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实验13 离体叶绿体对染料的还原作用一、 目的了解希尔反应。二、仪器及药品分光光度计、烧杯、试管、移液管、容量瓶0.1mol/L磷酸缓冲液、pH7.30.3mmol/L 2.6一二氯酚吲哚酚钠：称取0.0087g二氯酚吲哚酚钠定容至100ml。三、原理分离的叶绿体能使染料2.6一二氯酚吲哚酚进行需光还原作用，使染料从蓝色变为无色，这些变化在23分钟内呈线性关系。 2H+（H2O光解过程) 氧化型2.6一二氯酚吲哚酚 还原型2.6一二氯酚吲哚酚 (蓝色) (无色)四、方法步骤（1） 加样，取干净试管3支，按下表加入样品及其它试剂。管号0.1mol/L磷酸缓冲液叶绿体悬液（ml）煮沸（分钟）0.3mol/L二氯酚吲哚酚19.4ml0.1ml0.5ml29.4ml0.1ml50.5ml39.4ml0.1ml注意：（A）叶绿体悬液为前一实验所制备 （B）2号管加叶绿体悬液后于沸水浴上煮5分钟。（C）3号管内调零点作对照（D）各试管都在最后加入二氯酚吲哚酚，且加入后立即摇匀此色。（2）比色。将上面的各试管液分别倒入比色杯中，立即在721分光光度计（波长620nm下）进行测定，读出光密度，然后将比色杯取出放在光下照光，约30秒钟，再测定光密度（以上设定步骤可进行34次）。五、实验报告 作出叶绿体对染料的还原作用的曲线图。六、思考题
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