水牛奶论文：水牛奶 酪蛋白 毛细管电泳 RP-HPLC 双向电泳.doc

水牛奶论文：南方水牛奶酪蛋白与其他乳源酷蛋白差异性的研究【中文摘要】本文采用功能蛋白质的研究方法从形态特征、定量分析及酪蛋白肽质指纹图谱等三个层次对水牛奶酪蛋白、乳牛奶酪蛋白和山羊奶酪蛋白的差异性分别进行了研究。为了分析自然状态下酪蛋白的形态结构与粒径分布,本文利用激光粒度分析仪和原子力显微镜(AFM)研究了三种乳源酪蛋白粒径分布,zeta电位及表面颗粒形态上的差异；利用毛细管区带电泳(CZE)法和反相高效液相色谱(RP-HPLC)法对酪蛋白进行分离和定量,研究了三种乳源酪蛋白在组成和含量上的差异；三种乳源酪蛋白在肽质量指纹图谱等精细结构上的差异研究主要采用双向电泳(2-DE)、基质辅助的激光解吸离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)和LTQ-Orbitrap液-质联用生物质谱等蛋白质组学技术。实验结果如下：1.粒径分析结果表明,水牛奶酪蛋白、乳牛奶酪蛋白和山羊奶酪蛋白的粒径分别分布在43.8-955nm、37.8-625.1nm和88.2-1484nm之间,其中40-300nm之间的粒径所占比例分别为54.5%、58%和74%。三种酪蛋白的平均zeta电位分别为-28.7mV、-25.1mV和-31.5mV。说明,水牛奶酪蛋白在粒径分布和平均zeta电位上均.【英文摘要】Several technologies were used to study morphological characteristics, quantitative analysis and peptide mass fingerprinting differences of caseins from water buffalo milk in South China and other breeds milk protein, respectively. Three caseins particles with the differences in particle size distribution, morphological structure, zeta potential and surface characteristics in natural state were analyzed by nanoparticles size analyzer and AFM. Caseins fractions were separated and quantitatively detected by C.【关键词】水牛奶 酪蛋白 毛细管电泳 RP-HPLC 双向电泳【英文关键词】water buffalo milk casein capillary electrophoresis RP-HPLC two-dimensional electrophoresis【索购全文】联系Q1：138113721 Q2：139938848 同时提供论文写作一对一辅导和论文发表服务.保过包发【目录】南方水牛奶酪蛋白与其他乳源酷蛋白差异性的研究摘要4-6ABSTRACT6-7缩略词表8-9目录9-12第一章 论述12-281.1 我国水牛奶行业的发展12-151.1.1 中国水牛奶的发展121.1.2 广东省水牛奶的发展简介12-131.1.3 水牛奶的理化性质13-141.1.4 水牛奶的营养成分14-151.1.5 水牛奶的发展优势151.2 酪蛋白简介15-231.2.1 酪蛋白的组成及性质161.2.2 酪蛋白的一级结构及特性16-181.2.3 酪蛋白胶体的结构模型18-221.2.4 酪蛋白的功能及应用22-231.3 酪蛋白组分分析检测技术23-271.3.1 双向电泳23-241.3.2 反相高效液相色谱24-251.3.3 毛细管电泳技术25-261.3.4 质谱技术26-271.4 本课题研究的目的和意义27-28第二章 三种不同巴氏杀菌奶酪蛋白粒径及表面结构观察的研究28-372.1 引言282.2 实验试剂及仪器28-292.2.1 实验材料与试剂28-292.2.2 主要仪器292.3 电泳所用试剂的配制292.4 实验方法29-312.4.1 酪蛋白的提取29-302.4.2 酪蛋白的SDS-PAGE电泳302.4.3 粒径与Zeta电位的测定30-312.4.4 原子力显微镜法观察312.5 结果与讨论31-362.5.1 SDS-PAGE电泳对酪蛋白的分离31-322.5.2 三种奶中酪蛋白的粒径分布对比32-332.5.3 三种奶中酪蛋白的Zeta电位结果33-342.5.4 三种奶中酪蛋白样品的AFM结果对比34-362.6 本章小结36-37第三章 基于毛细管区带电泳系统的南方水牛奶酪蛋白分析技术研究37-493.1 引言37-383.2 实验试剂及仪器383.2.1 材料与试剂383.2.2 主要仪器383.3 实验方法38-393.3.1 缓冲液的配制383.3.2 酪蛋白的提取38-393.3.3 标准溶液的配制及样品制备393.3.4 电泳条件393.4 结果与讨论39-483.4.1 分离条件的优化39-433.4.2 方法的回归方程、相关系数和线性范围433.4.3 方法的重复性实验43-443.4.4 加标回收率实验443.4.5 水牛奶酪蛋白的电泳分析44-463.4.6 水牛奶与荷斯坦牛奶酪蛋白的差异性分析46-473.4.7 水牛奶与山羊奶酪蛋白的差异性分析47-483.5 本章小结48-49第四章 RP-HPLC法对南方水牛奶酪蛋白组分的分析49-604.1 引言494.2 实验试剂及仪器49-504.2.1 主要试剂与材料49-504.2.2 主要仪器504.3 实验方法50-514.3.1 酪蛋白的提取504.3.2 标准溶液的配制504.3.3 酪蛋白样品制备504.3.4 色谱条件50-514.4 结果与讨论51-594.4.1 洗脱梯度的探讨51-534.4.2 酪蛋白的定性53-544.4.3 乳源酪蛋白组分的分离及差异性分析54-574.4.4 RP-HPLC对乳源酪蛋白分析的方法学考察57-584.4.5 酪蛋白组分含量的测定58-594.5 本章小结59-60第五章 双向电泳和MALDI-TOF MS对水牛奶酪蛋白与其他乳源奶酪蛋白差异性的研究60-715.1 引言605.2 实验试剂与仪器60-615.2.1 主要试剂及材料60-615.2.2 实验设备与仪器615.3 实验方法61-665.3.1 储备液的配制61-625.3.2 临用前配置的溶液62-635.3.3 酪蛋白样品的处理63-645.3.4 双向电泳64-655.3.5 胶内酶解65-665.3.6 质谱鉴定665.4 结果与讨论66-705.4.1 水牛奶酪蛋白的双向电泳结果665.4.2 乳源酪蛋白差异性的比较66-685.4.3 差异蛋白质的质谱鉴定68-705.5 本章小结70-71第六章 LTQ-Orbitrap液-质联用技术对水牛奶酪蛋白肽指纹图谱的研究71-826.1 引言716.2 实验试剂及仪器71-726.2.1 实验材料与试剂71-726.2.2 主要仪器726.3 蛋白酶解和质谱溶液配制72-736.4 实验方法73-746.4.1 酪蛋白的提取736.4.2 SDS-PAGE电泳736.4.3 蛋白酶解73-746.4.4 质谱分析746.5 结果与讨论74-816.5.1 水牛奶酪蛋白的总离子流色谱74-766.5.2 _(s1)-酪蛋白肽指纹谱的测定76-776.5.3 _(s2)-酪蛋白肽指纹谱的测定77-796.5