8实验八 蜂蜜中掺假的检测.doc

黄山学院教案周次日期课时安排3课时课题实验八 蜂蜜中掺假的检测重点难点教学目标1、了解蜂蜜中常见的掺假物的种类。2、掌握检测蜂蜜中掺假物的方法。教学方法教学手段1要求学生实验前认真预习实验内容，实验前教师检查并批改预习报告，了解学生预习情况。2实验前先进行重点的讲解和示范基本操作、实验步骤中的注意事项，实验过程中巡回指导。教学过程教学过程一、蜂蜜介绍蜂蜜中含葡萄糖和果糖，约占65-80%；蔗糖极少，不超过8%；水分16-25%；糊精和非糖物质、矿物质、有机酸等含量在5%左右。此外，还含有少量的酵素、芳香物质和维生素等。蜜源植物品种不同，蜂蜜的成分也不一样。新鲜成熟的蜂蜜，为粘稠的透明或半透明的胶状液体，有的蜂蜜在较低的温度下放置，可以逐渐凝结成晶体。蜜的比重为1.401-1.443。二、实验步骤：（一）、蜂蜜中掺蔗糖人为将蔗糖熬成浆状掺入蜂蜜中出售是最常见的掺假现象，其特点是色泽鲜艳明亮，多为浅黄色，味淡，回味短，有一种糖浆味。1蒽酮比色法蒽酮-硫酸水溶液与碳水化合物生成一种蓝绿色物质,是糖类特有反应。该反应曾用于测定果蔬中的蔗糖，也有人将这一特有反应用于蜂蜜中蔗糖的测定,可不经分离而直接测定蜂蜜中的蔗糖含量。其原理为蔗糖在浓硫酸作用下先水解为单糖分子，并迅速脱水成糠醛衍生物，糠醛衍生物再与蒽酮反应生成有色化合物，以比色法测定蔗糖的含量。工作中先将蜂蜜样品用稀碱煮沸一定时间,破坏掉葡萄糖和果糖,剩下的蔗糖与蒽酮-硫酸水溶液在沸水浴中显色。然后测定其吸光度,再通过工作曲线即可求出蔗糖的含量。（1）准确称取蜜样1g，加水定容至50mL、混匀。吸取此稀释蜜样5mL于100mL容量瓶中，加水3mL，再加4mL浓度为2mol/L的KOH溶液，混匀后于沸水中加热5min，冷却后用水定容至100mL。于试管中取此稀释液1mL，加水1mL、蒽酮试剂6mL、混匀，置沸水浴中3.5min后，迅速冷却。用1cm比色皿于635nm下测吸光度。（2）标准曲线制备 取蔗糖标准使用液（100g/mL）0.0,0.2 mL,0.4mL,0.6 mL,0.8 mL,1.0mL分别于试管中，各加水补足至2mL，如上法（再加蒽酮试剂6mL、混匀，置沸水浴中3.5min后，迅速冷却。用1cm比色皿于635nm下测吸光度，）显色测吸光度，绘制标准曲线。（3）结果计算蜂蜜中蔗糖含量（%）按下式计算：蜂蜜中蔗糖含量=（m1V1V3）/(V2V4m10001000) 100%式中m1由标准曲线查得蔗糖含量，ug；V1第一次稀释体积，50mL;为使单位化统一V2吸取稀释蜜样毫升数，5mL；V3第二次稀释定容体积，100 mL；V4显色时吸取的检液体积，1 mL；m 称取的蜂蜜样品质量，1 g。 （4）判别 正常蜂蜜中蔗糖含量约为5%以下，个别品种可能达8%，通过对比克判别蜂蜜中是否掺假有蔗糖。本法灵敏度高，可检出测样中掺0.5%蔗糖的含量。注意，蒽酮试剂必须现配现用。【溶液中的物质的量浓度与体积变化的等式： 溶液中的溶质质量分数与溶液质量变化的等式：】2.硝酸银快速检验法 取蜜样2份（各1g）分别置于两支试管中，各加水4mL、混匀。其中A试管加2%AgNO3溶液2滴，B试管加1% AgNO3溶液2滴，观察有无白色絮状物产生。判别：A管中有白色絮状物产生，蔗糖含量疑为1%以上；B管中如有白色絮凝物产生，蔗糖含量疑为4%以上。（二）、蜂蜜中掺人工转化糖 蔗糖在稀酸作用下可转化为含葡萄糖和果糖的糖浆，俗称转化糖浆或果葡糖浆。掺有人工转化糖浆的蜂蜜稀薄、粘度小，波美度大，可通过检测CL-的存在予以判别。试验方法：取1g蜜样于试管中，加水5mL混匀后，加12滴5% AgNO3指示剂，如呈白浊状，疑掺有人工转化糖（与正常蜂蜜对照）。（三）、蜂蜜中掺淀粉类物质蜂蜜中如掺加有米汤、糊精及淀粉类物质，外观浑浊不透明，蜜味淡薄，用水稀释后溶液浑浊不清。试验方法：取蜂蜜2g于试管中。加水10mL。加热至沸后冷却，加0.1mol/L碘液2滴，观察颜色变化。同时做正常蜂蜜对比试验。判别：如有蓝色、蓝紫色或红色出现，疑为掺有淀粉类物质。（四）、蜂蜜中掺羧甲基纤维素钠羧甲基纤维素钠（CMC-Na）是一种增稠剂，掺加入蜂蜜后，蜂蜜颜色变深，粘稠度变大。试验方法：取蜂蜜10g于另一烧杯中，加入95%酒精20mL。充分搅拌均匀，即有白色絮状物析出，取白色絮状物2g于另一烧杯中，加热水100mL，搅拌均匀，冷却后备用。取上述备检液30mL于锥形瓶中，加盐酸3mL，观察有无白色沉淀产生。另取上述备液50mL于另一锥形瓶中，加1%CuSO4溶液100mL，观察有无淡蓝色绒毛状沉淀产生。判别：若上述两项试验均呈阳性，则被检蜂蜜疑掺有羧甲基纤维素钠。试剂的准备：蒽酮试剂：取蒽酮试剂0.4g溶于H2SO4(84份浓H2SO4与16份水混合)100mL溶液中。2mol/L的KOH溶液：称取KOH固体11.2g于100ml容量瓶定容【KOH分子量56.1,5%的AgNO3 溶液：称取5gAgNO3晶体于100ml容量瓶定容三、实验结果：1、现象：A、B两管均无白色絮状物产生，所以此蜂蜜中不掺有蔗糖。2、现象：滴5% AgNO3指示剂后，无白浊状沉淀产生，因此此蜂蜜中不含有转化糖。3、现象：与正常蜂蜜做对照，无蓝色、蓝紫色或红色出现，所以没有掺杂淀粉类物质。4、现象：第一次无白色沉淀产生，第二次无淡蓝色绒毛状沉淀产生，两次试验均为阴性，因此蜂蜜内不含有羧甲基纤维素钠。综上所述，此蜂蜜中没有添加蔗糖、转化糖、饴糖、淀粉类物质、羧甲基纤维素钠等物质。课后作业教学后记 数据处理：蔗糖标准使用液（100g/mL）0.0,0.2 mL,0.4mL,0.6 mL,0.8 mL,1.0mL于635nm下测吸光度蔗糖标准使用液 ml0.00 0.20 0.40 0.60 0.80 1.00 吸