生物制品课堂练习题.doc

课堂练习题一、 名词解释1 血液制品：由健康人的血液或经特异免疫的人血浆，经分离、提纯或由重组DNA技术制成的血浆蛋白组分，以及血液细胞有形成分统称为血液制品。如人血白蛋白、人免疫球蛋白、人凝血因子（天然或重组的）。用于治疗和被动免疫预防。2 人血白蛋白：系由健康人血浆，经低温乙醇蛋白分离法或经批准的其他分离法提纯，并经60 10小时加温灭活病毒后制成的血浆蛋白制剂。含适宜稳定剂，不含防腐剂和抗生素。3ALT：丙氨酸氨基转移酶4真空冷冻干燥是先将湿料冻结到共晶点温度以下,使水分变成固态的冰,然后在较高的真空度下,使冰直接升华为水蒸气,再用真空系统中的水汽凝结器将水蒸气冷凝,从而获得干燥制品的技术。5分段盐析不同的蛋白质具有不同的盐析浓度，利用这一性质，采用逐渐加大盐浓度的方法，使同一溶液中的不同蛋白质从溶液中分段析出，达到分离的目的.二、填空题1国内血液制品都有哪些种类： 、 、 。凝血因子制剂、免疫球蛋白制剂、白蛋白类制剂2影响蛋白质沉淀反应的因素有 、 、 的影响、 的影响及ph控制。乙醇浓度 离子强度 温度 蛋白浓度3国际上对离心机的分类方法有三种：按_分、按_分和按_分。用途，转速， 结构4升高温度可使透析速度_。 加快5透析的动力是_。 扩散压6透析时使用膜是_。 半透膜7盐析中最常用的盐是_。 硫酸铵8当补料与调pH发生矛盾时，采用加_调pH。 上升9菌体自溶，pH_。 升高10在糖代谢中，糖缺乏，pH_，是补料的标志之一。 上升11冻干百日咳菌种时的保护剂:_。 脱脂牛奶12培养百日咳杆菌的培养基为_。 鲍-姜培养基13百日咳 - 预防有_、_、_。 控制传染源、保护易感人群、药物预防14百日咳 - 临床表现为_、_、_。卡他期、痉咳期、恢复期15百日咳（Pertussis；whooping cough），是由_所致的急性呼吸道传染病。百日咳杆菌16百日咳疫苗有两类，一类为_，一类为含有不同保护性抗原成分的_。全细胞百日咳疫苗（WPV），无细胞百日咳疫苗（APV）。17APV是_,去除和_(主要是内毒素)和_(主要是致敏物质),从而降低了不良反应。组分疫苗,减少了毒性,反应原性三、单选题1. 离心机按结构分类有 A.制备型离心机 B.细胞涂片离心机 C.制备分析离心机 D.高速冷冻离心机 本题答案：BD 2. 制备无细胞百日咳疫苗原液的离心方法有 A.差速离心法 B.高速离心法 C.速度区带离心法 D.梯度密度离心法 本题答案：ACD 3. 离心机按转速分类有 A.台式离心机 B.高速离心机 C.超速离心机 D.低速离心机 本题答案：BCD 4. 离心机按用途分类有 A.制备型离心机 B.低速离心机 C.制备分析离心机 D.高速离心机 本题答案：AC5. 常用消泡剂种类有 A.泡敌 B.乙醇 C.聚二甲基硅氧烷 D.豆油 本题答案：ACD 6. 细菌发酵罐必须具备的条件 A.发酵罐必须具备良好的传质、传热和混合性能 B.密闭较好，避免杂菌污染 C.能够长期连续运转 D.容器内部光滑、无死角、减少微生物或细胞沉积 本题答案：ACD 7. 发酵罐基本结构 A.罐体 B.搅拌部分 C.加温冷却部分 D.通气部分 本题答案：ABCD 8. 百日咳杆菌抗原性物质主要有 A.百日咳毒素（PT） B.丝状血凝素（FHA） C.凝集原Agg D.69kD外膜蛋白（百日咳粘着素）PRN 本题答案：ABCD四、 简答题1简述如何对分析袋进行处理及保存？ 用前必须除去。可先用50乙醇煮沸1小时，再依次用50乙醇、0.01 mol/L碳酸氢钠和0.001 mol/L EDTA溶液洗涤，最后用蒸馏水冲洗即可使用。使用后的透析袋洗净后可存于4蒸馏水中，若长时间不用，可加少量NaN2，以防长菌。洗净凉干的透析袋弯折时易裂口，用时必须仔细检查，不漏时方可重复使用。2血浆蛋白分离纯化方法有几种？（1）根据蛋白质溶解度不同的分离方法蛋白质的盐析等电点沉淀法低温有机溶剂沉淀法（2）根据蛋白质分子大小的差别的分离方法透析与超滤凝胶过滤法（3）根据蛋白质带电性质进行分离电泳法离子交换层析法（4）根据配体特异性的分离方法亲和层析3乙醇引起pr沉淀的主要原因？1）改变介质的介电常数乙醇是低介电常数物质，加入后，使水溶液的介电常数降低；根据电学库仑定律原理，介电常数的降低将增加两个相反电荷之间的吸引力，Pr分子表面可解离基团的离子化程度减弱，水化程度降低，促进Pr分子的聚集和沉淀。2）与Pr争夺水化层，致使Pr聚集并沉淀。4常用的几种病毒灭活方法及相应原理？1） 巴氏消毒法白蛋白溶液需经60-0.5连续加温1011小时，通常在除菌过滤后或分装到最终容器玻璃小瓶后进行。2） 干燥（冻干）制品得加热处理3） 冻干制品在加湿条件下加热处理（蒸汽加热）在相同的温度下，在开始加热处理前加入水蒸气可获得较高的病毒灭活效果。4） 有机溶剂/ 去污剂（S/D）法 5） 低PH 法 5简述冷冻干燥的一般过程? 冷冻干燥过程一般分三步进行，即预冻结 升华干燥（或称第一阶段干燥）解析干燥（或称第二阶段干燥）。 6引起溶氧异常下降，可能有哪几种原因？ 污染好气性杂菌，大量的溶氧被消耗掉，可能使溶氧在较短时间内下降到零附近，如果杂菌本身耗氧能力不强，溶氧变化就可能不明显。 菌体代谢发生异常现象，需氧要求增加，使溶氧下降； 某些设备或工艺控制发生故障或变化，也可能引起溶氧下降，如搅拌功率消耗变小或搅拌速度变慢，影响供氧能力，使溶氧降低。 泡沫。 7发酵过程泡沫产生的原因有哪些？ 通气搅拌的强烈程度通气大、搅拌强烈可使泡沫增多，因此在发酵前期由于培养基营养成分消耗少，培养基成分丰富，易起泡。应先开小通气量，再逐步加大。搅拌转速也如此。 培养基配比与原料组成培养基营养丰富，黏度大，产生泡沫多而持久 .菌种、种子质量和接种量菌种质量好，生长速度快，可溶性氮源较快被利用，泡沫产生几率也就少。菌种生长慢的可以加大接种量 灭菌质量培养基灭菌质量不好，糖氮被破坏，抑制微生物生长，使种子菌丝自溶，产生大量泡沫，加消泡剂也无效。 8起泡的危害主要有哪些？ 降低生产能力在发酵罐中，为了容纳泡沫，防止溢出而降低装量 引起原料浪费如果设备容积不能留有容纳泡沫的余地，气泡会引起原料流失，造成浪费。 影响菌的呼吸如果气泡稳定，不破碎，那么随着微生物的呼吸，气泡中充满二氧化碳，而且又不能与空气中氧进行交换，这样就影响了菌的呼吸。 引起染菌由于泡沫增多而引起逃液，于是在排气管中粘上培养基，就会长菌。随着时间延长，杂菌会长入发酵罐而造成染菌。大量泡沫由罐顶进一步渗到轴封，轴封处的润滑油可起点消泡作用，从轴封处落下的泡沫往往引起杂菌污染。 五、分析题 1. 论述盐析的影响因素有哪些？ （1) 蛋白质的浓度：高浓度的蛋白质用稍低的硫酸铵饱和度沉淀，若蛋白质浓度过高，易产生各种蛋白质的共沉淀作用。低浓度的蛋白质，共沉淀作用小，但回收率降低。较适中的蛋白质浓度是2.53.0，相当于25 mg/mL30mg/mL。（2) pH值对盐析的影响：在等电点处溶解度小，pH值常选在该蛋白质的等电点附近。（3) 温度的影响：对于蛋白质、酶和多肽等生物大分子，在高离子强度溶液中，温度升高，它们的溶解度反而减小。在低离子强度溶液或纯水中蛋白质的溶解度大多数还是随浓度升高而增加的。一般情况下，可在室温下进行。但对于某些对温度敏感的酶，要求在04下操作，以避免活力丧失。 2. 论述制备无细胞百日咳疫苗原液时的离心方法有哪些？ （分） 差速离心法通过逐步增加相对离心力，使一个非均相混合液内形状不同的大小颗粒分步沉淀。 速度区带离心法离心前，离心管内先装入蔗糖、甘油、CsCl、Percoll等密度梯度介质，待分离样品铺在梯度液的顶部，离心管底部或梯度层中间，同梯度液一起离心，利用各颗粒在梯度液中沉降速度或漂浮速度的不同，使具有不同沉降速度的颗粒处于不同