测定步骤和方法.doc

粗蛋白测定溶液配制：1、400g/L氢氧化钠： 400g氢氧化钠溶于1000ml蒸馏水。2、20g/L硼酸溶液： 20g硼酸溶于1000ml蒸馏水。3、盐酸标准液：C(HCl)=0.1mol/L: 8.3ml浓盐酸，如入1000ml蒸馏水。（需要标定）测定步骤：一、样品的消化1、称0.5克样本，放入消化管内；2、加凯氏定氮片一粒和硫酸铜；3、加浓硫酸10毫升（过量）。4、将消化管盖上盖后放在消化炉上加热34小时，使消化液呈蓝绿色透明。二、蒸馏和滴定（实验室具体操作）中酸性洗涤纤维测定一、溶液的配制中性洗涤纤维溶液乙二胺四乙酸二钠 46.525 克四硼酸钠 17.025 克十二烷基硫酸钠 75克无水磷酸氢二钠 11.625 克无水亚硫酸钠 25 克乙二醇乙醚 25 ml将上述试剂加入1500 ml 蒸馏水中，待全部溶解后定容到2500ml 。酸性洗涤溶液0.5mol/L浓硫酸: 取69.675 ml浓硫酸加到1500 ml 蒸馏水中，冷却后定容到2500ml。（需要标定）称取50克的十六烷基溴化铵，溶于2500ml的0.5mol/L的硫酸溶液中二、步骤 1、给纤维袋编号，记录袋重，称取样品0.5克左右，放入纤维袋中，封口。2、将装好样品的纤维袋放入测定纤维的仪器，按照操作进行纤维的洗涤。3、将洗好后的纤维袋放入装有丙酮的烧杯内，保证全部浸泡，浸泡时间为5 分钟。4、浸泡后将袋子放入托盘，等丙酮味挥发完后，放入105烘3个小时后，取出放入干燥器，半小时后称重。粗灰分的测定步骤：1、将用蒸馏水冲洗过的坩埚放入高温炉中（55020）下灼烧30分钟。2、将坩埚取出并放入干燥器中，待冷到室温后称取坩埚重。3、称取样品2克左右，在电炉上碳化至无烟为止。4、将碳化后的坩埚放入高温炉中（55020）下灼烧3小时。5、3小时后取出坩埚并放入干燥器中，待冷到室温后称取（坩埚+残样）的和重。钙的测定一、溶液的配制EDTA 的配制：称取3.8克乙二胺四乙酸二钠溶解到200ml的蒸馏水中，加热溶解，待冷却后转入1000ml容量瓶中并定容。（需要标定）淀粉溶液： 称取1克可溶性淀粉溶于100ml的蒸馏水中（热）。盐酸溶液（1：3）；三乙醇胺（1:1）；乙二胺（1:1）；氢氧化钾（200g/L）二、步骤：1、向上次实验做出的灰分中加入盐酸溶液10ml，浓硝酸7滴。2、小心煮沸5分钟。将溶液转入100ml容量瓶中，并用加热的蒸馏水洗涤坩埚和漏斗中的滤纸，最后定容。（得到试样分解液）3、取试样分解液 10ml， 淀粉溶液 10 ml ，三乙醇胺溶液 2 ml 乙二胺溶液 1ml 孔雀石绿溶液 1滴氢氧化钾溶液 10 ml 盐酸羟胺 0.1克 钙黄绿素 少许4、在黑背景下用EDTA滴定，直到荧光绿消失。磷的测定一、溶液的配制 盐酸溶液（1：1）钒钼酸铵显色剂：（避光保存）偏钒酸铵1.25克加入到200ml蒸馏水中，再加入250ml硝酸钒钼酸铵25克加入到400ml蒸馏水中，加热溶解冷却后定容至1000ml。 磷标准液：磷酸二氢钾（105烘3小时后）称0.2195克，溶解后转入1000ml容量瓶中，再加入3ml硝酸，定容。二、步骤1、向灰分中加入盐酸溶液10ml，浓硝酸7滴。2、小心煮沸5分钟。将溶液转入100ml容量瓶中，并用加热的蒸馏水洗涤坩埚和漏斗中的滤纸，最后定容。3、标准曲线的绘制：分别取磷标液 0，1, 2, 5, 10, 15 ml于50 ml的容量瓶中，加入钒钼酸铵显色试剂10ml，并用蒸馏水定容。4、移取试样分解液5ml，加入钒钼酸铵显色试剂10ml，并用蒸馏水定容。5、在波长400 nm 比色。 干物质测定步骤：1、将水分皿放入（1