的峰面积大Ok，结束尝试待测样品的峰面积大Procedure C计算所测得的残留溶剂量样品是最终的产品吗？是不是结果是否是按照“衡量方法2”表示？不是错误结果是否用“衡量方法1”表示？是是Ok，结束尝试不是应在标签上以“衡量方法1”的形式标明残留溶剂的种类以及测定值水溶性组分Procedure A：1类溶剂对照储备液：取1.0ml的USP 1类残留溶剂混合标准品(RS)到100ml的容量瓶中，加入9ml的二甲基亚砜，用水稀释到刻度，混匀。取1.0ml该溶液到100ml的容量瓶中，用水稀释到刻度，混匀。再取1.0ml上述溶液到10ml的容量瓶中，加水稀释到刻度，混匀，即得到1类溶剂对照储备液。1类溶剂对照液：移取1.0ml的1类溶剂对照储备液到顶空瓶中，加5.0ml的水，加盖，密封，混匀。即得到1类溶剂对照液。2类溶剂对照储备液：取1.0ml的USP 2类残留溶剂混合标准品A(RS)到100ml的容量瓶中，加水稀释到刻度，混匀，得到2类残留溶剂对照储备液A。取1.0ml的USP2类残留溶剂混合标准品B(RS)到100ml的容量瓶中，加水稀释到刻度，混匀，得到2类残留溶剂对照储备液B。2类溶剂对照液A：移取1.0ml的2类溶剂对照储备液A到顶空瓶中，加5.0ml的水，加盖，密封，混匀。即得到2类溶剂对照液A。2类溶剂对照液B：移取5.0ml的2类溶剂对照储备液B到顶空瓶中，加1.0ml的水，加盖，密封，混匀。即得到2类溶剂对照液B。供试样品储备液：取约250mg的供试样品，准确称量，加入到25ml的容量瓶中，加水溶解并稀释到刻度，混匀。即得到供试样品储备液。供试样品液：取供试样品储备液5.0ml到顶空瓶中，加1.0ml的水，加盖，密封，混匀。即得到供试样品液。1类系统适用性溶液：取1.0ml的1类溶剂对照储备液到顶空瓶中，再加入5.0ml的供试样品储备液，加盖，密封，混匀。即得到1类系统适用性溶液。色谱系统：气相色谱-FID检测器0.32mm30m的炭化硅胶柱，膜厚1.8m G43 或0.53mm30m的广口柱，膜厚3m G43。载气：氮气或氢气，线速约35cm/秒分流比为1：5（分流比可适当调整，以保证最佳灵敏度）柱温：40保持20分钟，然后以10/min的速度升温至240，保持20分钟进样口140检测器250按照下述Procedure依次进样-1类溶剂对照液、1类系统适用性溶液、2类溶剂对照液A，记录峰响应值，规定：1类溶剂对照液色谱图1,1,1-三氯乙烷的信噪比不得小于5；1类系统适用性溶液色谱图中各峰的信噪比均不得小于3；2类溶剂对照液A色谱图中乙腈和二氯甲烷的分离度R值不得小于1.0。Procedure： 注：USP推荐使用尽可能高的线温度，以保证残留溶剂气化完全 使用表5的三种顶空程序之一，依次注入相同体积（约1.0ml）的1类溶剂对照液、2类溶剂对照液A、2类溶剂对照液B、供试样品液，记录色谱图，测定主峰的响应值。如果供试样品液色谱图中，任何峰的响应值（不包括1,1,1-三氯乙烷峰）大于等于对照液中（1类溶剂对照液、2类溶剂对照液A、2类溶剂对照液B其中之一）相应此峰的响应值，或者1,1,1-三氯乙烷的峰响应值大于或等于1类溶剂对照液中对应1,1,1-三氯乙烷峰响应值的150倍，上述两种情况需要继续进行Procedure B来进一步进行峰确认；否则以该方法（Procedure A）对该残留溶剂进行定性定量即可，并可判断其是否符合限度要求。表5：顶空操作参数的设置方法（选其一）顶空操作参数设置123平衡温度（）8010580平衡时间（min）604545传温线温度（）85110105载气适当压力的氮气或氢气加压时间（s）303030进样量（ml）111只要能保证检测的准确度与灵敏度，也可以使用仪器供应商的推荐参数设置Procedure B：1类溶剂对照储备液、1类溶剂对照液、2类溶剂对照储备液、2类溶剂对照液A、2类溶剂对照液B、供试样品储备液、供试样品液、1类系统适用性溶液的配制方法均与Procedure A的要求一致。色谱系统：气相色谱系统-FID检测器0.32mm30m的炭化硅胶柱，膜厚0.25m G16或0.53mm30m的广口柱，膜厚3m G16。载气：氮气或氢气，线速约为35cm/秒分流比为1：5（分流比可适当调整，以保证最佳灵敏度）柱温：50保持20分钟，然后以6/分钟的速度升温至165，保持20分钟进样口：140检测器：250。按照下述Procedure依次进样-1类溶剂对照液、1类系统适用性溶液，记录各图谱峰响应值。规定：1类溶剂对照液图谱中苯的信噪比不得小于5，1类系统适用性溶液图谱中的各峰的信噪比不得小于3，2类溶剂对照液A色谱图中乙腈和cis-二氯乙烯的分离度R值不小于1.0Procedure： 注：USP推荐使用尽可能高的线温度，以保证残留溶剂气化完全 使用表5的三种顶空程序之一，依次注入相同体积（约1.0ml）的1类溶剂对照液、2类溶剂对照液A、2类溶剂对照液B、供试样品液，记录色谱图，测定主峰的响应值。如果供试样品液色谱图中Procedure A过程认定的大于等于对照液的峰的响应值仍然大于等于对照液中对应峰响应值，则需要继续进行Procedure C对该残留溶剂进行定量；否则以该方法（Procedure B）对该残留溶剂进行定性定量即可，并可判断其是否符合限度要求。Procedure C：1类溶剂对照储备液、1类溶剂对照液、2类溶剂对照储备液、2类溶剂对照液A、2类溶剂对照液B、供试样品储备液、供试样品液、1类系统适用性溶液的配制方法均与Procedure A的要求一致。标准液：注意: 将procedure A, Procedure B确认的需定量的各个残留溶剂峰分别配制各自的标准溶液；对于除了1,1,1-三氯乙烷之外的其他1类溶剂，按照Procedure A中“1类溶剂对照储备液”项下对初级稀释液的规定，制备初级稀释液。取经过Procedure A，Procedure B确认的需定量的各个残留溶剂峰所对应USP标准对照品，准确量取一定体积，并转移至适当容器，以水定量稀释用水逐步定量稀释至已知浓度（表1，表2中的数值）1/20的溶液。取1.0ml该溶液转移至顶空瓶中，加入5.0ml的水，加盖，密封，混匀。即得到标准液。示踪液：注意: 将procedure A, Procedure B确认的需定量的各个残留溶剂峰分别配制各自的标准溶液。移取5.0mL供试样品储备液至顶空瓶中，加入1.0mL标准液，加盖，密封，混匀。即得到系列示踪液。 色谱系统： 注：如果Procedure A所得的结果低于Procedure B结果，则此项也可用Procedure B 气相色谱-FID检测器0.32mm30m的炭化硅胶柱，膜厚1.8m G43或0.53mm30m的广口柱，膜厚3.0m G43。载气：氮气或氢气，线速约为35cm/秒分流比为1：5（分流比可适当调整，以保证最佳灵敏度）柱温：40保持20分钟，然后以10/分钟的速度升温至240，保持20分钟进样口：140检测器：250按照下述Procedure依次进样-1类溶剂对照液、1类系统适用性溶液、2类溶剂对照液A，记录峰响应值，规定：在1类溶剂对照液中1,1,1-三氯乙烷的信噪比不少于5；在1类系统适用性溶液中各峰的信噪比均不少于3；在2类溶剂对照液A中，乙腈和二氯甲烷的分离度R值不得小于1.0。Procedure： 注：USP推荐使用尽可能高的线温度，以保证残留溶剂气化完全 使用表5的三种顶空程序之一，依次注入相同体积（约1.0ml）的标准液、供试样品液与示踪液，记录色谱图，测定主峰的响应值。各残留溶剂的量可按下面公式计算得到，单位为ppm：5 (C/W) rU / (rSTrU) 式中:C表示标准液中USP标准品的浓度，单位ppm；W表示供试样品储备液所用样品的量，单位g；rU和rST分别表示供试样品液和示踪液中残留溶剂的峰响应值。非水溶性组分Procedure A：注：二甲基亚砜可以作为二甲基甲酰胺的替代溶剂。1类溶剂对照储备液：取1.0ml的USP 1类残留溶剂混合标准品(RS)到100ml的容量瓶中（容量瓶事先装有80ml二甲基甲酰胺），用二甲基甲酰胺定容，混匀。取1.0ml该溶液到100ml的容量瓶中（容量瓶事先装有80ml二甲基甲酰胺），用二甲基甲酰胺定容，混匀（保留一部分此溶液，用于1类系统适用性溶液的配制）。再取1.0ml上述溶液到10ml的容量瓶中，用二甲基甲酰胺定容，混匀，即得到1类溶剂对照储备液。1类溶剂对照液：移取1.0ml的1类溶剂对照储备液到顶空瓶中，加5.0ml的水，加盖，密封，混匀。即得到1类溶剂对照液。2类溶剂对照储备液：取1.0ml的USP 2类残留溶剂混合标准品A(RS)到100ml的容量瓶中（容量瓶事先装有80ml二甲基甲酰胺），用二甲基甲酰胺定容，混匀，得到2类残留溶剂对照储备液A。取0.5ml的USP2类残留溶剂混合标准品B(RS)到100ml的容量瓶中（容量瓶事先装有80ml二甲基甲酰胺），用二甲基甲酰胺定容，混匀，得到2类残留溶剂对照储备液B。2类溶剂对照液A：移取1.0ml的2类溶剂对照储备液A到顶空瓶中，加5.0ml的水，加盖，密封，混匀。即得到2类溶剂对照液A。2类溶剂对照液B：移取1.0ml的2类溶剂对照储备液B到顶空瓶中，加5.0ml的水，加盖，密封，混匀。即得到2类溶剂对照液B。供试样品储备液：取约500mg的供试样品，准确称量，加入到10ml的容量瓶中，加二甲基甲酰胺溶解并稀释到刻度，混匀。即得到供试样品储备液。供试样品液：取供试样品储备液1.0ml到顶空瓶中，加5.0ml的水，加盖，密封，混匀。即得到供试样品液。1类系统适用性溶液：取5.0ml的供试样品储备液、0.5ml 1类溶剂对照储备液配制过程中预留的直接稀释液，将二者混匀，之后精确移取1ml于顶空瓶中，再加入5.0ml的水，加盖，密封，混匀。即得到1类系统适用性溶液。色谱系统：气相色谱-FID检测器0.53mm30m的广口柱，膜厚3m G43。载气：氦气，线速约35cm/秒分流比为1：3（分流比可适当调整，以保证最佳灵敏度）柱温：40保持20分钟，然后以10/min的速度升温至240，保持20分钟进样口140检测器250按照下述Procedure依次进样-1类溶剂对照液、1类系统适用性溶液、2类溶剂对照液A，记录峰响应值，规定：1类溶剂对照液色谱图1,1,1-三氯乙烷的信噪比不得小于5；1类系统适用性溶液色谱图中各峰的信噪比均不得小于3；2类溶剂对照液A色谱图中乙腈和二氯甲烷的分离度R值不得小于1.0。Procedure： 注：USP推荐使用尽可能高的线温度，以保证残留溶剂气化完全 使用表5的顶空程序3（顶空操作在10psi，即10磅/平方英寸的压力条件下进行），依次注入相同体积（约1.0ml）的1类溶剂对照液、2类溶剂对照液A、2类溶剂对照液B、供试样品液，记录色谱图，测定主峰的响应值。如果供试样品液色谱图中，任何峰的响应值（不包括1,1,1-三氯乙烷峰）大于等于对照液中（1类溶剂对照液、2类溶剂对照液A、2类溶剂对照液B其中之一）相应此峰的响应值，或者1,1,1-三氯乙烷的峰响应值大于或等于1类溶剂对照液中对应1,1,1-三氯乙烷峰响应值的150倍，上述两种情况需要继续进行Procedure B来进一步进行峰确认；否则以该方法（Procedure A）对该残留溶剂进行定性定量即可，并可判断其是否符合限度要求。Procedure B：1类溶剂对照储备液、1类溶剂对照液、2类溶剂对照储备液、2类溶剂对照液A、2类溶剂对照液B、供试样品储备液、供试样品液、1类系统适用性溶液的配制方法均与Procedure A的要求一致。色谱系统：按水溶性物质的Procedure B项下的色谱系统设置。分流比为1：3（分流比可适当调整，以保证最佳灵敏度）Procedure： 注：USP推荐使用尽可能高的线温度，以保证残留溶剂气化完全 使用表5的顶空程序3（顶空操作在10psi，即10磅/平方英寸的压力条件下进行），依次注入相同体积（约1.0ml）的1类溶剂对照液、2类溶剂对照液A、2类溶剂对照液B、供试样品液，记录色谱图，测定主峰的响应值。如果供试样品液色谱图中Procedure A过程认定的大于等于对照液的峰的响应值仍然大于等于对照液中对应峰响应值，则需要继续进行Procedure C对该残留溶剂进行定量；否则以该方法（Procedure B）对该残留溶剂进行定性定量即可，并可判断其是否符合限度要求。Procedure C：1类溶剂对照储备液、1类溶剂对照液、2类溶剂对照储备液、2类溶剂对照液A、2类溶剂对照液B、1类系统适用性溶液的配制方法均与Procedure A的要求一致。标准储备液：注意: 将procedure A, Procedure B确认的需定量的各个残留溶剂峰分别配制各自的标准溶液取经过Procedure A，Procedure B确认的需定量的各个残留溶剂峰所对应USP标准对照品，准确量取一定体积，并转移至适当容器，以水定量稀释用水逐步定量稀释至已知浓度（表1，表2中浓度限度数值）1/20的溶液。标准液：取1.0ml标准储备液至顶空瓶中，加入5.0ml的水，加盖，密封，混匀。即得到标准液。供试样品储备液：与Procedure A 相同。供试样品液：取1.0ml供试样品储备液至顶空瓶中，加入5.0ml的水，加盖，密封，混匀。即得到供试样品液示踪液：注意: 将procedure A, Procedure B确认的需定量的各个残留溶剂峰分别配制各自的标准溶液。移取1.0mL供试样品储备液至顶空瓶中，加入1.0mL标准储备液，再加入4ml水，加盖，密封，混匀。即得到系列示踪液。 色谱系统：按水溶性物质的Procedure C项下的色谱系统设置。Procedure： 注：USP推荐使用尽可能高的线温度，以保证残留溶剂气化完全 使用表5的三种顶空程序之一，依次注入相同体积（约1.0ml）的标准液、供试样品液与示踪液，记录色谱图，测定主峰的响应值。各残留溶剂的量可按下面公式计算得到，单位为ppm：10 (C/W) rU / (rSTrU) 式中:C表示标准液中USP标准品的浓度，单位ppm；W表示供试样品储备液所用样品的量，单位g；rU和rST分别表示供试样品液和示踪液中残留溶剂的峰响应值。附注：根据USP ” Reagents, Indicators, and Solutions ” 部分 ”Chromatographic Reagents” 项下的清单，本通则涉及到的色谱柱内壁涂料G16和G43分别为： G16-聚乙二醇（平均分子量15,000左右）。G43- 6%氰丙基苯基-94%二甲聚硅氧烷（%为摩尔比）3类残留溶剂如果有3类溶剂存在，可以针对该溶剂建立的相应的合适的检测方法，当供试样品的各论中含有干燥失重检查项时也可以按照“干燥失重”项下的规定来进行。当有以下两种情况之一存在，则必须对残留溶剂进行定性定量检测：1）供试样品的各论中没有干燥失重检查项；2）某各论中指明该3类溶剂的限度大于50mg/天（衡量标准1中对应于5000ppm或0.5%）。3类溶剂的检测方法应该尽量按照之前详细叙述的1、2类溶剂检测方法来进行，只需将USP标准品的类型更换一下即可；或者也可以使用经验证说明其合理的其他方法来完成。注：在残留溶剂的检测过程中，应尽量使用USP标准对照品。关于残留溶剂限度检查的方法的流程，见流程图1。其他分析方法个别品种项的残留溶剂检测采用了以下的操作方法，这些方法对之前的Procedure做出了一些必要的改动。Method IMethod I采用气相色谱-FID检测器，程序升温设置，并配备大孔涂壁开管色谱柱。标准液：用各品种项下指定的溶剂配制标准液，若无特殊规定则以水为溶剂（不含任何有机物的纯化水），每ml的标准液按以下组成配制：二氯甲烷12.0ug，1,4-二氧六环7.6ug ，三氯乙烯1.6ug ，三氯甲烷1.2ug。 注：现用现配，当天使用。供试样品液：用各品种项下指定的溶剂配制标准液，若无特殊规定则以水为溶剂（不含任何有机物的纯化水），精确称量待测样品适量，配制浓度20mg/ml的供试样品液。色谱系统：气相色谱-FID检测器色谱柱：0.53mm30m熔融硅胶分析柱，膜厚5m G27保护柱：0.53mm5mm经苯基甲基硅氧烷灭活的硅胶保护柱，载气：氦气，线速约35cm/秒（氦气首选，也可用氮气）柱温：35保持5分钟，然后以8/分钟的速度升温至175，再以35/分钟的速度升温至260保持至少16分钟；进样口：70检测器：260标准液按照下述Procedure进样，记录峰响应值，规定：色谱系统应能使标准液中所有组份全部分开，任何两个组份间的分离度R值不低于1.0，重复进样各峰响应值的相对标准偏差不超过15%。Procedure：依次注入相同体积（约1.0ml）的标准液、供试样品液，记录色谱图，测定峰响应值。依据标准液各组分出峰的保留时间，可以确认供试样品液的各色谱峰。理论依据：1）可能的残留溶剂种类可见下表，依据各自性质差异可以确定色谱峰所对应的组分。2）未知挥发物可能以共出峰形式对定量结果造成影响，可以用MS手段避免。3）保护柱的使用，大大减少了杂质干扰的可能。因此，认为这种定性定量方法是准确可行的。除另有规定外，样品溶剂残留不得超过下表中规定限度值：残留类型限度 (g/g)氯仿601,4-二氧六环380二氯甲烷600三氯乙烯80Method IV标准液：配制方法与Method I相同，之后移取配好的上述试液5.0mL于已装有1g无水硫酸钠的进样瓶中，加盖，密封，80加热60min。供试样品液：用各品种项下指定的溶剂配制标准液，若无特殊规定则以水为溶剂（不含任何有机物的纯化水），精确称量100mg待测样品于进样瓶中，加入5ml溶剂以及1g无水硫酸钠，加盖，密封，80加热60min（或按各品种规定进行）。色谱系统及操作Procedure： 注：可以使用顶空自动进样系统；另外，此方法无需使用保护柱。操作方法与Method V相同，但进样时要使用气密性好的加热过的注射器进样，进样体积1ml。Method V 标准液，供试样品液：配制方法与Method I相同。色谱系统：气相色谱-FID检测器色谱柱：0.53mm30m熔融硅胶分析柱，膜厚3m G43保护柱：0.53mm5mm经苯基甲基硅氧烷灭活的硅胶保护柱，载气：氦气，线速约35cm/秒柱温：40保持20分钟，然后迅速升温至240，保持至少20分钟；进样口：140检测器：260标准液按照下述Procedure进样，记录峰响应值，规定：色谱系统应能使标准液中所有组份全部分开，任何两个组份间的分离度R值不低于3.0，重复进样各峰响应值的相对标准偏差不超过15%。Procedure：与Method I相同，进样体积调整为1.0 l。Method VI 标准液，供试样品液：配制方法与Method I相同。色谱系统：气相色谱-FID检测器色谱柱型号与柱温按表6的要求设置表6 Method VI 色谱条件USP 色谱柱色谱柱型号柱温设置AS33mm 2m190BS23mm 2.1m160CG160.53mm 30m40DG393mm 2m65EG163mm 2m70FS42mm 2.5m120（35 min），升温至200（2/min）保持20 min.HG142mm 2.5m45（3 min.），升温至120 （8/min）保持15 min.IG270.53mm 30m35（5 min），升温至175（8/min）再升至260（35/min）保持16 min.JG160.33mm 30m 50（20 min），升温至165（6/min）保持20 min.标准液按照下述Procedure进样，记录峰响应值，规定：色谱系统应能使标准液中所有组份全部分开，任何两个组份间的分离度R值不低于1.0，重复进样各峰响应值的相对标准偏差不超过15%。Procedure：与Method I相同，进样体积调整为1.0 l。附件1：本通则所涉及的残留溶剂溶剂别名化学结构式级别醋酸乙酸CH3COOH3类丙酮2-丙酮，丙醛-2-酮CH3COCH33类乙腈CH3CN2类苯甲醚甲氧基苯3类苯安息油1类1-丁醇正丁醇,丁基-1-醇CH3(CH2)3OH3类2-丁醇2-丁基醇,丁基-2-醇CH3CH2CH(OH)CH33类醋酸丁酯醋酸丁基醚CH3COO(CH2)3CH33类叔丁基甲基醚2-甲氧基-2-甲基丙烷(CH3)3COCH33类四氯化碳四氯甲烷CCl41类氯苯2类氯仿三氯甲烷CHCl32类枯烯异丙基苯,(1-甲基乙基)苯3类环己烷2类1,2-二氯乙烷均二氯乙烷CH2ClCH2Cl1类1,1-二氯乙烷1,1-二氯乙烯H2C=CCl21类1,2-二氯乙烷1,2-二氯乙烯ClHC=CHCl2类1,2-二甲氧基乙烷二甲基溶纤剂H3COCH2CH2OCH32类N,N-二甲基乙酰胺DMACH3CON(CH3)22类N,N-二甲基甲酰胺DMFHCON(CH3)22类二甲亚砜DMSO(CH3)2SO3类1,4-二氧杂环己烷2类乙醇CH3CH2OH3类2-乙氧基乙醇溶纤剂CH3CH2OCH2CH2OH2类醋酸乙酯CH3COOCH2CH33类乙二醇1,2-二羟基乙烷HOCH2CH2OH2类乙醚二乙基醚CH3CH2OCH2CH33类甲酸乙酯HCOOCH2CH33类甲酰胺HCONH22类甲酸HCOOH3类庚烷正庚烷CH3(CH2)5CH33类己烷正己烷CH3(CH2)4CH32类醋酸异丁酯CH3COOCH2CH(CH3)23类醋酸异丙酯CH3COOCH(CH3)23类甲醇CH3OH2类2-甲氧基乙醇甲基溶纤剂CH3OCH2CH2OH2类醋酸甲酯CH3COOCH33类3-甲基-1-丁醇异戊基醇(CH3)2CHCH2CH2OH3类甲基丁基(甲)酮2-己酮CH3(CH2)3COCH32类甲基环己烷2类二氯甲烷CH2Cl22类甲基乙基(甲)酮2-丁酮CH3CH2COCH33类甲基异丁基(甲)酮MIBKCH3COCH2CH(CH3)23类2-甲基-1-丙