常用染液的配制.doc

附录I 染色液的配制一、吕氏(Loeffler)碱性美蓝染液 (实验6，53)A液：美蓝(methylene blue) 06g95%酒精 30mlB液：KOH 001g蒸馏水 100ml分别配制A液和B液，配好后混合即可。二、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液 (实验6)A液：碱性复红(basic fuchsin) 03g95%酒精 10mlB液：石炭酸 50g蒸馏水 95ml将碱性复红在研钵中研磨后，逐渐加入95%酒精，继续研磨使其溶解，配成A液。将石炭酸溶解于水中，配成B液。混合A液及B液即成。通常可将此混合液稀释510倍使用，稀释液易变质失效，一次不宜多配。三、革兰氏(Gram)染色液 (实验7)1草酸铵结晶紫染液A液：结晶紫(crystal violet) 2g95%酒精 20mlB液：草酸铵(ammonium oxalate) 08g蒸馏水 80ml混合A、B二液，静置48小时后使用。2卢戈氏(Lugol)碘液碘片 10g碘化钾 20g蒸馏水 300ml先将碘化钾溶解在少量水中，再将碘片溶解在碘化钾溶液中，待碘全溶后，加足水分即成。395%的酒精溶液。4番红复染液番红(safranine O) 25g95%酒精 100ml取上述配好的番红酒精溶液10ml与80ml蒸馏水混匀即成。四、芽孢染色液 (实验8)1孔雀绿染液孔雀绿(malachite green) 5g蒸馏水 100ml2番红水溶液番红 05g蒸馏水 100ml3苯酚品红溶液碱性品红 11g无水酒精 100ml制法取上述溶液10ml与100ml5%的苯酚溶液混合，过滤备用。4黑色素(nigrosin)溶液水溶性黑色素 10g蒸馏水 100ml称取10g黑色素溶于100ml蒸馏水中，置沸水浴中30分钟后，滤纸过滤二次，补加水到100ml，加05ml甲醛，备用。五、荚膜染色液 (实验9)1黑色素水溶液黑色素 5g蒸馏水 100ml福尔马林(40%甲醛) 05ml将黑色素在蒸馏水中煮沸5分钟，然后加入福尔马林作防腐剂。2番红染液与革兰氏染液中番红复染液相同。六、鞭毛染色液 (实验10)A液：单宁酸 5gFeCl3 15g蒸馏水 100ml福尔马林(15%) 20mlNaOH(1%) 10ml配好后，当日使用，次日效果差，第三日则不宜使用。B液：AgNO3 2g蒸馏水 100ml待AgNO3溶解后，取出10ml备用，向其余的90mlAgNO3中滴入浓NH4ON，使之成为很浓厚的悬浮液，再继续滴加NH4OH，直到新形成的沉淀又重新刚刚溶解为止。再将备用的10mlAgNO3慢慢滴入，则出现薄雾，但轻轻摇动后，薄雾状沉淀又消失，再滴入AgNO3，直到摇动后仍呈现轻微而稳定的薄雾状沉淀为止。如所呈雾不重，此染剂可使用一周，如雾重，则银盐沉淀出，不宜使用。七、富尔根氏核染色液 (实验11)1席夫氏(Schiff)试剂将1g碱性复红加入200ml煮沸的蒸馏水中，振荡5分钟，冷至50左右过滤，再加入1mol/LHC120ml，摇匀。待冷至25时，加Na2S2O5(偏重亚硫酸钠)3g，摇匀后装在棕色瓶中，用黑纸包好，放置暗处过夜，此时试剂应为淡黄色(如为粉红色则不能用)，再加中性活性炭过滤，滤液振荡1分钟后，再过滤，将此滤液置冷暗处备用(注意：过滤需在避光条件下进行)。在整个操作过程中所用的一切器皿都需十分洁净、干燥，以消除还原性物质。2Schandium固定液A液：饱和升汞水溶液50ml升汞水溶液加95%酒精25ml混合即得。B液：冰醋酸取A液9毫升+B液1毫升，混匀后加热至60。3亚硫酸水溶液10%偏重亚硫酸钠水溶液5ml，1mol/LHCl5ml，加蒸馏水100ml混合即得。八、Bouin氏固定液 (实验12)苦味酸饱和水溶液 75ml福尔马林(40%甲醛) 25ml冰醋酸 5ml1g苦味酸可制成75ml饱和水溶液。先将苦味酸溶解成水溶液，然后再加入福尔马林和冰醋酸摇匀即成。九、乳酸石炭酸棉蓝染色液 (实验16)石炭酸 10g乳酸(比重121) 10ml甘油 20ml蒸馏水 10ml棉蓝(cottonblue) 002g将石炭酸加在蒸馏水中加热溶解，然后加入乳酸和甘油，最后加入棉蓝，使其溶解即成。十、瑞氏(Wright)染色液 (实验53)瑞氏染料粉末 03g甘油 3ml甲醇 97ml将染料粉末置于干燥的乳缽内研磨，先加甘油，后加甲醇，放玻璃瓶中过夜，过滤即可。十一、美蓝(Levowitz-Weber)染液 (实验62)在52ml95%酒精和44ml四氯乙烷的三角烧瓶中，慢慢加入06g氯化美蓝(met h