禽病诊断及养殖经验.doc

商品鸡蛋的常规洗涤和消毒方法是用温执的去污液洗涤，其温度（43.051.8）始终高于进入洗涤机鸡蛋的温度（至少要高出16.6，但不能超过54），然后氯化合物、季胺产品或其他卫生剂对蛋壳进行消毒。此法用在孵化用的种蛋，已获成功。但由于使用了脏水，特别是在徨洗涤机里，成千上万的种蛋不仅没有起到卫生作用，却造成了污染，结果发生了些真正的灾难。即使种蛋得到了合适的洗涤，大脏的种蛋首先应当用砂子干洗，以防止洗涤液和器具带来过多污染。洗涤水的铁含量如起过5ppm，就会有利于某些类型细菌的生长繁殖，对种蛋造成严重腐败的问题。Scott和Swetnam43写了一篇有关蛋消毒剂的详细综述。如果要进行种蛋洗涤，应当只用一种类型的机器（即刷子传送式，利用流通洗涤水原理），它能保证鸡蛋不受脏的洗涤水或漂洗水的污染。还需要认真监督，使所有器具始终能够正确运转，并且每天都要进行清洁。有些类型的机器，如等待系统失效，少数污染了的种蛋会把水污染，并且能在故障被发现和纠正之前，进而使其他成千上万的种蛋遭到污染。污染种蛋在孵化器里会引起种蛋爆裂的链锁反应，污染周围的种蛋，造成更多的“爆炸物”（蛋）和更为严重的污染。虽然孵化用种蛋的洗涤和液体消毒能圆满地完成，但操作比较困难，如对可能发生的危险没有充分认识，就不应把它作为一种常规的方法来进行。无论什么时候，若把冷蛋移至一个温暖、潮湿的环境中，水分总会凝聚在冷的蛋壳上（称此为“出汗”）。这种温气为早已存在于脏而未消毒的蛋壳上的细菌和真菌或源于蛋周围温暖的污染空气的细菌和真菌提供了一种生第繁殖的培养基。因此，在将冷蛋置于孵化器之前，应将其在洁低湿度空气的环境中温热至室温。 贮存条件 孵化用蛋经过熏蒸或其他蛋壳消毒处理后，在装蛋以前经常都保存在孵化厂的冷室里（室温约10）。冷室必须保持干净，没有细菌和真菌，并定期消毒，以防止蛋壳的再污染。临诊资料表明，幼雏的感染有时通过跟踪，可发现其来源是霉菌污染了的孵化用蛋。曾用霉菌饱子人工污染蛋壳，造成了这种感染53。在控制沙门氏菌中，有关蛋的处理方法的其他论述，请参阅第3章。 对疾病暴发的处置 观察健康禽 养禽能手应当经常不断地观察饲料和饮水的用量和产蛋情况，但更重要的是，要注意鸡群的正常声音和动作。每当一种情况出现异常，他们就能立即观察到，并加以判断，作为健康失常的迹象。如果出现这种情况，应当首先认为已经来了一种传染病，并且在调查过程中，这种病可能已经传到了其他地方。在现代工厂化养禽场及其产品的加工厂里，造成经济运转的严重脱节。严重的传染病甚至还能造成浩劫。一旦怀疑发生了疾病，就必须休取下列步聚。 寻找非传染性的条件 虽然要谨慎细致地追寻可能存在的传染病，但应当立即检查管理上的错误。在要求进行实验室诊断的所谓疾病问题中，很大一部分是同管理有关的非传染性问题：断喙错误，摄入了垫料和废料，饲料和饮水断绝，幼雏受寒，粗暴抓取，自动化器具或药物注射造成的伤害，停电，互相喙啄，窒息，过度拥挤，喂料器、饮水器和通风装置安排不善，便宜的饲料成份质量低劣，饲料里有引起拒食的成分，饲料原料颗粒大小不合适以及啮齿类和掠食兽的袭击19。Zander曾见到一个无病原鸡群，由于机械性喂料器发生故障48h，产蛋量严重下降55。Bell8也见到蛋鸡缺水而明显减产，这是因为断喙系统出了毛病，下喙留行过长，当水槽时水面过低便不易取行饮水。这些情况都不需要求助于诊断实验室。对于外寄生虫（螨、虱、蜱等）只要养鸡生产者亲自检查一些病鸡，就可确定。 隔离检疫禽群 一旦未能找到管理上的因素，下一步就是要根据养禽场的设计和规划，把禽舍、建筑、分场或整个养禽场隔离起来。如在设计和规划养禽场之初就考虑到会有这种应仇情况，那么，隔离便是一个小问题。如在养禽场最初设计规划中，没有考虑到“单一年龄组置于可隔离单元中”这一基本原则，那么，一种疾病的暴发可造成经济灾难。病禽群必须有它们自己的看护人员，或者至少应当最后才去看病禽。交检验品或召请兽医师业主或管理人员必须向诊断实验室提交典型样品，或是召请兽医师到现场作出诊断。业主应取得专业人员的诊断，而不是害怕公众可能提出指控而试图掩盖某种疾病。兽医师和管理人员能够并且也应当通过保持高度的道德标准和防止同另一个业主讲座某个业主的问题，帮助排除这一疑虑。但是，所有的业主迟早会知晓这一问题。管理人员应经常检查鸡群，为实验室选择样品，在兽医师召来前采取急救措施。人们为此项工作而进入禽舍时，必须穿着保护性鞋和衣服。在去实验室的路上不应进入其他养禽场。诊断尽快做出诊断是一件非常重要的事。采取行动的进程决定于病症的性质。业主面临疾病的威胁时，绝不能以任何原因而拖延。否则，甚至在做出诊断之前，就会感到无法收拾。对于一种疾病的危害，并不一定总能进行治疗和控制，但重要的是应当对发生着的任何一种和所有的疾病做出诊断，以便为今后采取有效措施。作为一个兽医师，还必须认识到此时的业主的经济困境，应在已有资料证据或可能做出判断时，即刻提出建议和帮助。特殊预防措施有些病症（鸟疫、丹毒和真菌）除了能在家禽引起感染外，对人类特别有害。如疑有或已诊断有这些病，就必须采取特殊预防措施，以免人类感染。如发现有鸟疫，必须报告有送政府卫生当局，所有工作人员均应对该病可能带来的危害以及必要预防措施有所知晓。在一些州，某些疾病（沙门氏菌病、鸟疫、喉气管炎）一经发现，就必须立即向州动物疾病控制当局报告，以便进行合理调查并采取相应行动，以保护人类和家禽产业。常识告述我们，如遇有速发性的嗜内脏新城疫、禽狎寒或禽流感等外来病的问题，应立即向有关法规当局报告。护理 不论禽群里只有几百只还是成千上万只禽，护理对于疾病的结局是会发挥重要作用的。对于那些因发病而开始挤成一堆的幼雏，应提高室温，使其能就近取得新鲜而清洁（或加药）的饮水。患病期还有必要在附近增设一些临时饮水器。如水源按正常情况设置。鸡必须跳到台阶上或是火鸡必须通过炽热的阳光才能达到，此时病禽就没有气力或主动性去寻找饮水，它们会很快脱水构成走向死亡的第一步。火鸡的运动场必须排水良好，因为它们容易从最近的水潭饮水，而这些地方可能已经全部污染。这一原则也适用于饲料，如果管理人员能走进禽搅到饲料和开动送料斗或是添加少量新鲜饲料，一般都会促使病禽采食。有时在饲料和饮水里加一点糖蜜（1pt/gal），便可增加饲料消耗。有些抗生素加进饲料后似乎也可促进饲料消耗，但凡是添加的东西不合家禽口味的，应立即去掉。有时病禽的精神非常沉郁，处于垂死状态，管理人员应在它们之中经常走动，惊醒它们，以便进食或饮水。康复无望的病禽和残禽必须采取不可溅出血液或渗出液的方式加以扑杀（见“诊断程序”一节）。死的和扑杀的家禽应当随时处理掉（见“死禽处理”部分）。药物只有在获得诊断结果或请教兽医师以后，方可投药。若用错了药，将是无益的金钱浪费；或者还会有害，甚至造成灾难。如发现传染病并要选用矫正性的药物，应按照说明书非常谨慎地应用。用药的禽群要上市时，必须在停药后一定的时间（取决于所用药物），以便使残留药物在屠宰前从组织消散干净。如果禽群在治疗期间正在产食用蛋，必须采用允许用于蛋鸡群的药物；或者反治疗期间和治疗后一定时期内生产的蛋全部废弃这是一种昂贵的代替方法。禽群在产蛋时如发生感染，就有把传染因子从母禽传给后代的危险（如沙门氏菌病、支原体病、禽脑脊髓炎）。在危险过后，蛋才可用作孵化。还应当记信治疗种禽所用药物在受精蛋的残留，有时可引起一些胚胎畸形。禽群的处理如果搬迁作为治疗的一部分，可将病禽群迁到一个更为合适的环境中。否则，只有等康复后才可搬迁或处理病禽群。治疗如已完成，禽群看来已完全健康，便可进入市场或按管理计划移到永久区。这样会留下一些貌似健康的带菌（毒）者。如禽群移至另一个清了群的养禽场，要不是偶尔由于抓取和搬迁造成的应激引起疾病发作，一般不会带来什么问题。康复的禽群如移至多年龄组的养禽场，带菌（毒）者就会把疾病引进早已在那里的有易感性的禽群。如康复的禽群早命就在饲养多年龄组家禽的地方，新进禽群就有可能受到感染而罹患疾病这是一种常见的情况，特别是呼吸道病和以垫料为媒介的疾病。诊断程序 有许多令人满意的诊断和尸体剖检方法，所用技术和器械会随病理学家的不同而迥然有异，这里介绍几种可供学生和新手参考的建议性方法。尸体剖检的目的是通过检查组织和器官，以确定生产性能不良、症状或死亡的原因，并从尸体取得最好的标本以便进行微生物学、血清学、病理组织学或动物接种等试验。重要的是，在此过程中，不要让有传染性的物质危害人类、家畜或其他禽类的健康。只要顺序进行，有些线索就不易被忽视，组织也不会在检查前遭到污染。一定要记住，一份血液或组织样品，以后如果证明是多余的，就可以丢弃。最好是先将采取的组织放置起来，在今后若确定它们对诊断不太紧要或不重要时，则可将其丢弃。出色的禽病诊断，其秘诀应于掌握“既要看到树木，又要看到森林”的艺术。要一味地关注个别禽的没有代表性的症候，注意整个诊断过程所呈现的能说明问题的病理模式。病例 尚未亲临养禽场，未见禽群的病理学家，欲在此时对疾病问题作出诊断，并试图提出合理的措施，那他就处在了不利的地位。这可通过取得完整的病史，以及了解有关蔚致暴发的各种事态，而部分地加以克服。病理学家了解病史和环境方面的情况愈多，就愈能更加直接地解决这个问题。遗憾的是，这种病史只包括那些管理人员、业主、服务人员或邻居观察和记忆的情况、事态和症状，对于管理方面各种因素的了解，如通风、饲喂和饮水系统、产蛋的详细记录、饲料消耗、饲料配方、体重、照明方案、断喙工作、育雏和饲养程序、常规用药和免疫接种、年龄、病前的历史，养禽场的位置及异常天气或养禽场的异常事态，都会在禽群疾病的诊断上和从有或没有代表性的样品所得到的少数五花八门的结果之间，带来分歧。症状持续的长短，病禽和死禽的数目，什么时候和什么地方发生的死亡，都是很重要的线索。家禽生产者都已掌握了丰富的禽病知识，通常能识别剧烈的或界限明确的症状和病变。而兽医师常常面临的是一些含糊的、没有特征性的和复杂的病例，需要广泛调查研究才能作出诊断。即使各方面都表明，生产性能下降可能是管理上的因素造成的，兽医师还必须复核所有疾病的可能性，这就需要进行系统了解，保证没有任何被遗漏的东西。 外部检查 详查体我寄生虫，可在受侵鸡的身上发现虱子和北方羽螨（Ornithonyssussilviarum），如疑有鸡刺皮螨(Dermanyssusgallinae)或波斯锐缘蜱(Argaspersicus)，那就必须检查栖息区以及禽舍的里面和周围所有的裂缝，因为这些寄可在宰生虫都不停留在家禽身上。有关体外寄生虫的诊断和鉴定，请参阅第32章。对于活禽的一般体态和所有的展示常情况，都应仔细识别。对于下述迹象的观察非常重要：运动失调、震颤、麻痹状况、异常姿态、腿软旨无力、精神沉郁、失明，以及呼吸道症状，观察之后再宰杀样品，将禽饲养在笼子里，一经它们适应了周围环境，并能最好地表现其原貌，即可对它们进行观察，这样做是非常有用的。往往还有必要留下几只活禽，以观察有无可能从下列情况中康复，如短暂的疾病（一过性麻痹）、呼吸道感染、化学特质中毒、饮料或饮水断绝，以及来实验室途中的过热。应该检查有无肿瘤、脓肿、皮肤变化、喙的状态、有无相互喙啄的迹象、创伤、腹泻、鼻漏和呼吸道分泌物、羽毛及冠的状态、脱水以及肥瘦情况，这些都是有用的线索。 血液样品 血液样品可在诊断的同时采集（亦杀后立即采取）。通常较为满意的做法是，间隔几天采取两次血样（双份），以确定血清中抗基本些疾病（如新城疫）抗体的消长。在这种情况下，可从主（臂）翅静脉、颈静脉或心脏穿刺直接采取血样，并保留禽只待第二次取样。臂静脉穿刺的方法，对于火鸡、鸡以及绝大多数的家禽来说，通常是野外条件下采集血样的最简单、最好的方法，尤其是被采禽仍要放回禽群的情况下更是如此。对于鸭，可从跗关节附近的隐静脉采血。欲暴露静脉，要从翅膀肱骨区的腹面拔去少许羽毛，这样即在肱二头肌和肱三头肌的深窝里见到臂静脉。若在局部先70%酒精或其他无色消毒液涂湿，则更易见。为了能更好地进行静脉穿刺，先将两翅抓在一起，再用右手持注射器将针刺入右翼静脉（图1.9）。注射针应向血流的相反方向刺入。 *图1.9* 图1.9从翼静脉采血 心脏采血是在胸骨和剑突之间的前方正中23；或从两侧经过肋间，或者顺前后方向经胸腔入口刺入。只有取得经验后才能确切知道在什么地方以什么角度插入针头。最好用未放血的刚杀死的鸡练习这一技术。侧面穿刺时必须遵守一个总的原则，即应先在胸骨前端想象一条垂直线，使其与胸么嵴构成直角，然后沿着这条想象的线进行抚诊，此时可感觉到心跳，插入针头到适当深度。通过胸腔入口进行心脏穿刺，应将鸡只仰卧，使胸骨嵴向上，用手指把嗉囊及其内容物压离局部，将针放在沿着入口腹角的位置上。针头穿进入口后，沿着中线向水平方向，向后刺去，直至进入心脏。在胸骨和剑骨之间进行心脏穿刺的位置，成年鸡约在胸骨嵴后端到前端1in处的背部，针头所处的角度约为45，与对侧的户关节呈正中方向，针头必须经过胸骨和剑骨二者构成的角，直接刺入心脏。详细内容和图示见Hlfstad23。心脏和静脉穿刺所和针头的大小和长短，将取决于禽只的大小。雏鸡和雏火鸡用3/4in（7.6/10cm）长的20号针头；成年鸡用2in（5cm）长的20号针头；成年火鸡可能需要较大的针头。为了迅速而准确地放血，针头必须锋利。为了确保是否刺入静脉或心脏，应当间歇地在针管中造成轻真空来吸出血液，如真空过大，血管壁会被吸入针孔而引起堵塞。所以往往需要转动针养活注射器，以搞清楚针孔是否悬空在血管里。对于绝大多数血清学研究来说，2ml血液所吸出的血清足够。血液应无菌采取，并置于洁净的容器里，容器要水平放置（或基本水平），直至血液凝固为止。偶尔某个样品凝固的时间较长，尤其是火鸡血如此，加入一滴组织浸出物可加速凝固过程。这种组织浸出物的制备过程为：取一些1012日龄的鸡胚并处死，用韦林氏搅拌器将其切碎研磨，然后浆结保存备有。凝块结实后，可将小瓶起立，使血清积聚底部。亦可用塑料小瓶采取血清，这样血凝块不会巾在瓶壁上，凝固过程中不需要将其放在特殊位置。肥胖母禽的血清，由于含有较多的脂类而常呈乳样。将小瓶置入温箱中可促进血凝。新鲜血样在刚采出后，决不能立即放入冰箱，因为这样会阴止血凝过程。如欲进行凝集试验，血清决不可冷冻，因为这样常会引假阳性反应。如需要抗凝血样，应将血液注入装有枸橼酸钠溶液的瓶中，比例为每10ml新鲜血液用1.5ml的2%枸橼酸钠；或者装进内含枸橼酸钠粉的小瓶里，每毫升全血用3mg枸橼酸钠血样的管子时，可先放进适量的2%枸橼酸钠溶液，然后消毒，置烘箱里烘干水蒸气。目前已可购买到含抗凝肝素的收集血液的小玻瓶。对于某些类型的血清学试验，可将新鲜血液滴在滤纸条的尖上，干燥后送到诊断实验室，在那儿可将处理过的滤纸放在盐水溶液中，以获得抗体供试验用（图1.0）。 *图1.0* 图1.0吸附在滤纸条上的血液为检测抗体，用力挤压盐水溶液中浸有血液的滤纸，以得到血清（Beard）。 如疑有血液寄生虫或血恶病质，应当用清洁的玻片制备全血涂片，为促进快速干燥，可将玻片进行预热。有关染色技术请参阅Campbell的文献12。一滴用于制备湿封片或涂片的血液可从很小的雏鸡获得，经刺破腿后内侧的静脉或尚未成熟的鸡冠（也可剪破）而采集。 宰杀家禽进行尸体剖检 有数种方法可用宰杀家禽，各种方法自有其优点。目标是要在瞬间杀死禽类，而使其在这一过程中不感到痛苦。杀死小鸡的最快方法见图1.11。这里所描述的快速颈脱位，被美国兽医协会（AVMA）认为是一种家禽无痛苦死亡的人道方法5。 *图1.11* 图1.11小鸡或小火鸡的无痛致死，抓鸡如图所示：一手以固定的位置抓住双腿，另一只手的拇指与食指形成一个圈而捏住颈，无名指压住喙；断颈方法为：抓头的手臂快速用力牵垃，同时压迫头部向北向拉扯（见内图）。 牛阉钳可用于处死大鸡和大火鸡，一个人既拿只又要同时进行操作是较困难的，要有一个助手帮忙，操作起来就相当自如了。如钳子在反射性肌肉痉挛停止前一直保持夹住状态的话，这项技术还能防止濒死期反胃和嗉囊内容特反流而吸入呼吸道。对于年幼的银鸡，也可在桌子的锐缘紧压，这样很易将左面部折断，或者用大拇指和食指紧捏或用外科剪没有刀刃的内角作为小钳子紧挟也有同样效果尸体剖检的注意事项 如果有理由怀疑待剖检的患禽已感染了疾病，而感染的疾病可能对人有接触性传染（鸟疫、丹毒和马脑炎），必须采取严格的卫生预防措施。应当用消毒药将尸体和剖检台面完全浸湿，应带一副优质的橡皮手套，操作中还要谨慎从事，无论是病理学家，还是其助手，决不能将他（们）手上的皮肤刺破，也不能吸入组织或粪便形成的尘埃或气溶胶。因此最好戴上细粒面具，以防吸入污染的尘埃。所有可能与尸体、组织或培养物发生接触的实验室人员，必须了解它们可能的传染性质和相应的预防措施。除了某些明显的例外（见特异性病症），绝大多数常侵入家禽的疾病因子被认为对人是无致病性的。然而，明智的做法是，在剖检时最好还是随时橡皮手套。Galton和Arnstein18曾就公共卫生中的禽病做过评述。在金属盘上剖检标本，有利于剖检后迅速对尸体进行高压消毒。日常剖检工作所需的器具为一把剖检剪（用以切割骨头）、一把肠剪（用来剪开肠道）、一把剖检刀（有以切割皮肤和肌肉）、一把外科小（用以进行组织的检查）。此外，还应当补充一些镊子、消毒注射器、针头、瓶子和培养皿，根据情况需要，用以收集血样和组织标本。 剖检技术 标本背位仰卧，依次将两条腿拉开，远离身体，在腿腹之间切开皮肤。然后紧握大腿股骨处，向前，向下，再向外折去，直至股骨头和髋臼完全分离，两腿便可平放在台上（图1.12A）。沿中线先把胸骨嵴和肛门间的皮肤剪开，然后向前，如果必要的话，直至身体的整个腹面，连同颈部整个暴露出来（图1.12B）。如有肌肉出血，此时即可观察到。目前有两种暴露内脏的方法。一种是用剖检刀在胸骨和肛门之间，横刀腹壁，然后刀开两侧胸脯肌肉（图1.12C），再用骨钳刀断肋骨骨架，随后刀断两侧的喙突和锁骨（图1.12D），要仔细操作，不要弄断大血管。另一种次序相反的做法也很好，即先刀断锁骨和喙突，然后，刀开两侧的肋骨骨架和腹壁，此时便可把胸骨及附属结构从尸体上移走，放在一侧，这样，所有器官已充分暴露，检查时即可随意采取（图1.1E、F）。若事先尚未采集血样，且被检禽只刚好是在剖检前杀死的，则可在血液凝固之前用心脏穿刺采血。也可刀开通向腿部的大静脉，使血液聚集在一定区域，随后收集。 实验室检查程序 压片如若上述程序均在无菌状态下完成，则内脏器官就不会受到污染。若渗出物的情况提示有必要进行检查，此时可无菌载玻片制备压片。细菌培养如大体病变表明有必要进行细菌检查，则可从内脏上那些未暴露的表面取样，而不需烧烙。如已发生污染，就用加热的刮刀或其他此种用途的铁器烧烙器官表面，然后插入无菌接种环。注意不要把组织烧烙过度。常常需要采取大块组织样品，置于灭菌培养皿内送交微生物实验室，在较为清洁的环境里进行初次培养。胆汁样品如怀疑感染了弯曲杆菌，要采集胆汁样品进行湿封片检查或进行细菌培养。呼吸道病毒分泌物如疑有呼吸道病症，最好进行病毒培养或禽体传代。可和消毒刀和镊子无菌采取有完整截面的气管下段、支气管和肺的上部，放八消毒乳钵磨碎或装入平皿，暂时储存。取得的气管此时便可剪开，如有渗出物，也可加到前面收集的村料里或存放在另外的小瓶中。*图1.12* A、先刀开腿腹之间的皮肝肤和筋膜，拉开两腿，并来回牵拉使股骨头关节与髋部（箭头所示）断开；B、剪开肛门至喙之间的皮肤；C、通过胸骨的腹尖打开体腔，沿着胸肌剪开，直到23根肋骨；对侧的胸部亦按此剪开；D、改变剪刀的方向（图中箭头所示），一直向前剪开相应的肌肉和骨骼，直至胸腔入口，可切断胸部放置于对侧或去掉，以便暴露内脏，剖检至此，可采集微生物样品；E、切断肝脏前部的血管和腺胃，一直切至食道，整个腹部内脏即可脱离，图示心脏（H）、肝脏（L）和腺胃（P）；F、轻轻牵引拉断肠系膜和气囊的联系即可移出肠道，肺、心、肾可留在体腔待以后进一步检查。 研磨中加入一部分消毒砂粒，但最好用人造刚玉（筛孔60号），这样会利于样品的研磨。将磨碎的组织放入有盖的消毒离心管中，低速离心，制备没有颗粒特质的上清液，用以接种鸡胚、培养基或细胞培养物，或给实验鸡接种。其他各种实质器官的首次病毒分离与此步聚相似。沙门氏菌培养应该对其他所有内脏器官进行异常检查（小脓肿、变色、肿胀和脆性）。如有异常，应在剪开肠道前把从受损组织采集的样品，放到适当的固体或液体培养基中。一旦打开，肠道内容特肯定会严重污染其他器管。如疑有沙门氏菌感染，可用消毒镊子和剪子选取一些肠段，直接入进消毒乳钵研磨或装入消毒平皿准备以后培养。常规检查时，只取包括回肠下段、盲肠近段和盲肠“扁桃体”及大肠近端的一节，并在无菌状态下研磨以制备接种物。肠道的其他区段或者其他内脏器官的组织可加到胃肠收集物中，或者分开培养。另外，可用消毒棉拭子从露出的胃肠壁取样进行沙门氏菌培养。培养技术详见第3章和禽类病原分离和鉴定实验室手册38。其他检查在必要的培养完成之后，可对肠道进行炎症、渗出物、寄生虫、异物、功能障碍、肿瘤和脓肿的检查。此时，即可检查各种神经、骨结构、骨髓状况，以及关节。对于坐骨神经的检查，可剪去腿内侧的肌肉使之暴露。位于体腔内的坐骨神经丛被肾脏掩盖着，用解剖刀的钝端刮去肾组织可很好地暴露该神经从。壁神经丛的神经很易在胸腔入口的两侧找到，须查有无肿大。应对迷走神经进行整个检查，以防勿略了小段肿胀。用骨钳切断骨时的难易程度是骨骼状况的一指征。应抚诊肋骨软骨的交界处，检查有无肿胀（形成串珠）。纵切长骨骨骺，检查有无异常的钙化过程。通过弯曲和折断以测定胫趴骨或跖骨的坚硬度，检查有无营养缺管症。健康的骨骼在折断时发出喀嚓声，缺管维生素D或态物质的鸡，其骨中矿特质严重减少，以至任凭弯曲到什么角度都不断裂。如有关节渗出物，可在拔毛后用热烙铁烧烙局部皮肤，再用消毒解剖刀切开，然后用灭菌接种环或棉拭子采取关节渗出液。可用同样的方法采取并检查副鼻窦的渗出物。脑的暴露和检查由于各层脑膜在有些地方与骨骼粘附得很紧，不易把及组织完整地取出来。以下方法操作迅速，在大多数情况下，适用于检查和取出脑组织。在寰枕交界处分离头部和下颌。烧烙切面并去掉过多的疏松组织，剥离颅骨和上凳的皮肤并把它向前翻，在那个位置上用一只手捏住，如果取出的脑组织的一部分要做动物接种、病毒分离或细菌培养，以下步聚必须使用灭菌器具。捏住位于头两侧的通向颅骨的骨头，用无菌的有两粗钳口的骨钳或大的外科剪的端部，从枕骨大孔开始，向前从两侧向位于颅腔前缘的中点剪开（图1.13A）。取下这片剪掉颅骨，整个脑组织便暴露出来了（图1.13B）。如一部分脑组织要用于培养或动物接种（例如疑似有禽脑级脊髓炎病毒），另一部分用于病理组织学检查（如维生素E缺乏症），可用锋利的外科刀片沿中线将脑组织由前到后切开，然后小心地从一个脑半球上切断神经和联系，同时将头部翻过来，当与其他部分完全脱离时，这一半脑组织就掉到盛有福尔马林的容器里（图1.13C）。另一半脑组织可用灭菌的锋利弯剪取下（不必考虑保持组织结构的问题），放入培养皿或灭菌器具，或乳钵里。注意别用接触了福尔马林的器具污染要分离病毒的脑组织。这两个半脑也可按相反的顺序取出（图1.13D）。如果要用整个脑组织来做切片或培养，则可按此目的谨慎进行。如只用于切片，也可原位固定，然后取出。大块脑组织应进行纵切，以便固定液能很好地渗进去。 *图1.13* 图1.13经过初步步实践，就可取出脑组织，而造成极低程度的创伤；A、用大剖检剪沿着颅腔边缘剪开颅骨；B、除去剪下的颅骨；C、用锋利的消毒解剖刀纵切脑 组织，取出一半用于组织培养；D、取出另一半放入不敷出0%的福尔马林中，用以进行检查。 用于病理组织学检查的组织常常需要制备染色的组织切片，一般都是由另一部门制备或送到专门实验室检查。切片的质量受到所到标本的质量和保藏技术的限制，组织块，特别是迅速分解的脑组织和肾组织，必须在死后立即采取，才能保存得好。组织块必须很小，以使固定液迅速渗透。应当用锋利的解剖刀或刮脸刀片轻轻切割，避免破坏其组织结构，然后，将它们保存在10倍于体积的10%福尔马林或其他固定液里。骨片除很薄很软者可用剪力或解剖刀取材外，可用锋利的骨锯锯开。巾上标签，注明日期后，立刻把组织送到切片实验室。通常情况下，肺组织总是浮在固定液的表面，因为其内含有空气。在组织上覆以脱脂棉，以保持其浸没状态，可取得满意的固定效果。在固定剂中，造成真空可消耗尽肺中空气，但此法不太令人满意，可致人为变化。骨组织在固定后应将其浸入脱钙溶液中进行脱钙，脱钙溶液为等量8%盐酸和8%的蚁酸的混合液37，曲型的脱钙时间为13天，时间长短取决于骨块的大小和密度。无论何种组织，在福尔马林固定液中放置过久过均变得太硬。若切片工作拖延，应在固定液里处理48h后转入70%酒精。操作细节见有关组织学技术的教科书36，37，46。进一步检查的线索初学者欲检验某些常见疾病，剖检时按照下述程序是很有帮助的。它们不是确切的诊断方法，为能做出诊断，学生和初学诊断的人员，必须参考特征性症状和病变、诊断程序以及将在以后各章讨论的特异性疾病的传染性因子的特征。也可参考禽类病原分离和鉴定实验室手册38。球虫：在剪开肠道立前，先注意观察浆膜下层。用肠道各段黏膜刮取物和盲肠内容物制成湿封片，直接在显微镜下检查悬浮的卵囊和裂殖子以及它们在上皮细胞里所处的发育阶段（组织阶段）。其他原虫：采集受侵组织制备湿封片，若有必要，可加少许湿热生理盐水提供液体，在显微镜下检查六鞭虫、组织滴虫和毛滴虫等。毛细线虫和蛔虫幼虫：采集黏膜渗出物和黏膜深部的刮取物，在两个厚玻片之间压成一薄层。在强光或低倍放大镜下检查有无寄生虫。放大后，寻长雌性毛细线虫里具有两极的柠檬形卵子。真菌：取病部刮取物制成湿封片，加20%氢氧化钠或氢氧化钾。不时加热，持续15min或更长时间，使其消化，在高倍镜下镜检真菌菌丝。弯曲杆菌：在暗视野或相差镜下查新鲜胆汁的湿封片，只有阳性结果才有意义。菌血症和血液寄生虫：制备新鲜的湿封片，最好用柠檬酸处理的血，在明视野和暗视野显微镜下检查活的微生物。制备新鲜血涂片，在空气中干燥，用姬姆萨、革兰氏、瑞氏或其他方法染色。渗出液：如疑有传染性鼻炎，取清这鼻涕或鼻窦渗出物制成薄涂片，用姬姆萨、革兰氏、美蓝或其他方法染色。接种适当培养基或易感雏鸡，以分离病原。脓肿：选择适于那些疑似引起脓肿的各种微生物生长的培养基。烧烙后切开脓肿的表面，用消毒的接种环或棉拭子取出脓肿内容物，接种到培养基上。另外和干净的载玻片制成脓肿的涂片。发脓液太黏稠，可加一滴水稀释，自然干燥后用火焰固定，根据需要分别用革兰氏、抗酸或任何其他染料染色。胚胎接种分离病毒：对于常规病毒分离，可取可疑似组织（气管、支气管、肺、肝、脾、肾、脑和骨髓）的细磨悬液或体液和渗出物，经过离心和/或过滤，注入不同孵化期胚胎的绒毛尿囊腔、卵黄囊和绒毛尿囊膜。病毒培养技术请参阅各特定的疾病，也可参况禽类病原分离和鉴定实验室手册38有关各病原分离所选用胚胎日龄、接种途径以及接种的详细步聚。培养时须采用无特定病原（SPF）胚胎，以保证观察到的致病因子是来自接种物的，而不是来自生产种蛋的家禽。同样重要的是，要保证阴性培养物是由于接种物里没有致病因子，而不是种蛋中被动抗体干扰的结果。鉴于分离病毒的目的，是要确定存在的是什么病，所以最好用不同的途径接种不同日龄的胚胎。在判断培养结果为阴性之前，可能需要进行若干次盲传。有报道21介绍一种不需要使用绒毛东膜下沉的简易接种方法。为了便于接种，也可把绒毛东囊膜同蛋壳分离开来（沉下去）。先在气室上钻一小孔，再小心地在胚胎对面一侧的蛋壳上钻另一