益气升白汤治疗放化疗后白细胞减少症的实验研究.doc

滨州医学院学报 2010年 2 月第 33卷第 1 期BMU Jou rna,l Feb. 2010, Vo.l 33, N o. 1( 23(益气升白汤治疗放化疗后白细胞减少症的实验研究*王慧凯1周星1逄淑霞1林海燕21 滨州医学院中西医结合学院烟台市264003; 2滨州医学院中药药理学教研室摘要目的探讨益气升白汤治疗放化疗后白细胞减少症的效果。方法用腹腔注射环磷酰胺 的方法建 立小鼠白细 胞减少症模型; 益气升白汤灌胃 7 d, 测定用药前后白细胞总数变化; 测定小鼠血清超氧 化物歧化酶 ( SOD )含量, 做小鼠 游泳实验,取胸腺、脾脏, 对胸腺指数和脾脏指数进行统计学处理。结果游泳时间、胸腺指数和脾脏 指数等方面均有显著性差异。结论中药组与模 型组、西药组在 白细胞 总数变 化、血 清 SOD 含量、益气升白汤能明显改善放化疗后白细胞减少症。关键词益气升白汤; 白细胞减少症; 化疗中图分类号R557文献标识码A文章编号1001 9510( 2010) 01 0023 03E xper im en tal study of Y iq ish engba i decoction on leukopen ia after chemoth erapyW ANG H uika i1ZHOU X ing1PANG Shux ia1L IN H a iyan21 Schoo l ofM edic ine, B inzhou M edica lU niversity; 2 T each ing and R esea rch o f P harmaco logy, B inzhou M edical U nivers ityAb strac tO b jectiveT o probe the e ffect Y iqishengba i decoction on leukopen ia after chem otherapy from exper im enta l study.M ethod s The me thod o f the estab lishm en t of m ice L eukopen ia m ode l is intraper itoneal injection o f cyc lophospham ide. A fter Y iqishengba i decoc tion was Ig for 7 days, de term ina te the changes of to ta l In terleukin num be r be fo re and a fter using the decoction. D eterm inatethe con tent o f se rum SOD, do sw imm ing test in m ice, rem ove thymus and spleen, and ca lcu la te thymus index and sp leen index. Expe rim enta l data w as statistical ana lysed. Resu lts T he traditional Ch inese m ed ic ine group, m ode l g roup and w estern med ic ine group havesign ificant differences in the changes o f to tal Interleuk in number, serum concentration of SOD,sw imm ing tim e,thym us index andsp leen index. Con clusion Y iq ishengba i decoction can im prove leukopen ia c lea rly after chem otherapy.K ey wordsY iq ishengba i decoction, leukopen ia, chemo therapy白细胞减少症 ( leukopenia)为常见血液病, 临床室鉴定符合 中药鉴定学 # 1要求。超氧化物歧化多用鲨肝醇、利血生、瑞白等药物治疗, 但疗效较差,且副作用较大。近年来采用的粒细胞集落因子虽有一定疗效但价格昂贵、副作用大, 限制了药 物的推广。酶 ( SOD ) 试 剂盒 由南京 建成 生产, 批 号: 2009 0419; 环磷酰胺注射剂由上海华联制药有限公司, 生产批号: 2009306; 鲨肝醇由广东市桥制药厂 (番禺 )生产批号: 090309。益气升白汤是由鸡血藤、五味子、鹿角胶、补骨1. 2 仪器迈瑞 BC2300全 自动血 细胞分 析仪;脂、黄芪、党参、黄精、阿胶等十三味药物组成, 其功能为补血养阴, 调和阴阳。经多年的临床验证, 对放化疗后白细胞减少症患者具有显著效果。为探讨其721分光光度计 (上海第二分析仪器厂生产 ); 恒温箱; GL218A 高速离心机 (江苏医疗器械厂生产 ); 电动匀浆机, 微量天平; 秒表等。升高白细胞的可能机制, 为临床提供科学依据, 现将1. 3 制备方法 益气升白汤制备方法: 中药先用动物实验情况报道如下。1 材料与方法蒸馏水浸泡 30 m in, 武火煮至药沸后, 文火煎 2 次,每次 60m in, 合并 2次煎液, 6层纱布过滤, 80 % 恒1. 1 实验动物与药品试剂动物: 昆明种二月龄小温水中浓缩为 50 m ,l 浓度为 1 0 g /m l, 冰箱贮存。鼠 60只, 体重 ( 20 ! 2) g, 雌雄各半, 购自山东绿叶用时 水浴加 热。 & 环磷 酰胺制 备方法: 按 文献记制药有限公司。药品与试剂: 益气升白汤: 鸡血藤、载 2 8, 用生理盐水配制成浓度为 10 m g /m l的混悬五味子、鹿角胶、补骨脂、黄芪、党参、黄精、阿胶等十液, 冰箱贮存备用。 鲨肝醇片配制方法: 按文献记三味药物由烟台中医世家提供, 经中药药理学实验载 2 8, 用生理盐水配制成浓度为 1 m g /m l的混悬*基金资助项目: 滨州医学院大学生科技创新活动基金 ( BY2008DKCX09)通讯作者: 林海燕, E m a i:l m ailizhong 163. com( 24(滨州医学院学报 2010 年 2月第 33 卷第 1 期BMU Jou rna,l Feb. 2010, V o.l 33, No. 1液, 冰箱贮存备。1. 4 方法1. 4. 1 实验方法: 将 60只小鼠随机分成 4组: 空白数据进行处理, 计量资料以 x ! s表示, 采用方差分析和两两比较用 t检验。2 结果对照组、模型组、西药组、中药组。正常喂养 3 d后,2. 1 各组小鼠一般情况空白对照组小鼠毛发正除空白对照组外其余各组均腹腔注射环磷酰胺 100mg /kg体重, 1 次 /天, 连用 3 d造模, 断尾取血测白细胞总数。造模完成后空白 对照组、模型组、西药组、中药组分别灌胃生理盐水、生理盐水、鲨肝醇、益气升白汤, 均按 0 3 m l/10 g, 连续用药 7 d。1. 4. 2 检测指标及方法: 灌胃 7 d 后, 各组小鼠尾静脉取血, 测定白细胞总数。将各组小鼠全部称重,眶动脉和眶静脉取血 1 m l后, 棉球压迫止血, 测定血清 SOD含量 (按说明书进行 )。做小鼠抗疲劳实常, 皮肤无松弛, 活动正常, 精神正常, 活跃, 食欲旺盛; 模型组小鼠精神萎靡, 食欲低下, 运动少, 嗜睡;中药组和西药组造模后同模型组, 灌胃 3 d后情况改善, 到灌胃第 7 天小鼠 毛发有光泽, 皮肤恢复弹性, 活泼好动, 嗜睡减轻, 食欲增长, 大便干湿适中。模型组小鼠前后一般情况无显著性变化。2. 2 各实验数据及分析见表 1, 2。表 1 小鼠外周血白细胞含量的比较 ( x ! s, 109 /L )验, 每只小鼠尾部坠一 2 g重物, 在 40 cm ) 30 cm )20 cm 玻璃容器, 20% 水温下进行游泳实验, 秒表计时, 至小鼠浸入水下 10 s不能上浮为止, 记录数据。解剖小鼠, 取出胸腺和脾脏, 生理盐水洗净, 滤纸吸组别空白对照组模型组西药组n121212造模后白细胞总数6. 92 ! 1. 621. 97 ! 0. 821. 86 ! 0. 62灌胃 7 d 后白细胞总数7. 08 ! 1. 323. 85 ! 1. 406 89 ! 1 36#净血液。用微量天平测胸腺和脾脏重量, 计算胸腺指数和脾脏指数。计算公式为: 胸腺指数 (脾脏指数 ) = 胸腺 m g(脾脏 m g) /小鼠体重 ( 10 g ) 。注: 表示模型组、西药组、中药组与空白对 照组比较, P 0 01; #表示西药组、中药组与模型组比较 P 0 051. 5 统计学方法统计分析采用 SPSS13 0软件对表 2 小鼠血清 SOD 含量及对胸腺指数、脾脏指数的影响 ( x ! s )组别空白对照组模型组n1212SOD(U /m l)104 78 ! 5 3447 25 ! 3 67胸腺指数 ( m g/10 g)2 76 ! 1 450 46 ! 0 38脾脏指数 (m g /10 g)4 27 ! 1 264 32 ! 0 82游泳时间 (m in )31 46 ! 12 437 07 ! 4 06西药组1291 86 ! 4 329 09 ! 1 3810 34 ! 3 29中药组1299 35 ! 10 54 #9 96 ! 1 0313 34 ! 6 86注: 表示西药组、中药组与模型组比较, P 0 01; #表示中药组与西药组比较 P 0 053 讨论白细胞减少症 ( leukopenia)为常见血液病, 属中医虚劳、血虚范畴。西药多用鲨肝醇、利血生、瑞白等药物治疗, 但疗效较差, 且副作用较大。近年来采用的粒细胞集落因子虽有一定疗效但价格昂贵、副作用大, 限制了药物的推广。采用中西药结合治疗对提高升白类药物的治疗效果, 降低毒副作用, 增强机体免疫力, 具有很好的协同作用。但目前临床与甘温, 补益脾胃调节机体气机; 茯苓降逆化痰; 鸡血藤甘温补血行血; 补骨脂温肾助阳, 纳气; 黄芪益气固表; 黄精滋肾润肺, 补脾益气; 阿胶滋阴养血; 鹿角胶温补肝肾, 益精血; 五味子敛肺滋肾, 生津敛汗, 涩精止泻; 茯苓淡渗利湿助党参建脾运湿, 下济肾脏通阳利水; 黄芪益气助补骨脂、黄精、鸡血藤养阴生血。诸药共奏补气养血, 调和阴阳之功。现代药理学也证实方中党参、鸡血藤、阿胶等均有确切的升高白细实验未能很好的结合, 很多中药临床证明有效, 但未胞的作用 7。能进一步用实验数据来证明。白细胞减少症中医辨证属气血两虚, 脾肾不足证。中医认为: 肾藏精, 主骨生髓, 为先天之本; 脾主升清, 运化水谷, 为后天之本。肾气虚则精不足, 髓不满, 则生血无源; 脾气虚则运化无力, 精血 亏虚。益气升白汤为补气养血, 调和阴阳之剂。方中党参超氧化物歧化酶 ( o rgotein superox ide d ism utase,SOD)是一种源于生命体的活性物质, 能消除生物体 12, 13断地补充 SOD 具有抗衰老的特殊效果。 SOD 是中国卫生部批准的具有抗衰老、免疫调节、美容功能的物质之一。研究表明 SOD是化疗副作用的消除剂。2. 11 ! 0. 597. 32 ! 0. 68#中药组120 89 ! 0 491 38 ! 0 62在新陈代谢过程中产生的有害物质, 对人体不滨州医学院学报 2010年 2 月第 33卷第 1 期BMU Jou rna,l Feb. 2010, Vo.l 33, N o. 1( 25(表 2示西药组、中药组与模型组比较有统计学意义(P 0 01); 中药组与西药组比较有统计学意义 (P 0 05)。胸腺指 数、脾脏指 数亦均为重要 的免疫指标, 结果表明益气升白汤能显著提高小鼠免疫功能。本实验结果显示, 益气升白汤对造模后白细胞降低有明显改善作用。血清 SOD 含量、胸腺 指数、脾脏指数、游泳时间较模型组均有显著性差异。益气升白汤在胸腺指数方面较西药组有显著性差异。综上表明, 益气升白汤对放化疗所致的白细胞减少症有显著治疗效果, 根据实验结果推测可能与增强造血功能、提高机体免疫力、抗疲劳有关。少的预防及治疗作用 J. 河南肿瘤学杂 志, 2000 , 13 ( 4 ) : 238239. 5 周金黄, 李晓玉, 荣康泰. 免疫药理 学进展 M . 北京: 中国 科学技术出版社, 1993 : 185. 6 马增春, 高月, 刘永学, 等. 四物汤对环磷酰胺所致血虚证小鼠造血细胞作用的研究 J. 中国实验 方剂学杂 志, 2001, 7 ( 5) : 1315. 7 沈云辉, 陈长勋, 徐振晔. 双黄升白颗粒剂对小鼠白细胞 减少症的影响 J. 中国中药杂志, 2005, 30 ( 16) : 1275 1279. 8 沈海中, 刁东海, 赵文 明, 等. 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