抗真菌药物的作用机制及耐药性.ppt

抗真菌药物的作用机制及耐药性 1 第一节抗真菌药物发展简介 2 第一个发现并被用于临床的为上世纪30年代末 从微生物发酵代谢产物中分离得到的灰黄霉素 1944年报道了唑类化合物的抗真菌作用 1949年从微生物代谢产物中分离得到了制霉菌素 1956年报道了两性霉素B的抗真菌活性 1958年灰黄霉素被用于临床 同年 上市了第一个唑类抗真菌药物 1960年两性霉素B被用于临床 1962年报道了氟胞嘧啶 flucytosine 的抗真菌活性 3 1969年咪康唑和克霉唑 clotrimazole 局部 被用于临床 1974年依康唑被用于临床 1978年描述了阿莫罗芬 amorolfine 1979年咪康唑parenreral制剂在英国上市 1981年酮康唑口服制剂在美国得到批准上市 同年第一个烯丙胺类药物萘替芬 naftifine 进入临床试验 1987年开始研究开发多烯类药物的脂质体制剂 1988年开始试验第一个棘白菌素类 echinocandins 药物 4 1990 1992年氟康唑和依曲康唑开始在美国使用 1993 1995年报道了第二代三唑类抗真菌药物 1995 1996年通过了第二个烯丙胺类药物特比萘芬 terbinafine 以及通过了两性霉素B脂质体制剂 1997年通过了依曲康唑口服溶液制剂 2001年上市了第一个棘白菌素类药物caspofungin 2002年上市了第二个棘白菌素类药物magfungin 在20世纪80年代中叶前的近三十年来 尽管两性霉素B的神经毒性比较大 但由于没有更好的治疗药物而一直作为控制临床真菌感染的主要药物 5 直到20世纪80年代后期和90年代研究开发了咪唑类和三唑系 triazoles 抗真菌药物 使在临床上能够有效地控制局部和系统性真菌感染疾病 特别是三唑系的氟康唑 由于其安全有效和低毒 在问世不到十年的时间内 仅在美国就已经治疗了1600多万真菌感染病人 包括30多万AIDS病人 但随着这类药物的使用 不断有出现耐药性真菌的报道 与细菌耐药性的研究比较 对真菌耐药性的研究还是非常有限的 6 第二节真菌耐药性与细菌耐药性的异同点 7 主要不同点 一是真菌的细胞结构和生活史与细菌的具有较大的差别 如大多数真菌具有二倍体性质和其生活周期较长 二是药物的作用靶位不同 如大多数抗细菌药物的作用靶位是抑制细菌细胞壁重要组分肽聚糖的合成 而大多数抗真菌药物的作用靶位是抑制真菌细胞膜重要组分麦角甾醇的合成或抑制其功能的发挥 8 不同抗菌药物的协同作用 单独使用抗细菌药物RNA聚合酶抑制剂利福平时无抗真菌活性 但当与两性霉素B合并用药时 对多种真菌具有活性 产生这一协同作用的原因是由于两性霉素B对真菌细胞膜的作用而增加了细胞对利福霉素的吸收 9 不同抗菌药物的协同作用 合并使用两性霉素B和核苷类抗真菌药物5 氟胞嘧啶 5FC 于念珠菌感染的老鼠模型 同样能够产生协同效应 产生这一协同效应的原因推测为由于两性霉素B与细胞膜上麦角甾醇的交互作用导致细胞膜结构的改变 从而促进了5FC的吸收 10 不同抗菌药物的协同作用 合并使用细菌细胞壁抑制剂 内酰胺类抗生素和蛋白质抑制剂氨基糖苷类抗生素 对肠球菌也能够产生作用机制相似的协同作用如 体外合并使用青霉素和链霉素于粪肠球菌时 在胞内测得的链霉素的浓度比单独使用链霉素时的要高 但是 两性霉素B与5FC的协同作用与上面的机制有所不同 细菌细胞壁抑制剂 内酰胺类抗生素和蛋白质抑制剂氨基糖苷类抗生素的协同作用是相继发挥的而不是同时发挥的 11 耐药机制的不同点 到目前为止 细菌通过改变抗菌药物的分子结构 以使药物难以到达作用靶位并与之结合而发挥抗菌作用的耐药性机制 这是细菌对 内酰胺类抗生素 氨基糖苷类抗生素和糖肽类抗生素等药物产生耐药性的主要作用机制 以及改变抗菌药物作用靶位的作用机制等 对于真菌耐药性来说 还没有被确证 尽管有一篇报道皮肤寄生的真菌能够降解制霉菌素 但没有足够的理由证明这是造成真菌耐药性的主要原因 12 耐药机制的不同点 而已有的研究表明 抗真菌药物的作用靶位的改变 降低药物与作用靶位的接触是真菌产生耐药性的主要机制 再则 从基因水平的研究来看 细菌产生高度耐药的一个主要原因是由于带有耐药性基因的载体的相互传递所致 如质粒 转座子和噬菌体等 而对真菌耐药性的研究 目前只发现是由于广泛与药物接触而产生的选择压力所致 13 第三节抗真菌药物的作用机制与真菌耐药性机制 14 抗真菌药物的作用机制 抗真菌药物的作用靶位集中在细胞表面 干扰细胞膜的合成如唑类药物氟糠唑等和多烯大环内酯类如两性霉素B等 干扰细胞壁中几丁质的合成如日光霉素和多氧霉素等 干扰细胞壁中1 3 葡聚糖的合成如卡帕芬净等 干扰细胞表面甘露糖蛋白复合物的合成如pradimicin等 15 一 作用于真菌细胞膜的抗真菌抗生素和合成药物 目前在临床上广泛使用的这类抗真菌药物有三种结构类型 唑类 多烯类 烯丙胺硫代氨基甲酸酯类 allylaminethiocarbamates 这类药物的作用靶位为真菌细胞膜的主要组成 麦角甾醇 16 不同抗真菌药物的作用靶位 17 一 作用于真菌细胞膜中甾醇合成的抗真菌合成药物 1 唑类抗真菌药物目前应用于临床的这类药物包括有 咪康唑 依康唑 酮康唑 氟康唑 依曲康唑 奥昔康唑 oxiconazole 特康唑 terconazole 噻康唑 tioconazole 等 特别是氟康唑 由于其具有良好的临床效果和安全性 因而被广泛地使用 但是 随着这类药物的广泛使用 耐药性真菌出现的频率愈来愈高 从而鞭策人们不断地去开发征服抗耐药性真菌的新一代药物 18 酮康唑克霉唑 依曲康唑 氟康唑依康唑 19 咪康唑奥昔康唑 特康唑噻康唑 20 1 唑类抗真菌药物的作用机制 麦角甾醇作为构成真菌细胞膜的重要成分 对于维持细胞膜的流动性 生物调节以及立体结构等起着重要的作用 而构成细胞膜的甾醇应该是C 14位去甲基的 已有的研究表明 唑类抗真菌药物的主要作用靶位是血红素蛋白 该蛋白共催化抑制依赖于细胞色素P450的羊毛甾醇 lanosterol 的14 去甲基 而当14 去甲基酶的活性受到抑制 则不能合成麦角甾醇而只能累积诸如羊毛甾醇 4 14 二甲基酵母甾醇 4 14 dimethylzymosterol 24 亚甲基二氢羊毛甾醇 24 methylenedihydrolanosterol 等14 甲基化的甾醇前体 由这样的甾醇构成的真菌细胞膜的结构和功能都发生了变化 21 1 唑类抗真菌药物的作用机制 早期的咪康唑 依康唑和酮康唑等除了抑制14 去甲基酶的活性外 对存在于膜上的其他一些有关的酶也具有抑制活性 如用新近开发的voriconazole处理白念珠菌时发现有酵母甾醇和角鲨烯 squalene 的累积 但还不清楚造成这一结果的原因是由于voriconazole与细胞膜上的一些与麦角甾醇合成有关的酶发生交互作用 还是由于14 去甲基酶的活性被抑制后产生的次级效应所致 另外 这类药物的作用机制与作用对象有关如 氟康唑和依曲康唑除了抑制新型隐球酵母的14 去甲基酶的活性外 还能够抑制将钝叶鼠曲草素酮 obtusifolione 还原成为相应的醇 obtusifoliol 从而导致甲基化的甾醇前体累积 22 FLU 氟康唑 ITRA 依曲康唑 VOR voriconazole TERB 特比萘芬 23 2 真菌对唑类抗真菌药物的耐药性机制 真菌对唑类药物产生耐药性的主要作用机制是由于药物的作用靶酶结构发生修饰 或是降低了这类药物与靶酶接触的机会 或是两者同时兼之 还没有发现由于药物结构被修饰而造成耐药性的作用机制 24 1 靶酶过量产生 2 药物结构被改变 3 药物被外排蛋白泵出 4 药物在细胞壁水平 细胞膜水平被阻止 5 细胞由于药物的作用而产生的补偿途径以使细胞保持活性 6 某些能够将钝化的药物转化为活性药物的酶被抑制 7 细胞产生某些能够降解药物的酶并分泌至胞外 25 真菌对唑类抗菌药物产生耐药性的生物化学机制 26 2 烯丙胺类抗真菌药物 1 烯丙胺类抗真菌药物的作用机制虽然与其他麦角甾醇生物合成抑制剂类抗真菌药物的结构不同 烯丙胺类的特比萘芬和萘替芬的作用机制也是抑制麦角甾醇的生物合成 特比萘芬在体内外对皮肤真菌具有很强的抗菌活性 并对某些唑类抗菌药物产生耐药性的菌株也有效 27 特比萘芬萘替芬特比萘芬和萘替芬的化学结构 28 二 作用于真菌细胞膜中甾醇合成的多烯类抗真菌抗生素 1 多烯类抗真菌抗生素的作用机制在早期研究多烯类药物对敏感菌的作用过程中 通过外源加入甾醇类物质能够明显降低培养物对药物的敏感性 从而支持了多烯类药物的抗菌作用是通过与细胞膜上的甾醇作用来实现的这一观点 由于药物首先与外源加入的甾醇物质发生生物化学作用 而使细胞膜上的甾醇免遭药物的作用 29 1 多烯类抗真菌抗生素的作用机制 抗生素发挥作用时首先与膜结合 其结合程度与膜内甾醇含量成正比 结合后生成的膜 抗生素复合物 使细胞质膜结构发生改变 在膜脂质双层中形成由多烯大环内酯抗生素与胆固醇结合的环状化合物 构成亲水通道 致使细胞内容物向胞外泄漏 所泄漏的物质种类与抗生素的性质 浓度及作用时间有关 如钾离子 无机磷 有机磷 氨基酸 磷酸酯直至核酸 蛋白等 从而产生杀菌作用 30 1 多烯类抗真菌抗生素的作用机制 利用这一特性 结合使用一些原先不能通过真菌胞膜的药物 使其发挥作用 菲律宾菌素与甾体结合后形成的复合物在膜内发生重排 以至膜结构破坏成为碎片 从而使真菌被杀死 这类抗生素的毒副作用是由于其对细胞质膜脂质双层中的固醇类结合专一性不强而损伤正常人体细胞所引起的 31 A 由两性霉素B在细胞膜上产生的孔道 B 两性霉素B与细胞膜上的胆甾醇以氢键的形式结合 从而破坏细胞膜的结构产生孔道 32 两性霉素B AMB 的应用 两性霉素B适用于治疗大多数深部真菌病 如隐球菌 假丝菌 曲霉菌 毛霉菌 球孢子菌 膜组织胞浆菌和芽生菌等引起的各种脏器和全身感染 也可用于治疗皮肤和粘膜真菌病 以及使用广谱抗生素时预防并发真菌病 两性霉素B可作为全身或深部真菌感染的首选药物 如隐球菌脑膜炎 真菌性菌血症 真菌性心内膜炎 肺部真菌感染 真菌性肠炎 真菌性角膜溃病及阴道炎等 33 两性霉素B的应用 尽管两性霉素B是一个最为重要的抗真菌药物 但由于其较窄的治疗指数 therapeuticindex 并且肾毒性较强 使其在临床应用上受到了一定的限制 为了改变这一不足 近年来 对两性霉素B脂质体的研究取得了很大的成功 目前已经有多种两性霉素B脂质体剂型被用于临床 从而有效地改善了高剂量使用时对哺乳细胞的毒性 因为在脂质体中 药物能够定向地到达真菌细胞膜 与细胞膜中麦角甾醇发生作用 两性霉素 是唯一可静脉注射临床使用的多烯类抗真菌抗生素 34 两性霉素B 两性霉素B和制霉菌素A1的化学结构 35 制霉菌素 NYS 制霉菌素能结合麦角甾醇 降低细胞膜稳定性 对多种真菌有活性 但在胃肠道不易吸收 且其毒性严重 临床应用受到很大限制 公司研制成脂质体 商品名为 不仅大大地提高了疗效 而且降低了毒副作用 现已完成 期临床 进入注册前阶段 36 KY62 是AMB酯化衍生物 由于酯化基团的亲水性 使KY62水溶性增加 从而使KY62毒性大大降低 对白色念珠菌的实验中本品与AMB有类似的抗菌活性 37 3874H1和3874 3 这2个化合物与两性AMB类似 均属七烯类抗生素 其中3874 1含有一个芳香环 而3874 3不含芳香环 因此水溶性很强 两者抗菌谱极广 对多种皮肤真菌 酵母以及丝状真菌均有活性 而且抗菌活性强于AMB和NYS 38 2 真菌对多烯类抗真菌抗生素产生耐药性的作用机制 Fryberg在研究一组耐药性白念珠菌时发现 耐药性的产生是由于麦角甾醇的生物合成途径受阻 而耐药性的高低与细胞膜中累积的麦角甾醇中间体的种类有关 如累积 8 甾醇中间体的菌株对多烯类药物的耐受性程度比累积 7 甾醇中间体的菌株的耐受性要高 而其又比累积 5 7 甾醇中间体的菌株的耐受性要高 39 2 真菌对多烯类抗真菌抗生素产生耐药性的作用机制 Kelly等对两株 一株是用药前 另一株为用药后 来自于用抗真菌药物治疗失败的爱滋病病人的新型隐球酵母 Cryptococcusneformans 进行了研究 发现菌株的耐药性与细胞膜中甾醇的种类有关 用药后采集的一株耐药菌 其因为缺失 8 7 甾醇异构酶而导致麦角甾 5 8 22 二烯醇 麦角甾 8 22 二烯醇 fecosterol和麦角甾 8 烯醇的累积 而没有麦角甾醇的合成 其是用药前菌株细胞膜的主要甾醇成分 40 2 真菌对多烯类抗真菌抗生素产生耐药性的作用机制 最近 Mbongo等进行两性霉素B对杜氏利什曼原虫 Leishmaniadonovani 的耐药性研究发现 其细胞膜中的麦角甾醇结构发生了改变 致使细胞膜的流动性发生了变化以及减低了药物对细胞膜的亲和力 41 2 真菌对多烯类抗真菌抗生素产生耐药性的作用机制 尽管早在20世纪70年代初 Capek和Simek报道了在皮肤寄生的真菌中有一种诱导酶系统能够降解制霉菌素 但至今还没有发现类似的报道 因此 由于药物结构被修饰或被破坏不是造成真菌耐药性的主要作用机制 同样 由于多烯类药物不需进入菌体胞内发挥作用 因此 外排机制似乎也不是产生耐药性的主要作用机制 42 三 作用于真菌细胞膜中鞘磷脂的抗真菌抗生素 鞘磷脂是真菌和哺乳动物细胞膜必要的组成成分 借其信号传导来控制细胞的分裂 增殖和凋亡 已经发现的这类抗真菌抗生素有 来源于出芽短梗霉 Aureobasidiumpullulans 代谢产物的aureobasidins 来源于小单胞菌的 rustmicin galbonolideA和galbonolideB 来源于哥斯达黎加植物真菌的khafrefungin 以及来源于其他微生物代谢产物的多球壳菌素 myriocin 脂黄菌素 lipoxamycin 鞘脂菌素 sphingofungins 和绿啶菌素 vindofungins 另外 由真菌代谢产物分离得到的溴苍螺菌素 australifungin 可以抑制神经鞘氨醇N 乙酰转移酶 此酶使神经鞘氨醇酯化为神经酰胺 43 鞘磷脂的生物合成途径以及一些药物的作用位点 44 45 四 作用于真菌细胞表面结构的其他抗真菌抗生素 BacillomycinF L和iturinA等的作用机制为影响细胞膜表面张力 形成膜表面小孔 从而导致胞内钾离子和其他有用离子的泄露 SyringomycinE SE syringostantinA和syringotoxinB等的作用机制为增加钾 氢和钙等离子的转膜流出 以及增加植物和酵母质膜的膜电位 SE形成电位敏感的离子通道 改变蛋白磷酸化和H ATP酶活性 Syringomycins对酵母的结合位点为麦角甾醇 46 iturinA的化学结构 IturineA R alkyl 47 四 作用于真菌细胞表面结构的其他抗真菌抗生素 很多细菌和真菌能够产生许多具有抗真菌活性的肽类化合物 这些肽类抗真菌抗生素的主要作用机制是干扰真菌细胞的表面结构 另外 最近几年的研究发现 在一些哺乳类的细胞中和昆虫的细胞中存有被称为抗菌肽的一类物质 其具有很强的抗细菌和抗真菌活性 有些已经能够通过基因工程技术在微生物系统中制备 这些抗菌肽对真菌的主要作用机制是溶解细胞壁 从而达到抗菌作用 48 一些细菌和真菌所产生的肽类抗真菌抗生素的一些特性 49 一些哺乳类细胞中产生的抗真菌肽类物质的有关特性 50 一些昆虫细胞中产生的抗菌肽的特性 51 植物来源的具有抗真菌活性的多肽 52 二 作用于真菌细胞壁合成的抗真菌抗生素 真菌细胞壁中含有特殊的甘露聚糖 几丁质 和 葡聚糖成分 这就为寻找具有毒性差异抗真菌药物提供了基本思路和方法 尤其是对 葡聚糖合成酶抑制剂的研究取得了显著的成果 但在很长一段时间内 仅发现脂肽类如棘白菌素类 echinocandins 和阜孢杀菌素类 papulacandins 两类结构的化合物具有抑制 1 3 葡聚糖合成酶的活性 最近以来 从微生物发酵代谢产物中陆续发现了多种不同结构的化合物具有这一生物活性如 pneumocandins类 牟伦多菌素类 mulundocandins 和萜类化合物等 53 一 作用于真菌细胞壁中葡聚糖合成的抗真菌抗生素 1 Echinocandins类药物的发现Echinocandins是20世纪70年代发现的一种天然产物 能够非竞争性地抑制 1 3 葡聚糖合成酶的活性 Echinocandin这一名称最初指的是一类具有相同的环状多肽核心和不同的脂肪酸侧链的环状脂肽类天然抗真菌产物 而现在echinocandin家族则包括echinocandins cilofungin pneumocandins aculeucins mulundocandin以及WF11899等成员 其中echinocandins和pneumocandins类药物是研究得最为深入并且已经得到临床应用的两类抗真菌药物 54 一 作用于真菌细胞壁中葡聚糖合成的抗真菌抗生素 1 Echinocandins及Pneumocandins类药物的发现Pneumocandins是由Zalerionarboricola ATCC20868 产生的一类天然产物 由于这是一类对卡氏肺囊虫 Pneumocystiscarinii 有效的抗真菌药物因此被命名为pneumocandins ZalerionArboricola最初是在1972年由Buczacki从受伤或者腐烂的松树伤口处分离得到的 这种菌能够抑制引起树干溃烂的Trichoscyphellawilkommii的生长 后来默克公司的研究人员又从西班牙马德里附近的池塘中分离得到这种菌 并且利用HPLC生物自显影技术对其发酵液进行研究 最终获得了pneumocandins类化合物 55 2 Echinocandins及Pneumocandins类药物的结构及分类 1 EchinocandinsEchinocandins主要有三种类型 B C以及D 其中echinocandinB是最主要的类型 它是由构巢曲霉 Aspergilusnidulans 和细皱曲霉 A rugulosus 产生的 Echinocandins主要是对卡氏肺囊虫和白假丝酵母具有较强的抗菌活性 但是由于其酰基侧链的存在 因此具有一定的溶血毒性 故而这一类抗生素还未被应用于临床 56 2 Echinocandin类似物 由于天然存在的echinocandins类药物具有较大的毒性 因此人们通过对其进行结构改造 获得了一些具有抗真菌活性的echinocandin衍生物 被命名为LY复合物 其中最主要的是LY121019 cilofungin 和LY303366 anidulafungin 前者由于其毒性和剂型 不溶于水 问题以及对卡氏肺囊虫肺炎 PCP 的活性较低 目前已经终止了研究开发 后者已经进入 期临床阶段 57 EchinocandinB和anidulafungin的化学结构 58 WF11899A和米卡芬净 在从微生物代谢产物中筛选抗真菌抗生素的过程中 从ColeophomaempetriF 11899的发酵液中发现了具有类似echinocandin的脂肽化合物FR 901379 WF11899A 该化合物具有水溶性的特性 其环脂肽结构上带有一个磺酸基团和在N 末端带有一个脂肪酰基团 它在体内对白念珠菌具有很强的抗菌活性 但弥散性曲霉感染小鼠模型上无效 根据对echinocandin结构改造获得的信息 环脂肽结构N 末端的脂肪酰基的不同 其药物的抗菌活性和毒性的改变很大 由此对FR 901379进行了大量的结构修饰 最终获得了米卡芬净 micafungin FK463 59 从微生物代谢产物FR 901379制备米卡芬净的过程 60 Pneumocandins和卡帕芬净 卡帕芬净 L743872 Mk 0991 caspofungin 为pneumocandinB0的半合成衍生物 已经在2001年由默克公司 Merk Co 在美国作为一种抗真菌药物 主要为曲霉 推出上市 61 PneumocandinB0和caspofungin的化学结构 62 Echinocandins类抗生素的作用机制 其主要作用机理是能够非竞争性的抑制真菌细胞壁中 1 3 葡聚糖合成酶的活性 进而引起真菌细胞壁的裂解以及细胞内外渗透压的改变从而将真菌细胞彻底杀死 63 Echinocandins类抗生素的作用机制 只存在于真菌细胞而哺乳动物细胞中所不具备的细胞壁其主要的大分子成分是几丁质 葡聚糖和壳聚糖 其中由几丁质和 葡聚糖纤维所构成的骨架结构主要起着维持细胞形状和保持细胞强度的作用 而壳聚糖则存在于这一骨架结构之中 主要与细胞的抗原性 多孔性有关 另外象在白假丝酵母中还与细胞的吸附性有关 葡聚糖分子是由多个 60 葡萄糖残基通过 1 3键连接起来的螺旋长链 有时也会出现通过 1 6键连接的侧链 64 Echinocandins类抗生素的作用机制 Echinocandins和pneumocandins类药物能够使正在生长的敏感菌的菌丝或芽体尖端的细胞壁合成部位处发生裂解 引起裂解的原因主要是 1 3葡聚糖的合成受到了抑制 而 1 3葡聚糖的合成是由一个较大的复合物催化完成 65 真菌细胞膜上 1 3 D 葡聚糖合成酶复合物 Fks1和Fks2 以及其他一些参与调节网络的蛋白 66 1 3 D 葡聚糖合成酶 Fks1的转录受到细胞周期的调节 它与细胞壁的重建相连 Fks2的转录依赖于钙调蛋白 一个关键的调节蛋白似乎是Rho1 它不仅与Fks蛋白发生交互作用 同时与蛋白激酶C Pkc1 发生作用 这个蛋白在酵母的肌动蛋白 actin 细胞骨架装配途径和有丝分裂活化蛋白 mitogen activatedprotein MAP 激酶级联放大中 是一个研究的比较透彻的调节蛋白 由于Rho1蛋白与多种蛋白发生交互作用 因而认为该蛋白是一个关键的开关 它启动或终止 1 3 D 葡聚糖的合成 Rho1似乎依赖于鸟嘌呤 核苷交换因子 其由Rom1和Rom2蛋白提供 Rom2通过与细胞壁有关的信号糖蛋白Wsc1和Mid2活化 Rho1蛋白的活化不仅激活 1 3 D 葡聚糖合成酶 同时激活MAP激酶级联放大和影响肌动蛋白的合成 67 真菌细胞的表面结构 68 经过棘白菌素类化合物作用后 1 3 D 葡聚糖合成酶活性被抑制的真菌细胞 其细胞学和超微结构发生变化如 有假菌丝生成 细胞壁增厚以及子细胞不能从母细胞分离 另外 细胞对渗透性变得敏感 同时由于子细胞的顶端生长而不能从母细胞分离 最终造成细胞溶解 不同剂量的anidulafungin对白念珠菌 感染兔子中取出 细胞形态改变的显微结构 69 三种新型抗真菌抗生素的比较 70 临床应用 此类药物能够快速地不可逆地抑制真菌细胞壁中葡聚糖的合成 这明显不同于传统的抗真菌药物的作用机制 因此这类药物可以有效的用于杀灭对氮唑类和两性霉素B产生抗性的真菌 没有溶血毒性以及较少的药物相互作用也使得这类药物比传统的抗真菌药物具有更大的优势 到目前为止 这类药物的主要缺点是 由于分子量太大因而不能口服使用 只能通过静脉注射使用 其抗菌谱没有得到深入的研究 在临床实验中这两类药物的首要作用菌为假丝酵母菌和曲霉菌 但是从其作用机制来看此类药物应该具有更广泛的抗菌谱 71 真菌对echinocandins类及pneumocandins类产生耐药性的作用机制 FKS1基因发生突变的菌株 其对脂肽类抗菌药物的耐受性非常高 比敏感菌高十倍以上 FKS2基因发生突变的菌株 其不影响对药物的敏感性 推测酿酒酵母对脂肽类抗真菌药物的耐药机制主要是FKS1基因的改变所致 这一基因编码的蛋白是真菌细胞壁葡聚糖合成酶的主要成分 也是药物作用的主要靶位 72 其他一些作用于 1 3 D 葡聚糖合成酶的抗真菌抗生素 73 其他一些作用于 1 3 D 葡聚糖合成酶的抗真菌抗生素 74 二 作用于真菌细胞壁中几丁质合成的抗真菌抗生素 许多能抗病原真菌的或杀虫的抗生素 多半具有抑制几丁质生物合成的作用 多氧霉素D是真菌细胞壁几丁质合成酶最有效的抑制剂 它的化学结构与合成几丁质的二磷酸尿嘧啶核苷 N 乙酰葡萄糖胺 UDP NAG 相类似 是一个极强的竞争性抑制剂 日光霉素是由唐德链霉菌 S tendae 产生的 结构类似于多氧霉素的核苷类抗生素 它通过二肽渗透酶进入靶细胞 能抑制真菌几丁质的合成 是一个很有前途的杀虫杀菌农用抗生素 近期研究表明其有可能作为抗真菌药用于临床 75 I 日光霉素X II 日光霉素Z 76 抑制几丁质合酶的抗真菌抗生素 NikkomycinZ SP920704 系基因工程菌StreptomycestendaeTU901发酵代谢所得的10个产物之一 本品对StreptomycesCerevisiae的Chs1和Chs3的活性较高 单独使用抗菌谱较窄 现已发现 与唑类药物如氟康唑 伊曲康唑联用 则对多种真菌有活性 由于哺乳动物细胞中不合成聚乙酰氨基葡糖 因此本品几乎没有毒性 现已进入I期临床 77 三 以细胞壁中甘露聚糖为作用靶位的抗真菌抗生素 甘露聚糖是真菌壁中含量最多的一类多糖 它主要是通过N 乙酰 葡糖胺残基上的 1 4 二糖共价地连接在蛋白质上形成甘露聚糖蛋白复合物 在其细胞膜的糖化合物中 甘露聚糖的含量高达50 以上 在真菌细胞壁的外周 这种糖蛋白的含量最高 其构成这种细胞的主要抗原 它可以作为抗菌药物的作用靶位 78 benanomycins和普那米星 pradimicins 已经发现的benanomycins和普那米星 pradimicins 被认为是作用于甘露聚糖蛋白的抗真菌抗生素 其作用机制是 这类抗生素首先在钙离子存在时 其游离的羧基与细胞表面甘露聚糖蛋白的糖部分形成复合物 接着对细胞壁产生作用 引起胞内钾离子的流失 最终使真菌细胞溶解 但是 至今还没有发现单一甘露聚糖蛋白的缺失会导致细胞的死亡 提示以此作为抗真菌药物的筛选靶位值得进一步研究 79 pradimicins类的化学结构 80 三 抑制蛋白质合成的抗真菌抗生素 在蛋白合成过程中 真菌和哺乳动物细胞需要2种延长因子 即延长因子1 EF 1 和延长因子2 EF 2 参与多肽链的延伸 然而 真菌需要一种哺乳动物中不存在的延长因子3 EF 3 现已发现 它广泛存在于真菌细胞中 是一种相对分子质量约 120 125 103的蛋白 至今尚无EF 3抑制剂用于抗真菌的研究报道 Merck研究室发现 尽管哺乳动物中含有EF 2 但它可以作为抗真菌药的靶标 81 粪壳菌素 sordarin 早在1971年就作为抗真菌抗生素从Sordariaaraneosa代谢产物中分离获得 但其作用机制在20多年后 从Graphiumputredinis代谢产物和Penicilliumminioluteum代谢产物中分别分离获得结构类似物GR135402和BE31405后才得以了解 来源于蜡状芽孢杆菌 Bacilluscereus 代谢产物的cispentacin和西唐链霉菌 Streptomycessetonii 代谢产物的FR109615 以及它们的结构类似物如BAY108888似乎具有双重作用模式 Cispentacin既能够干扰氨基酸的传输 也能够干扰氨基酸代谢的调节 82 粪壳菌素和Cispentacin的化学结构 83 GR135402 葛兰素 英国 本品由GraphimumputredinisF13302菌株液中分离而得 它能抑制白色念珠菌的蛋白合成 但不能作用于兔网状细胞 它是第1个报道具有抗真菌活性 但不抑制哺乳动物细胞的抗生素 84 BE31405 万有 日本 本品由PenicilliumminioluteumF31405菌株的培养液中分离而得的又一种不抑制哺乳动物细胞的抗真菌抗生素 它对白色念珠菌 新型隐性球菌均具有抑制活性 对哺乳动物不会产生细胞毒 其作用机制研究表明 它能抑制白色念珠菌的蛋白合成 85 此外 有从紫红球菌变种RhodococcusMerN1033中获得五组分的环状四肽类抗生素 分别称为紫红肽 Rhodopeptins Cl C2 C3 C4和C5 其分子结构中含亲脂性 氨基酸的长烷烃基 这在微生物代谢产物中从未发现过 它对白色念珠菌 假丝酵母和新型隐球酵母菌均有很强的抗菌活性 86 四 抑制电子传递的抗真菌抗生素 抗霉素A和来源于链霉菌517 02代谢产物的UK2A和UK3A 是一类具有广谱抗真菌活性的抗生素 它们对线粒体呼吸链的电子传递具有抑制作用 从而干扰线粒体的有氧呼吸 引起真菌细胞的死亡 已经从粘细菌的代谢产物中发现了20多种具有这种作用机制的抗真菌化合物 来源于海洋粘细菌Haliangiumluteum代谢产物的Haliangi