衄咽胶囊渗漉提取工艺优选的研究.doc

衄咽胶囊渗漉提取工艺优选的研究衄咽胶囊渗漉提取工艺优选的研究更新日期： 06-04 作者：唐灿， 陈隆晖， 唐珊珊， 杨洁芳， 张丹， 兰才， 李建， 曾肖霞 【关键词】 衄咽胶囊；,渗漉法；,黄芩苷,摘要：目的建立衄咽胶囊提取止血有效成分黄芩苷的方法。方法以黄芩苷为指标，采用正交设计法，运用紫外可见光分光光度计测定，对衄咽胶囊渗漉提取工艺进行优选研究。结果加入6倍于药材量的80%的乙醇，浸泡24 h, 渗漉96 h，黄芩苷收率达到(12.242.691)；稳定性实验RSD=1.18%；精密度实验RSD=0.788%(n=6)；回收率实验，平均回收率98.9%，RSD=1.10%。结论优选的渗漉提取工艺稳定可行。关键词：衄咽胶囊； 渗漉法； 黄芩苷 Research on the Percolation Extract Process of Nyan Capsules Abstract：ObjectiveTo establish the Percolation Extract Method of Nyan Capsules.MethodsBy the orthogonal design and Ultraviolet-visible absorption spectrophotometry ,taking the gain rate of Baicalin as the index.The Percolation extract process was optimized.ResultsThe factors influencing the alcohol-percolation were as follows:6 times amount of 80% alcohol was added,soaked for 24hours and percolated for 96hours,the gain rate of baicalin came up to (12.242.691)%;the RSD% of precision experiments(baicalin) was 0.788(n=6);the average recovery of baicalin was 98.9%, RSD% was 1.10;the RSD% of stabilize experiments(baicalin) was 1.18.ConclusionThe optimized process is stable and feasible.Key words：Nyan Capsules； Percolation extract method； Baicalin 衄咽胶囊为泸州医学院附属第二医院耳鼻喉科陈隆晖副主任医师多年治疗鼻出血的经验方，主要由黄芩（炒炭）、石斛、茵陈等中药组成，具有益气健脾、凉血止血功效，临床主要适用于鼻衄、牙龈出血，尤其对肝肾、肺脾虚型鼻出血证疗效较优。考虑组成药物的性质、临床疗效、大生产的可行性等多方面的因素，本提取工艺的理论依据是：黄芩(炒炭)一方面增强止血作用，另一方面杀酶保苷。其主要成分之一为黄芩苷，黄芩苷溶于热水，但不溶于冷水或温水。若加水煎煮，则会出现温度高时溶解，温度较低时溶液析出沉淀，不利于制备，况且黄芩苷易溶于乙醇；石斛主含石斛碱,易溶于乙醇，石斛碱为石斛益气养阴,治疗慢性咽炎的主要有效成分；茵陈主要有效成分为茵陈色原酮、6,7二甲氧基香豆素，具有显著的利胆作用，易溶于乙醇。因此较合理的提取方法是采用乙醇渗漉提取黄芩、石斛、茵陈有效成分。1 仪器与试药UV9100紫外可见光分光光度计(北京瑞利)、不锈钢渗漉筒、薄膜旋转蒸发器、减压烘箱、减压干燥器、定量滤纸、黄芩苷化学对照品(供含量测定用，07159909,中国药品生物制品检定所)、无水乙醇、甲醇均为分析醇、重蒸馏水(自制)、黄芩炭、茵陈、石斛药材购自泸州市宝光医药有限公司白招牌大药房。2 方法与结果2.1 处方组成(每日用量)黄芩炭6 g，茵陈6 g，石斛3 g。2.2 工艺优选2.2.1 黄芩炭、茵陈、石斛采用乙醇渗漉提取有效成分，以黄芩苷收率为指标考察乙醇渗漉提取的最佳工艺条件。准确称取每份实验黄芩炭6 g，茵陈6 g，石斛3 g，按L9(34)正交表，总共9份实验，另设1份缺黄芩炭的空白对照实验。见表1。2.2.2 制取样品干浸膏粉黄芩炭、茵陈、石斛，按L9(34)正交表安排乙醇渗漉实验，收取85%的渗漉液，回收乙醇，药液减压烘干，粉碎成20目粗粉，供黄芩苷含量测定用。2.2.3 黄芩苷含量测定方法标准曲线：精密称取黄芩苷5.2 mg，用甲醇定容于25 ml容量瓶中, 精密吸取20 ml该溶液水浴挥干, 用无水乙醇定容于25 ml容量瓶中,得到0.166 4 mg/ml的溶液。在=274 nm处，用紫外可见光分光光度仪测定，黄芩苷在0.033 20.166 4 mg/ml范围内呈现良好的线性关系，回归方程为：A=0.004 815+0.230 8C, r=0.999 6。稳定性实验：取9号渗漉液，每隔30 min测定1次，黄芩苷吸收度在4 h之内测定是稳定的，RSD=1.18%。精密度实验：取9号渗漉液，连续测定6次，黄芩苷吸收度RSD=0.788%(n=6)。回收率实验：精密称取空白对照实验干浸膏粉末5份，分别精密加入一定量的黄芩苷对照品，按供试品的制备与测定方法进行含量测定。测得数据见表2。样品测定：精密称取渗漉干浸膏粉末约2 g，加入70%乙醇溶液150 ml，回流至无色，滤液挥干，加入甲醇溶解并定容于25 ml容量瓶中，取溶液2 ml，水浴挥干,加入无水乙醇定容于10 ml容量瓶中，在上述条件下测定黄芩苷含量。结果见表3。表1 考察的因素和水平(略)表2 回收率实验(略)表2 乙醇渗漉工艺L9(34)正交设计实验(略)影响渗漉提取工艺因素由大到小排列C A BD，最佳工艺为A1B3C3D3。按 A1B3C3D3工艺复核, 黄芩苷收率为(12.242.691),证明该工艺可行。即准确称取黄芩炭、茵陈、石斛，加入6倍于药材量的80%的乙醇，浸泡24 h, 渗漉96 h,收取85%的渗漉液，回收乙醇,药液贮存备用。 3 讨论按 A1B3C3D3工艺条件，加入6倍