微生物简答.docx

36.微生物的五大共性（微生物的特性）除了具有其他生物共同具有的特性，如遗传性和变异性外还具有：1.体积小、面积大 2.吸收多、转化快 3.生长旺、繁殖快 4.适应强、易变异5.种类多、分布广37.革兰氏染色的步骤、机理及其结果 基本步骤：涂片固定 结晶紫初染1min 碘液媒染1min95%乙醇脱色0.5min 番红复染2-3min 结果: 革兰氏阳性菌紫色；革兰氏阴性菌红色。第一步：结晶紫使菌体着上紫色第二步：碘和结晶紫形成大分子复合物，分子大，能被细胞壁阻留在细胞内。第三步：酒精脱色，细胞壁成分和构造不同，出现不同的反应。G+ 菌：细胞壁厚，肽聚糖含量高，交联度大，当乙醇脱色时，肽聚糖因脱水而孔径缩小，故结晶紫-碘复合物被阻留在细胞内，细胞不能被酒精脱色，仍呈紫色。G菌：肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，因其含脂量高,乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，酒精将细胞脱色，细胞无色，沙黄复染后呈红色。38.霉菌的无性孢子和有性孢子无性孢子：1、孢囊孢子 由于生于孢子囊内，又叫内生孢子。 2、分生孢子是霉菌中常见的一类无性孢子,生于细胞外,所以又叫外生孢子。 3、节孢子（又称粉孢子）它是由菌丝断裂形成的外生孢子。 4、厚垣孢子 这类孢子具有很厚的壁，又叫厚壁孢子。有性孢子：1、卵孢子 由大小不同的配子囊结合后发育而成。 2、接合孢子 是由菌丝生出的结构基本相似、形态相同或略有不同两个配子囊接合而成。 3、子囊孢子 在子囊内形成的有性孢子。形成子囊孢子是子囊菌纲的主要特征。 4、担孢子 担子菌所特有，经两性细胞核配合后产生的外生孢子。因着生在担子上而得名。39.病毒的基本特点病毒是一类比细菌更微小，无细胞结构的，只含一种核酸的活细胞内的寄生物特点为1）不具有细胞结构，具有一般化学大分子的特征。2）一种病毒的毒粒内只含有一种核酸，DNA或者RNA。3）大部分病毒没有酶或酶系极不完全，不含催化能量代谢的酶，不能进行独立的代谢作用。4）严格的活细胞内寄生，没有自身的核糖体，没有个体生长，也不进行二均分裂，必须依赖宿主细胞进行自身的核酸复制，形成子代。5）个体微小，在电子显微镜下才能看见。6）对大多数抗生素不敏感，对干扰素敏感。7）在离体条件下，能以无生命的生物大分子状态存在，并可长期保持其侵染活力。8）有些病毒的核酸还能整合到宿主的基因组中，并诱发潜伏性感染。41.培养基配制的基本原则1.根据微生物的营养需要配置培养基（目的明确）2.营养物的浓度与比例应恰当（营养协调）3.物理化学条件适宜（条件适宜 ）4.根据培养目的选择原料及其来源（经济节约）42.天然、合成、半合成培养基的定义、特点及应用1.天然培养基这是指一些利用动、植物或微生物体或其提取物制成的培养基，这是一类营养成分既复杂又丰富、难以说出其确切化学组成的培养基。特点：优点：营养丰富、种类多样、配制方便、价格低廉 。缺点：成分不清楚、不稳定，不适宜做精细的科学实验。天然培养基只适合于一般实验室中的菌种培养、发酵工业中生产菌种的培养和某些发酵产物的生产等。应用：培养多种细菌的牛肉膏蛋白胨培养基；培养酵母菌的麦芽汁培养基等。2.合成培养基是一类按微生物的营养要求精确设计后用多种高纯化学试剂配制成的培养基。特点：优点：成分精确、重演性高。 缺点：价格较贵、配制较烦，且微生物生长比较一般。组合培养基仅适用于营养、代谢、生理、生化、遗传、育种、菌种鉴定或生物测定等对定量要求较高的研究工作中。 应用：例如，培养细菌的葡萄糖铵盐培养基， 培养放线菌的淀粉硝酸盐培养基（即高氏一号培养基）， 培养真菌的蔗糖硝酸盐培养基（即察氏培养基）等。3半合成培养基指一类主要以化学试剂配制，同时还加有某种或某些天然成分的培养基。例如，培养真菌的马铃薯蔗糖培养基 等。43.细菌的纯培养生长曲线分为几个时期，各个时期的主要特点，出现稳定期的原因，对数期的应用2对数期 特点：菌体细胞生长的速率常数（R）最大，分裂快，细菌每分裂繁殖一次的增代时间短，细胞进行平衡生长，菌体内酶系活跃，代谢旺盛，菌体数目以几何级数增加，群体的形态与生理特征最一致，抗不良环境的能力强。3稳定期 特点：新繁殖的细胞数与衰亡的细胞数几乎相等。4衰亡期：微生物死亡率逐渐增加，以致死亡数大大超过新生数，群体中活菌数目急剧下降，出现负增长。这时细胞形态多样。出现稳定期原因：1.营养物质特别是生长限制因子的耗尽，营养物质的比例失调，如C/N比值不合适等；2.酸、醇、毒素或过氧化氢等有害代谢产物的积累；3.PH、氧化还原等环境条件越来越不适宜等。对数期应用：研究微生物基本代谢的良好材料。它也常在生产上用作种子，使微生物发酵的延滞期缩短,提高经济效益。（迟滞期特点见小抄）44. 恒化培养与恒浊培养的比较装置控制对象培养基培养基流速生长速率产物应用范围恒浊器菌体密度（内控制）无限制生长因子不恒定最高大量菌体或与菌体形成相平行的产物生产为主恒化器培养基流速（外控制）有限制生长因子恒定低于最高不同生长速率的菌体实验室为主47.微生物培养过程中pH变化规律及其调整方法1)在微生物的培养过程中，培养基中的糖类、脂肪等有机物经微生物分解，氧化成有机酸，使pH值下降，蛋白质脱羧成胺类而使pH值上升。硫酸铵等无机盐在微生物代谢过程中由于铵离子被选择吸收，留下硫酸根而使pH值下降，硝酸钠等无机盐在微生物代谢过程中由于硝酸根离子被选择吸收，留下钠离子而使pH值上升。在一般培养过程中，随着培养时间的延长，pH值会下降，在碳氮比高的培养基中尤为明显。调整方法： pH的内源调节内源调节主要有以下两种方法：第一种是采用磷酸缓冲液进行调节。第二种以CaCO3作“备用碱”进行调节。 pH的外源调节按实际需要不断流加酸液或碱液到培养基中调节pH的变化。49.微生物的主要发酵类型 乙醇发酵 乳酸发酵 丙酸发酵 混合酸发酵与丁二醇发酵 丁酸发酵与丙酮、丁醇发酵50.自发突变可能的机制1）背景辐射和环境因素的诱变 原因不详的低剂量诱变因素的长期综合诱变效应。例如，短波辐射、高温诱变效应和普遍存在的低浓度诱变物质 。（2）微生物自身有害代谢产物的诱变效应 过氧化氢可能是内源性诱变剂。（3）互变异构效应 碱基发生了酮式至烯醇式的转变。（4）环出效应 在DNA的复制过程中，如果其中某一单链上偶然产生一个小环，则会因在其上的基因越过复制而发生遗传缺失，从而造成自发突变。51.转化与转导的区别（不确定）转导的基因也来源于供体菌，通过噬菌体为载体进行转换，转化的基因同样来源于供体菌，通过摄入的方式进行转换，可见三者都使受体菌获得供体菌的某些遗传特性，发生遗传性变异，基因来源是相同的，但转换方式不同。转导以温和噬菌体为载体，把供体菌的部分遗传物质转移给受体菌，如噬菌体中装配时误将细菌DNA片段装入噬菌体头部内，当该噬菌体感染另一受体菌时，可将供体菌的DNA携带入受体菌。转化是受体菌直接摄取供体菌游离的DNA片段并整合到受体菌的基因组中，如肺炎球菌的转化实验。52.原生质体融合的概念及其优点概念：通过人为的方法，使遗传性状不同的两细胞的原生质体发生融合，并进而发生遗传重组以产生同时带有双亲性状的、遗传性稳定的融合子的过程，称为原生质体融合。优点:1.可以提高重组率 2. 双亲可以少带标记或不带标记 3.可进行多亲本融合 4.有利于不同种间、属间微生物的杂交 5.通过原生质体融合提高产量 53.从自然界筛选微生物菌种的基本程序自然界工业菌种分离筛选的主要步骤是：采样、增殖培养、培养分离和筛选。如果产物与食品制造有关，还需对菌种进行毒性鉴定。54.基因工程的主要步骤1、目的基因的取得 2、 载体的选择3、目的基因与载体DNA的体外重组 4、重组载体引入受体细胞55.土壤是微生物生活的良好环境的原因（1）土壤的矿物质成分，提供微生物需要的矿质养料； （2）土壤中的动植物残体，以及耕作土壤中有机肥料，源源不断地供给微生物碳素养料和氮素养料； （3）土壤的持水性为微生物提供水分条件； （4）土壤的孔隙性和土壤水分多少，直接影响土壤的通气条件。 （5）土壤的pH范围在3.510.5之间，多数在5.58.5之间，这是大多数微生物活动最适宜的pH； （6）土壤的保温性，比地面空气温度变化小，也为微生物的生长提供了良好的条件。56.污染食品的微生物来源及途径，来源：土壤、空气、水、人及动物体、加工机械及设备、包装材料、原料及辅料 途径： 外源性污染 食品在生产加工、运输、贮藏、销售、食用过程中，通过水、空气、人、动物、机械设备及用具等而使食品发生微生物污染称外源性污染，也称第二次污染。 1、通过水而污染 2、通过空气而污染 3、通过人和动物而污染 4、通过用具及杂物而污染 5、由土壤引起的污染 57.微生物引起食品变质必须具备的条件食品的基质特性：食品的营养成分、食品的氢离子浓度 、食品的水分、食品的渗透压。微生物：分解蛋白质类食品的微生物、分解碳水化合物类食品的微生物、分解脂肪类食品的微生物。食品的环境条件：温度、湿度、气体。 58.细菌（杂菌）总数作为食品卫生质量评定的原因（1）反映食品的新鲜程度（2）食品生产过程中有否变质（3）食品生产的一般卫生情况59.大肠菌群作为食品卫生质量的指标的原因（1）大肠菌群是人和动物肠道中的正常微生物区系，并且只存在于人和动物肠道中。（2）大肠菌群通常与动物肠道病原菌同时存在，只是数量不同。（3）动物肠道病原菌抵抗外界不良环境的能力较差，在体外环境中极易死亡，所以难以在食品中检出。基于上述原因，通常采用大肠菌群来预测食品被粪便、肠道病原菌污染的可能性