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广东省中山市古镇高级中学2012届高三生物复习技术实践练习题 新人教版考纲中有关选修一的要求:“见生物科考查的能力”中的“2、实验与探究能力要求”。知识点一 发酵的常用菌种1、发酵:是指利用微生物的某些特性为人类生产有用的产品或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术,在_ 的条件下都有可能进行。2、几种发酵菌种的比较特别提醒:酵母菌的繁殖需大量能量,而发酵过程进行无氧呼吸,故果酒制作的前期应,而后期 应_ 果醋制作过程中要求_ ,缺氧时醋酸菌的生长、增殖都会受到影响,另外醋酸的一生成也会受到影响。腐乳制作过程中盐、香辛料、酒精均可起到_ 作用,由于越接近瓶口,微生物污染越重,故豆腐加盐时,越近瓶口处盐用量_ 。例1、在家庭中用鲜葡萄制作果酒时,正确的操作是( )a让发酵装置接受光照 b给发酵装置适时排气c.向发酵装置通入空气 d将发酵装置放在45处例2、如图表示果酒和果醋制作过程中的物质变化过程,下列叙述正确的是( )a过程和都只能发生在缺氧条件下b过程和都发生在酵母细胞的线粒体中c过程和都需要氧气的参与d过程所需的最适温度基本相同例3、在制作腐腐乳时加卤汤密封腌制过程中,对腐乳风味和质量无影响的因素是( )a酒的种类和用量 b周围环境中的湿度 c香辛料的组成和用量 d腌制的温度和时间知识点二 、微生物的实验培养 培养基的概念:人们按照微生物对_ 的不同需求,配制出供其生长繁殖的_1培养基的类型(了解,重点掌握选择培养基)划分标准培养基种类 特点 用途物理液体培养基 不加凝固剂 工业生产半固体培养基观察微生物的运动、分类、鉴定性质固体培养基 加凝固剂,如琼脂微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种化学天然培养基含化学成分不明确的天然物质工业生产成分合成培养基培养基成分明确(用化学成分已知的化学物质配成)分类、鉴定用途选择培养基培养基中加入_,以_不需要的微生物的生长,_所需要的微生物的生长_(如培养酵母菌和霉菌,可在培养基中加入青霉素;培养金黄色葡萄球菌,可在培养基中加入高浓度食盐)鉴别培养基根据微生物的代谢特点,在培养基中加入_不同种类的微生物,如可用伊红一美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌(若有,菌落呈深紫色,并带有金属光泽)2、培养基的营养构成:一般都含有_等营养物质,另外还需要满足微生物生长对_,例如:生长因子(即细菌生长必需,而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。3、无菌技术(1)含义:指在培养微生物的操作中,所有_的方法。(2)关键:_比较项目 条件 结果 常用的方法_较为温和的物理或化学方法仅杀死_对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子) 消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法_强烈的理化因素杀死_包括芽孢和孢子灼烧灭菌、干热灭菌、_特别提醒:用酒精消毒时,_杀菌效果最好。原因是:浓度过高,使菌体表面蛋白质凝固成一层保护膜,乙醇分子不能渗入其中;浓度过低,杀菌力减弱。4、纯化大肠杆菌的实验操作(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤:计算_溶化_。特别提醒:平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面的温度也比较高,_既可以使培养基表面的水分更好地挥发;又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。(2)纯化大肠杆菌的原理:在培养基上将聚集的菌种稀释分散成,形成单个菌落,此菌落是由一个细胞繁殖而来的子细胞群体。(3)接种技术-_平板划线法:是通过接种环在琼脂固体培养基表面_操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。稀释涂布平板法:是将菌液进行一系列的_,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面。特别提醒:平板划线法为什么要在第一次以后的每一次划线的起点放在上一次划线的末端?提示:目的是使每一次划线后菌体数目减少,培养之后形成的菌落是由_ 繁殖而成。5、菌种的保藏(1)短期保存:固体斜面培养基上_保存,菌种易被污染或产生变异。(2)长期保存:_6、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数(1)分离的原理土壤中的细菌之所以能够分解尿素;是因为它们体内能合成_。这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起催化作用。实验室中微生物筛选的原理:_(包括营养、温度、ph等),同时_(2)分离分解尿素的细菌所使用的特定培养基:分离分解尿素的细菌的培养基应为_,培养基中的氮源只有_加入_(3)统计菌落数目:常用方法有 _【1】显微镜直接计数法 原理:利用特定_,在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量。 方法:用计数板计数。 缺点:_【2】稀释涂布平板法(间接计数法,也叫_)原理:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的_ ,通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。操作:a设置重复组,增强实验的说服力与准确性。b为了保证结果准确,一般选择菌落数在_的平板进行计数。(4)设置对照:指设置除了被测试的条件以外,其他条件都相同的实验,目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响,提高实验结果的可信度。(5)实验流程:土壤取样制备_微生物的培养与观察细菌的计数。7、分解纤维素的微生物的分离(1)纤维素酶的组成:是一种复合酶,至少包括三种组分,即c1酶、cx酶和葡萄糖苷酶,在这三种酶的作用下,纤维素最终被催化水解成葡萄糖。(2)筛选方法:_,即通过是否产生_来筛选纤维素分解菌。(3)实验操作步骤:土壤取样选择培养(可省略)_将样品涂布到鉴别纤 维素分解菌的培养基上_例1、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的下列操作中,不正确的是( ) a操作流程是计算、称量、溶化、灭菌和倒平板 b将称好的牛肉膏连同称量纸一同倒入烧杯中再加水、去纸 c.灭菌后向牛肉膏蛋白胨溶液中加2琼脂,并使其溶解 d将培养基冷却到约50时,在酒精灯火焰附近倒平板例2、在实验室里,从土壤里分离出尿素分解菌所需的培养基属于( ) a天然培养基 b鉴别培养基 c.选择培养基 d液体培养基知识点三 、酶的应用(一)、酶的制备1对于细胞内酶:用捣碎机、研磨器等机械将生物组织细胞破碎,使酶从活细胞中释放出来,进入细胞外的溶液中,经_、离心制备成_。2对于分泌到细胞外的酶:直接从分泌物或细胞外的组织间隙中提取,提取过程中注意_、_等多种环境因素对酶活性的影响。3酶活力测定的原理:通常以单位时间内,单位体积中反应物的_量或产物的_量来表示。(二)果胶酶在果汁生产中的作用1果胶酶的组成与作用 (1)果胶酶不是一种酶,而是一类酶的总称,包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶等。(2)果胶酶可以分解果胶,使_变得更容易;果胶分解后,也使得果汁变得_。 2探究果胶酶的适宜温度、ph(1)温度和ph都可以影响_,在探究果胶酶的最适温度或ph的实验中,自变量分别是_和_,其他如苹果泥、反应时间等都是无关变量,可以通过测定_或观察_来判断酶活性高低。(2)在混合苹果泥和果胶酶之前,要将苹果泥和果胶酶分装在不同的试管中_处理3酶的活性和酶反应速度(1)酶的活性:_。酶活性的高低可以用在一定条件下,酶所催化的某一化学反应的反应速度来表示。(2)酶反应速度:用单位时间内、单位体积中反应物的_或产物的_来表示。(3)影响因素:温度、ph、酶浓度、底物浓度和酶的抑制剂等。4探究温度(或ph)对果胶酶活性的影响(1)实验原理:果胶酶活性受温度(或ph)影响,处于最适温度(或ph)时活性最高。果肉的出汁率、果汁的澄清度与果胶酶的活性大小成正比:(三)探讨加酶洗衣粉的洗涤效果1加酶洗衣粉中常有的酶制剂 包括蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶四种,这些酶的活性受温度、酸碱度和表面活性剂的影响。2加酶洗衣粉去污机理(1)碱性蛋白酶能将血渍、奶渍等含有的大分子_水解成可溶性的_或小分子肽。(2)脂肪酶:淀粉酶和纤维素酶分别把大分子脂肪、淀粉和纤维素水解为小分子物质。(四)酶的应用:利用一定技术使酶既容易催化反应,又易于回收,可以重复使用。例(双选题):下列关于加酶洗衣粉的说法不正确的是( )a加酶洗农粉的效果总比普通洗衣粉的好 b加酶洗衣粉中常用的酶制剂有蛋白酶、脂肪酶等c.加酶洗衣粉是将酶直接添加到普通洗衣粉中 d.加酶洗衣粉相对普通洗衣粉来说有利于环保知识点四 dna的粗提取和鉴定1dna的粗提取(1)根据dna的_。dna和蛋白质等其他成分在不同浓 度的nacl溶液中溶解度不同。如图表示dna在nacl溶液 中的溶解度随着nacl溶液浓度变化而变化的曲线。(2)dna不溶于_ 溶液(3)dna对酶、高温和_的耐受性:蛋白酶能水解蛋白质, 但是对dna没有影响。大多数蛋白质不能忍受60-80的高温,而dna在80以上才会变性。洗涤剂能够瓦解细胞膜,但是对dna没有影响。2. dna的提纯(1)方案一:利用dna在不同浓度的nacl溶液中溶解度不同,通过控制nacl溶液的浓度除去杂质。(2)方案二:直接在dna滤液中加入_,其中的_能够分解蛋自质。(3)方案三:将dna滤液放在_的恒温水浴箱中保温l0-15min。3dna的鉴定(1)所用试剂:_(2)处理方法:将试剂与dna溶液混合后_加热5 min。(3)现象:溶液颜色_特别提醒:dna的鉴定中为什么需要两支试管?原因:一支试管中加入二苯胺试剂,另一支不加,可以通过对比说明通过二苯胺试剂确实可以鉴定dna。总结:dna的粗提取与鉴定中用到的试剂及其作用 nacl溶液_冷却的体积分数为95的酒精:_二苯胺:_洗涤剂:_嫩肉粉:_知识点五 :血红蛋白的提取和分离1、实验原理,依据蛋白质的_可以将不同种类的蛋白质分离。2、_法:也称分配色谱法,是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。相对分子量较大的蛋白质在凝胶_ 移动,路程短,移动速_,相对分子质量较小的蛋白质易进入凝胶_,路程_,移动速度_,以此可以将不同相对分子质量的蛋白质分离。3、电泳(1)概念:电泳是指_在电场的作用下发生迁移的过程。(2)特点:蛋白质等在一定ph下会带电,在电场作用下,带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动,电泳利用待分离样品中各种分子_的差异以及分子本身的大小、_的不同,使带电分子产生不同的迁移速度,从而实现样品中各种分子的分离。例:下列关于dna和蛋白质提取与分离实验的叙述,正确的有( ) a提取细胞中的dna和蛋白质都需要用蒸馏水涨破细胞 b.用不同浓度nacl溶液反复溶解与析出dna可去除蛋白质 c.蛋白质提取和分离过程中进行透析可去除溶液中的dna d蛋白质和dna可以用电泳方法进行分离纯化生物技术实践一、选择题:每题只有一个选项是符合题意的。1、在一普通锥形瓶中,加入含有酵母菌的葡萄糖溶液,如图甲,在图乙的相关坐标曲线图中,正确的是 a b c. d.2、如图是微生物平板划线示意图,划线的顺序为12345。下列操作方法正确的是 a操作前不用做任何处理 b划线操作须在火焰上进行 c在5区域中才可以得到所需菌落 d在12345区域中划线前后都要对接种环灭菌3、下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述,其中错误的是 a用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基,经高温、高压灭菌后倒平板 b取l04、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 ml,分别涂布于各组平板上 c将实验组和对照组平板倒置,37恒温培养2448小时 d确定对照组无菌后,选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数4、关于灭菌和消毒的理解不正确的是 a灭菌是指杀灭环境中一切微生物的细胞、芽孢和孢子 b消毒和灭菌实质是相同的 c常用灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌等 d接种环用灼烧法灭菌5、有关稀释涂布平板法的叙述错误的是 a首先将菌液进行一系列的梯度稀释 b然后选取不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面。 c其核心是防止杂菌污染,保证培养物的纯度 d结果都是在培养基表面由单个细胞形成单个的菌落6、下列关于果胶酶的叙述,不正确的是 a果胶酶能瓦解植物的细胞壁和胞间层,使榨取果汁变得更容易 b果胶酶包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶等 c果胶酶可使果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸,使浑浊的果汁变澄清 d动物、植物、霉菌、酵母菌和细菌均能合成果胶酶7、稀释涂布平板法是微生物培养中的一种常用的接种方法。下列相关叙述错误的是 a操作中需要将菌液进行一系列的浓度梯度稀释 b需将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基表面 c不同浓度的菌液均可在培养基表面形成单个的菌落 d操作过程中对培养基和涂布器等均需进行严格灭菌处理8、下列有关生物技术的叙述,正确的是 a固定化酵母细胞用cacl2溶液作载体 b制作果醋时,必须向发酵装置不断补充氧气 c传统的葡萄酒制作一定需要人工接种菌种 d凝胶色谱法根据分子的酸碱性来分离蛋白质9、下列有关生物技术和生物工程的叙述,正确的是 a传统的葡萄酒制作一定需要人工接种菌种 b制作果醋时,必须向发酵装置不断补充氧气 c构建基因表达载体时,必须用限制酶将运载体切开两个切口 d在进行植物组织培养和动物细胞培养时,细胞都必须先进行脱分化10、下列关于生物学研究方法及技术的叙述,错误的是 a用稀释涂布平板法可通过统计菌落数来推测样品中的活菌数 b进行胚胎分割移植时应选用发育及形态正常的桑椹胚或囊胚 c利用试管婴儿技术培育新个体的过程属于无性繁殖 d利用pcr技术进行dna扩增时不需要加入解旋酶二、选择题:每题有两个选项是符合题意的。11、下列有关生物技术的叙述,不正确的是( )a制作果醋时,不需向发酵装置补充氧气b.制作腐乳时,加盐腌制可使豆腐块变硬且能抑制杂菌生长c变酸的酒表面的菌膜是醋酸菌大量繁殖形成的d用传统的发酵技术制葡萄酒必须添加酵母菌菌种12、小李尝试制作果酒,他将葡萄汁放入已灭菌的发酵装置中进行实验(见图),恰当的做法是( )a加入适量的酵母菌b一直打开阀b通气c一直关紧阀a,偶尔打开阀b几秒钟d把发酵装置放到4冰箱中进行实验13、(双选题)有关平板划线操作说法正确的是( )a使用己灭菌的接种环,在操作过程中仍需灭菌b打开含菌种的试管需通过火焰灭菌,取出菌种后需马上塞上棉塞c培养皿盖打开后将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内,划三至五条平行线即可d最后将平板倒置,放入培养箱中培养14、下列关于统计菌落数目的方法的叙述,不正确的是( )a采用平板计数法获得的菌落数往往多于实际的活菌数b当样品的稀释度足够高时,一个活菌会形成一个菌落c为了保证结果准确,一般采用密度较大的平板进行计数d在某一浓度下涂布三个平板,若三个平板统计的菌落数差别不大,则应以它们的平均值作为统计结果15、用加酶洗衣粉洗涤衣物时,下列说法正确的是( )a不能用加酶洗衣粉洗涤毛料衣服b一般先用热水浸开,然后调至适宜温度c水温太低使洗衣粉中的酶丧失活性后不能再恢复d使用添加了碱性蛋白酶的洗衣粉洗衣服后应立即冲洗双手16、下列科研思路错误的是a从热泉中寻找耐热细菌b从贫瘠的土壤中寻找分解尿素的细菌c从成熟的葡萄皮上寻找酵母菌d从生长在酸奶的乳酸菌中获得生产所需的纤维素酶17、下列有关实验的叙述,正确的是a在dna粗提取和鉴定实验中,可以用甲基绿代替二苯胺检测b用斐林试剂检测还原性糖时,可以用葡萄汁代替苹果或梨匀浆c在观察洋葱根尖细胞有丝分裂时,可用表皮细胞代替根尖细胞d.平板划线法和稀释涂布平板法是微生物接种的常用方法18、新技术的建立和应用对生物学的发展至关重要。下列技术或仪器与应用匹配正确的是apcr技术以少量dna制备大量dnab电泳技术蛋白质和dna的分离和纯化c光学显微镜可观察到任何细胞器d花粉离体培养直接得到优良品种19下图是实验室使用某种接种方法在各种营养条件适宜的培养基上培养某种微生物的结果;相关叙述不正确的是 a该图最可能是用平板划线法进行接种 b. 该种微生物有可能是h5n1病毒 c操作者的衣着和手,需进行消毒 d该接种方法常用来准确统计样品中活菌的数目20、通常,需要借助光学显微镜才能完成的实验有 a利用稀释涂布平板法对细菌计数 b探究紫色洋葱表皮细胞液浓度 c对大蒜根尖细胞进行染色体计数 d调查和统计土壤特种的丰富度三、非选择题:21、纤维素分解菌能够产生纤维素酶分解纤维素。回答下列问题: (1)在筛选纤维素分解菌的过程中,通常用_ 染色法, 这种方法能够通过颜色反应直接对纤维素分解菌进行筛选。 甲同学在实验时得到了如图所示的结果,则纤维素分解菌位于 a b c d(2)乙同学打算从牛胃中分离纤维素分解菌并计数,与分离醋酸菌相比,进行培养时除了营养不同外,最主要的实验条件差别是_,该同学采用活菌计数法统计的菌落数目往往比活菌的实际数目_ (3)丙同学在提取和分离纤维素酶的过程中,为了抵制外界酸和碱对酶活性的影响,采取的措施是向提取液和分离液中添加_。若探究纤维素酶活性的最适温度,如何设置对照?_22、(2010年重庆理综卷节选)炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病,炭疽杆菌两端截平、呈竹节状排列,菌
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