基因重组与基因工程.doc

基因重组与基因工程基因重组与基因工程一、选择题1F因子从一个细胞转移至另一个细胞的基因转移过程称为：A转化B转导C转染D转座E接合2通过自动获取或人为地供给外源DNA使受体细胞获得新的遗传表型，称为：A转化B转导C转染D转座E接合3溶原菌是指：? A整合了噬菌体基因组的细菌? B整合了质粒基因组的细菌? C含有独立噬菌体基因组的细菌? ? D含有独立质粒基因组的细菌? E含有独立噬菌体和质粒基因组的细菌4由插入序列和转座子介导的基因移位或重排称为：A转化B转导C转染D转座E接合5由整合酶催化、在两个DNA序列的特异位点间发生的整合称为：A位点特异的重组B同源重组C基本重组D随机重组E人工重组6发生在同源序列间的重组称为：A位点特异的重组? B非位点特异的重组? C基本重组? D随机重组? E人工重组7限制性核酸内切酶切割DNA后产生：? A5? 磷酸基和3? 羟基基团的末端? B3? 磷酸基和5? 羟基基团的末端? C5? 磷酸基和3? 磷酸基团韵末端? D5? 羟基和3? 羟基基团的末端? E以上都不是8可识别并切割特异DNA序列的称：? A限制性核酸外切酶? ? B限制性核酸内切酶? C非限制性核酸外切酶? D非限制性核酸内切酶? EDNA酶9限制酶的识别顺序通常是：A聚腺苷酸? B聚胞苷酸CRNA聚合酶附着点D回文对称序列E甲基化“帽”结构10限制酶：? A从噬菌体中提取而得B可将单链DNA任意切开? C可将双链DNA任意切开? D可将双链DNA特异切开? E不受DNA甲基化影响11限制酶的作用特性不包括：? A在对称序列处切开DNA? B同时切开双链DNA? CDNA两链的切点常在同一位点? D酶切后的DNA片段多具有粘性互补末端? E酶辨认的碱基一般为46个12限制酶的特点不包括：? A只识别一种核苷酸序列? B其识别不受DNA来源的限制? C不同生物的DNA经相同限制酶切割后产生相同末端? D对双链和单链DNA同样切割? E同一限制酶在一DNA分子上可有数个切点? 13关于限制酶的叙述错误的是：? A能识别DNA特定的碱基顺序并在特定的位点切开DNA? B切割点附近的碱基顺序一般呈回文结构? C它能专一降解经甲基化修饰的DNA? D是重组DNA的主要工具酶? E主要从细菌中获得14在重组DNA技术中催化形成重组DNA分子的是DNA的：A聚合酶B解链酶C连接酶? D拓扑酶? E内切酶15在重组DNA技术领域所说的分子克隆是指：? A建立单克隆抗体? B建立多克隆抗体 ? C构建重组DNA分子? D无性繁殖DNA-? E有性繁殖DNA16无性繁殖依赖DNA载体的最基本性质是：? A青霉素抗性? B卡那霉素抗性? C自我复制能力? ? D自我转录能力? E自我表达能力17重组DNA技术领域常用的质粒DNA是：A细菌染色体DNA的一部分? B细菌染色体外的独立遗传单位? C病毒基因组DNA的一部分? D真核细胞染色体DNA的一部分? E真核细胞染色体外的独立遗传单位18pBR322是：? A天然的酵母质粒? B经人工改造的酵母质粒? C天然的大肠杆菌质粒? D经人工改造的大肠杆菌质粒? E经人工改造的噬菌体19基因工程的操作程序可简单地概括为：? A载体和目的基因的分离、提纯与鉴定? B分、切、接、转、筛? C将重组体导人宿主细胞，筛出含目的基因的阳性株? D将载体和目的基因接合成重组体? E限制酶的应用20基因工程的基本过程不包括：? A载体和目的基因的分离? B限制酶的切割? CDNA重组体的形成及转化? D重组体的筛选与鉴定? E重组体的序列分析21理想的基因工程载体应：? A分子尽可能大? B有适宜的限制酶切割位点? C含有多个耐药性基因? D不易在宿主细胞间转移E能整合于宿主细胞DNA，并随其复制22下列哪一种物质不能作为基因（克隆）载体：? A质粒? ? B噬菌体? CM13噬菌体? D病毒RNAE逆转录病毒DNA23用于转化哺乳类动物细胞的常用载体是：? A质粒? ? B噬菌体? CM13噬菌体? D逆转录病毒DNA? E大肠杆菌基因组24关于建立cDNA文库的叙述，错误的是：A从特定组织中提出mRNAB将特定细胞的DNA用限制酶切割后，克隆到噬菌体或质粒中C用逆转录酶合成mRNA的对应单股DNAD用DNA聚合酶，以单股DNA为模板合成双链DNA E加SAM，以使新生的DNA双链甲基化25cDNA文库包括该种生物：A某些蛋白质的结构基因B所有蛋白质的结构基因C所有结构基因D结构基因与不表达的调控区E内含子和调控区 26某限制性内切核酸酶切割5? GGGGGG? AATTCC3? 序列后产生：A5? 突出末端? B3? 突出末端C5? 及3? 突出末端D5? 或3? 突出末端E平头末端 27目的基因与载体连接不涉及：A限制酶B单链核酸酶C末端脱氧核苷酸转移酶DDNA连接酶E核酸外切酶28理想的宿主细胞不应有下列哪种特点：A易接纳重组子B对载体的复制扩增无严格限制C不存在特异的限制酶体系以降解外源DNAD不对外源DNA进行修饰? E含有载体的筛选标记基因29基因工程中不需要：? A限制酶? ? B基因载体? CDNA连接酶? D末端脱氧核苷酸转移酶? E核酶30重组噬菌体DNA转入宿主细胞的过程属于：? A转化? B转导? C转位? D转染? E转录? 31有关重组体转化及表达的叙述，错误的是：? A宿主细胞经CaCl2处理后对重组体的通透性增加B电击法也可增加宿主细胞的通透性? C噬菌体为载体的重组体必须以体外包装的方式转化宿主细胞? D真核基因难于在原核细胞中表达E转化生殖细胞可采用直接导入的方法32连接目的基因与载体不能采用：? A粘端连接? B平端连接? C尾接法 ? D人工连接器? E非共价键连接33直接针对目的DNA进行筛选的方法是：A青霉素抗药性 B氨卞青霉素抗药性C分子杂交D分子筛E电泳34“克隆”某一目的DNA的过程不包括：? A基因载体的选择与构建? B外源基因与载体的拼接? C重组DNA分子导入受体细胞? ? D筛选并无性繁殖含重组分子的受体细胞? ? E表达目的基因编码的蛋白质35表达人类蛋白质的最理想的细胞体系是：AEcoli表达体系B原核表达体系C酵母表达体系D昆虫表达体系E哺乳类细胞表达体系36不能用作克隆载体的DNA是：A质粒DNAB噬菌体DNA C细菌基因组DNAD腺病毒DNAE逆转录病毒DNA37克隆的真核黄素基因组DNA可在多种系统表达，例外的是：AEcoli表达体系B酵母表达体系? C昆虫表达体系? DCOS细胞表达体系? ECHO细胞表达体系38原核生物的粘端连接方式不涉及；A质粒B限制性核酸内切酶C核酸外切酶D退火EDNA连接酶?二、X型选择题1自然界基因转移可能伴发基因重组的有：A接合作用B转化作用C转导作用D转座2基因组通常是指：? A一个病毒所含的全套基因? B几个基因组成的DNA片段? C体细胞或生殖细胞所含的一整套基因? D一条染色体上所含的全部基因3基因工程的特点：A在细胞水平上操作? B在分子水平上操作? C在细胞水平上表达? D在分子水平上表达4基因工程过程涉及：? A载体和目的基因的分离 ? B限制酶切割载体和目的基因? CDNA重组体的转化与表达? DDNA重组体扩增、筛选与鉴定5限制酶：A能识别并切开DNA分子中某些碱基序列B酶辨认的碱基序列具有回文结构C酶辨认的碱基序列不具有倒转的重复顺序D能切断DNA的一条单链6限制酶作用于DNA；A可将单链DNA特异切开B可将双链DNA任意切开C酶切后可产生粘性末端D酶切后可产生平头末端7经限制酶切割的DNA，可产生：A粘性末端B平头末端C带有5? -磷酸基的末端D带有3? -羟基的末端8目的基因的获得，可以：? A直接从染色体DNA中分离? B利用已知序列人工合成? C提取mRNA，逆转录合成cDNA? D利用探针自基因文库中“钓”取9在分子克隆中，目的DNA的获取途径有：? A基因组DNA文库? B真核细胞染色体DNA? C真核细胞mRNA反转录获得的cDNA? D聚合酶链式反应? 10从基因组DNA文库或cDNA文库分离、扩增某一感兴趣基因的过程就是：? A基因克隆? B分子克隆C重组DNA技术? ? D构建基因组DNA文库11可用作克隆基因载体的DNA有：A细菌质粒DNAB噬菌体DNAC病毒DNA? D酵母人工染色体（YAC）12基因工程的载体有：? ApBR322? B大肠杆菌? CM13噬菌体? D昆虫病毒DNA13多拷贝质粒是指：? A细菌中存在多个同种质粒? B质粒中存在多个目的基因? C细菌中存在多种质粒? D在细菌中可自我复制的质粒14具有互补粘性末端的载体与目的基因组连接，需经：A变性B混合C退火DDNA连接酶催化15目的基因与载体连接成的重组体：? A有独立的繁殖能力? B无独立的繁殖能力? C两者用DNA连接酶连接? D连接键为非共价键16“尾接法”的连接方式涉及：? ApolyG? Bpo1yC? CTdT? DATP 17进行基因工程实验时，常用技术有：? A分子杂交技术? BDNA探针技术? C质粒重组技术? D基因调控技术18将重组DNA分子导人受体细菌的方法有：? A接合B转座C转化D转染19下述操作可能用于DNA克隆过程的是：ADNA的制备和酶解B不同来源DNA的拼接C核酸分子杂交 D细菌的生长和繁殖20关于质粒DNA的叙述正确的是：? A是基因组DNA的组成部分? B具有独立复制功能? C具有编码蛋白质的功能? D含有感兴趣的目的DNA ?三、填空题1自然界基因转移伴发重组有几种形式分别为_、_、_及_。2通过自动获取或人为地供给外源_，使细胞或培养的受体细胞获得新的_，这就是转化作用。3噬菌体感染宿主菌其核酸进入菌体的过程称为_，是_的一种形式。4由_和_介导的基因移位或重排，称为转座。5转座子是可从一个_位点转移至另一位点的分散的_序列。6基因重组有两种类型，即_和_。7依赖整合酶，在两个DNA序列的_发生的整合称_重组。8发生在同源序列间的重组称为_，又称为_。9 一个完整的基因克隆过程应包括：目的基因的获取，_的选择与改造，_的连接，重组DNA分子导入受体细胞，筛选出_。10限制性核酸内切酶是一类识别_的_核酸酶。11DNA经限制性内切酶切割后可产生两种切口：_和_。12科学家感兴趣的外源基因又称_，有两种类型：_和_。其来源途径有：化学合成，_，制备的基因组DNA及_技术。 13外源DNA离开染色体是不能复制的，将_与_连接，构建成重组DNA分子，外源DNA则可被复制。14根据采用的克隆载体性质不同，将重组DNA分子导人细菌的方法有_、_及感染。15DNA重组体筛选的直接筛选法的特点是：_；其又可分为：_、_和_。?四、名词解释1? 基因重组2? 接合作用3? 转化作用4? 转座5? 限制性核酸内切酶6? DNA克隆（基因工程）7? cDNA文库8? 基因组DNA文库?五、问答题1? 何谓基因克隆？简述基因克隆的基本过程。2? 目的基因有哪些主要来源（或途径）？3? 常用的限制性内切酶有哪些特点？4? 连接目的基因与载体的方式主要有哪些？参考答案1E? 2. A? 3. A? 4. D? 5. A? 6. C? 7. A? 8. B? 9. D? 10. D? 11. C? 12. D? 13. C? ?14. C? 15. D? 16. C? 17. B? 18. D? 19. B? 20. E? 21. B? 22. D? 23. D? 24. B? 25. C? 26. C? 27. E? 28. E? 29. E? 30. D? 31. C? 32. E? 33. C? 34. E? 35. E? 36. C? 37. A? 38. C? 二、X型选择题1ABCD? 2. AC? 3. BC? 4. ABCD? 5. AB? 6. CD? 7. ABCD? 8. ABCD? 9. ABCD? 10. ABC? 11. ABCD? 12. ACD? 13. AD? 14. BCD? 15. BC? 16. ABC? 17. ABC? 18. CD? 19. ABCD? 20. BC 三、填空题1接合作用，转化作用，转导作用，转座? 2DNA，遗传表型? 3感染，转化? 4插入序列，转座子? 5染色体，重复? 6位点特异的重组，同源重组? 7特异位点间，位点特异的? 8同源重组，基本重组? 9克隆基因载体，目的基因与载体, 含感兴趣基因的重组DNA转化细胞? 10DNA特异序列，内切? 11粘性末端，平头（或钝性）末端? 12目的基因，cDNA，基因组DNA，酶促合成cDNA，PCR? 13外源基因，载体? 14转化，转染? 15直接测定基因或基因表型，抗药性标志选择，标志补救选择，分子杂交法?四、名词解释1? 基因重组指整段DNA在细胞内或细胞间，甚至在不同物种之间进行交换，并能在新的位置上复制、转录和翻译。2? 接合作用指当细胞与细胞、或细菌通过菌毛相互接触时，质粒DNA就可从一个细胞（细菌）转移至另一细胞（细菌），这种类型的DNA转移称为接合作用。3? 转化作用指通过自动获取或人为地供给外源DNA，使细胞或培养的受体细胞获得新的遗传表型，这就是转化作用。4? 转座指在基因组内由可移动的DNA序列包括插入序列和转座子介导的基因移位或重排现象称为转座。5? 限制性核酸内切酶，就是识别DNA的特异序列，并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类核酸内切酶。限制性核酸内切酶存在于细菌体内，与相伴存在的甲基化酶共同构成细菌的限制-修饰体系，限制外源DNA、保护自身DNA，对细菌遗传性状的稳定遗传具有重要意义。限制性核酸内切酶分为三类，重组DNA技术中常用的限制性内切核酸酶为II类酶。6? DNA克隆（基因工程），就是应用酶学的方法，在体外将各种来源的遗传物质：同源的或异源的、原核的或真核的、天然的或人工的DNA，与载体DNA结合成一具有自我复制能力的DNA分子（即复制子），继而通过转化或转染宿主细胞、筛选出含有目的基因的转化细胞，再进行扩增、提取获得大量同一DNA分子，即DNA克隆，又称基因克隆、重组DNA或基因工程。7? cDNA文库指以mRNA为模板，利用反转录酶合成与mRNA互补的DNA，即cDNA；再复制成双链cDNA片段，与适当载体连接后转入受体菌。不同细菌包含了不同mRNA为模板的cDNA分子或片段，这样生长的全部细菌所携带的cDNA分子或片段就代表了整个组织工细胞表达的各种mRNA信息，即cDNA文库。8? 基因组DNA文库指利用限制性核酸内切酶和克隆载体技术，将人们感兴趣的基因片段转入不同的受体菌，使每个细菌内都携带一种重组DNA分子。这样存在于不同转化细菌内、由克隆载体所携带的所有基因组DNA片段的集合称基因组DNA文库。基因组DNA文库涵盖了基因组全部基因信息。五、问答题1? （1）基因克隆就是指应用酶学的方法，在体外将各种来源的遗传物质：同源的或异源的、原核的或真核的、天然的或人工的DNA，与载体DNA结合成一具有自我复制能力的DNA分子（即复制子），继而通过转化或转染宿主细胞、筛选出含有目的基因的转化细胞，再进行扩增、提取获得大量同一DNA分子，即基因克隆，又称DNA克隆、重组DNA或基因工程。（2）一个完整的DNA克隆过程应包括；目的基因的获取，基因载体的选择与构建，目的基因与载体的拼接，重组DNA分子导入受体细胞，筛选并无性繁殖含重组分子的受体细胞（转化子）。2? 目前获取目的基因大致有以下几种途径工来源：（1）人工合成? 对已知某种基因的核苷酸序列，或根据已知多肽链的氨基酸序列，推得编码这些氨基酸的核苷酸序列，再利用DNA合成仪通过化学合成原理合成目的基因。（2）从染色体DNA中直接分离? 主要针对原核生物，由于真核生物染色体DNA庞大繁杂，难以用此法。（3）cDNA? 从mRNA合成，在反转录酶作用下生成mRNAcDNA杂合分子，用碱降解mRNA，剩下的cDNA在DNA聚合酶催化下合成互补双链DN