索氏抽提法测定粗脂肪含量.doc

前言索氏抽提法 脂肪广泛存在于许多植物的种子和果实中，测定脂肪的含量，可以作为鉴别其品质优劣的一个指标。脂肪含量的测定有很多方法，如抽提法、酸水解法、比重法、折射法、电测和核磁共振法等。目前国内外普遍采用抽提法，其中索氏抽提法（Soxhlet extractor method）是公认的经典方法，也是我国粮油分折首选的标准方法。 图1 索氏提取器 本实验采用索氏抽提法中的残余法，即用低沸点有机溶剂（乙醚或石油醚）回流抽提，除去样品中的粗脂肪，以样品与残渣重量之差，计算粗脂肪含量。由于有机溶剂的抽提物中除脂肪外，还或多或少含有游离脂肪酸、甾醇、磷脂、蜡及色素等类脂物质，因而抽提法测定的结果只能是粗脂肪。粗脂肪 脂类是油、脂肪、类脂的总称。食物中的油脂主要是油和脂肪，一般把常温下是液体的称作油，而把常温下是固体的称作脂肪。脂肪由C、H、O三种元素组成，是由一分子的甘油和三分子的脂肪酸结合而成。 脂肪是由甘油和脂肪酸组成的三酰甘油酯，其中甘油的分子比较简单，而脂肪酸的种类和长短却不相同。脂肪酸分三大类：饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸、多不饱和脂肪酸。 脂肪可溶于多数有机溶剂，但不溶解于水。动物脂肪以含饱和脂肪酸为多，在室温中呈固态。相反，植物油则以含不饱和脂肪酸较多，在室温下呈液态。类脂则是指胆固醇、脑磷脂、卵磷脂等。综合其功能有：脂肪是细胞内良好的储能物质，主要提供热能；保护内脏，维持体温；协助脂溶性维生素的吸收；参与机体各方面的代谢活动等等。脂肪是由甘油和脂肪酸组成的三酰甘油酯，其中甘油的分子比较简单，而脂肪酸的种类和长短却不相同。因此脂肪的性质和特点主要取决于脂肪酸，不同食物中的脂肪所含有的脂肪酸种类和含量不一样。自然界有40多种脂肪酸，因此可形成多种脂肪酸甘油三酯；脂肪酸一般由4个到24个碳原子组成。 图2 脂肪分子结构脂类是指一类在化学组成和结构上有很大差异,但都有一个共同特性,即不溶于水而易溶于乙醚、氯仿等非极性溶剂中的物质。通常脂类可按不同组成分为五类，即单纯脂、复合脂、萜类和类固醇及其衍生物、衍生脂类及结合脂类。脂类物质具有重要的生物功能。脂肪是生物体的能量提供者。脂类也是组成生物体的重要成分，如磷脂是构成生物膜的重要组分，油脂是机体代谢所需燃料的贮存和运输形式。脂类物质也可为动物机体提供溶解于其中的必需脂肪酸和脂溶性维生素。某些萜类及类固醇类物质如维生素A、D、E、K、胆酸及固醇类激素具有营养、代谢及调节功能。有机体表面的脂类物质有防止机械损伤与防止热量散发等保护作用。脂类作为细胞的表面物质，与细胞识别，种特异性和组织免疫等有密切关系。1、 实验目的 1、了解索氏抽提法测定粗脂肪含量的原理 2、掌握索氏抽提法测定粗脂肪含量操作方法。 3、测定脂肪的含量，可以作为鉴别样品品质优劣的一个指标。2、 实验原理 1、脂肪含量的测定有很多方法，如抽提法、酸水解法、比重法、折射法、电测和核磁共振法等。 2、目前国内外普遍采用抽提法，其中索氏抽提法（Soxhlet extractormethod）是公认的经典方法，也是我国粮油分折首选的标准方法。 3、本实验采用索氏抽提法中的残余法，即用低沸点有机溶剂（乙醚或石油醚）回流抽提，除去样品中的粗脂肪，以样品与残渣重量之差，计算粗脂肪含量。由于有机溶剂的抽提物中除脂肪外，还或多或少含有游离脂肪酸、甾醇、磷脂、蜡及色素等类脂物质，因而抽提法测定的结果只能是粗脂肪。3、 实验材料、主要仪器和试剂1、实验材料 油料作物种子(花生)、中速滤纸.2、仪器 1）SZF-06A脂肪仪 2）干燥器(直径1518cm，盛变色硅胶) 3）不锈钢镊子（长20cm） 4）培养皿 5）分析天平 6）称量瓶 7）恒温水浴 8）烘箱3、试剂 无水乙醚或低沸点石油醚（A.R.）4、 操作步骤 1、准备 将滤纸切成4cm4cm，叠成一边不封口的纸包，用硬铅笔做好记号，将滤纸包称重（记作a）。 2、包装和干燥 将研碎好的花生,称取约0.2g 左右的样品放入上述已称重的滤纸包中装入，封好包口称重（记作b）。 3、抽提 将装有样品的滤纸包用长镊子放入抽提筒中，向其中注入约20ml的无水乙醚，使样品包完全浸没在乙醚中。连接好抽提器各部分，接通冷凝水水流，在恒温水浴中进行抽提，调节水温为55-60，使冷凝下滴的乙醚成连珠状，抽提至抽取筒内的乙醚用滤纸点滴检查无油迹为止（约1h）。抽提完毕后，用长镊子取出滤纸包，提取瓶中的乙醚另行回收。 4、称重 待乙醚挥发之后，将滤纸包置于65烘箱中干燥8min，放入干燥器冷却至恒重为止（记作c）。5、 结果与计算 粗脂肪含量 = b-c / b-a 100% 式中：a：滤纸包重（g） b：滤纸包和烘干样重（g） c：滤纸包和抽提后烘干残渣重（g） 1、实验数据（如表一） 样品 质量/g a 0.2039 b 0.4022 c 0.3202表一 2、 数据处理 粗脂肪含量=0.0820/0.1983 100% = 41.35% 3、数据分析（1）由于仪器及操作时间的关系，可能样品中的脂肪未被完全提取出来，可能造成结果偏小。（2）最后烘干可能没有烘干完全，造成结果偏小。（3）乙醚中可能含有水分，会把样品中的无机物或糖类等抽出，造成结果偏大。（4）样品和醚浸出物在烘箱中干燥时时间过长，不饱和的脂肪酸受热可能氧化而增加质量，造成结果偏小。（5）反复加热可能会因脂类氧化而增重，导致结果偏小。六、总结 本次实验是没有分小组，都是由自己独立完成的，本次实验利用索氏抽提法，以前是做过这个实验的，所以本次实验对于我们来说相对简单，即使简单，在操作上还是不能非常完美的完成。可能跟我们实验的经验不够有关，结果也有偏差。即使不是十分准确，但是本次实验也给我积累了经验，如何正规的操作已经在我心里留下了印象，如果有下次试验我相信我一定能很好地完成。七、实验心得 在做实验前,一定要将课本上的知识吃透,因为这是做实验的基础,否则,在老师讲解时就会听不懂,这将使你在做实验时的难度加大,浪费做实验的宝贵时间老师还会根据自己的亲身体会,将一些课本上没有的知识教给我们,拓宽我们的眼界,使我们认识到这门课程在生活中的应用是那么的广泛.真正是我们受益匪浅。在实验的过程中我们要培养自己的独立分析问题，和解决问题的能力。培养这种能力的前题是你对每次实验的态度。如果你在实验这方面很随便，抱着等老师教你怎么做，拿同学的报告去抄，尽管你的成绩会