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第一章 基因工程第一节 基因工程概述(时间:30分钟满分:50分)考查知识点及角度难度及题号基础中档稍难基因工程的基本工具2、3、4、51基因工程的基本操作程序678一、选择题(共6小题,每小题5分,共30分)1下列有关基因工程的说法中,正确的是 ()。a限制性核酸内切酶具有专一性,只识别gaattc序列b作为基因工程的载体必备条件之一是必须有单一限制性核酸内切酶的多个切点c限制性核酸内切酶的作用部位是特定的两个核苷酸之间的氢键d基因工程可以定向的改造生物的性状,但不能创造新的性状解析限制性核酸内切酶是一类酶,而不是一种酶,不同的酶有不同的识别序列和酶切位点;限制性核酸内切酶切割的是特定部位的磷酸二酯键;作为载体的条件之一是有多个限制性核酸内切酶的单一切点;基因工程是将自然界中存在的某种生物的基因,转移到其他生物体内表达,并没有创造新性状。答案d2下列关于限制性核酸内切酶的说法中,正确的是 ()。a限制性核酸内切酶广泛存在于各种生物中,但微生物中很少b一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列c不同的限制性核酸内切酶切割dna后都会形成黏性末端d限制性核酸内切酶的作用部位是特定核苷酸形成的氢键解析此题考查限制性核酸内切酶的有关知识。限制性核酸内切酶能识别双链dna的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开;dna分子经限制性核酸内切酶切割后会形成黏性末端和平口末端两种形式。答案b3下列关于dna连接酶的叙述中,正确的是 ()。催化相同黏性末端的dna片段之间的连接催化不同黏性末端的dna片段之间的连接催化两个黏性末端互补碱基间氢键的形成催化dna分子两条链脱氧核糖与磷酸间磷酸二酯键的形成a b c d解析在dna重组技术中,两个dna片段间必须有相同的黏性末端才能互补配对,进行结合;具有相同黏性末端的dna分子连接时,dna连接酶的作用是催化脱氧核苷酸链的脱氧核糖与磷酸间形成磷酸二酯键。答案d4下列关于染色体和质粒的叙述,正确的是 ()。a染色体和质粒的化学本质都是dnab染色体和质粒都只存在于原核细胞中c染色体和质粒都与生物的遗传有关d染色体和质粒都可作为基因工程的常用载体解析染色体主要由dna和蛋白质构成;原核生物没有染色体;质粒可以做为基因工程的载体,而染色体不行。答案c5质粒作为“分子运输车”的条件是 ()。能够自我复制双链环状dna分子有多种限制性内切酶的单一切点有标记基因真核细胞中没有a bc d解析载体具备的条件是:能自我复制;有标记基因;最好有多种限制性核酸内切酶的单一切点;能在宿主细胞内稳定存在并大量复制。答案c6下图表示一项重要的生物技术,对图中物质a、b、c、d的描述,正确的是 ()。aa的基本骨架是磷酸和核糖交替连接而成的结构b要获得相同的黏性末端,可以用不同种b切割a和dcc连接双链间的a和t,使黏性末端处碱基互补配对d若要获得未知序列d,可到基因文库中寻找解析从图示看,a中含有胸腺嘧啶,故其基本骨架是磷酸和脱氧核糖交替连接而成;dna连接酶缝合目的基因和载体质粒之间的缝隙,使两者之间形成磷酸二酯键;若要获得已知序列的目的基因,可从基因文库中寻找;若要获得相同的黏性末端,可以用不同种的限制性核酸内切酶处理,如识别gatc的限制性核酸内切酶和识别ggatcc的限制性核酸内切酶处理目的基因和载体质粒就可以形成相同的黏性末端。答案b二、非选择题(共20分)7(10分)通过dna重组技术使原有基因得以改造的动物称为转基因动物。运用这一技术使羊奶中含有人体蛋白质,下图表示了这一技术的基本过程,在该过程中所用的基因“剪刀”能识别的序列和切点是ggatcc,请回答下面的问题。(1)从羊染色体中“剪下”羊蛋白质基因的酶是_。人体蛋白质基因“插入”后连接在羊体细胞染色体中时需要的酶是_。(2)请画出质粒被切割形成黏性末端的过程。ggatcc(3)人体蛋白质基因之所以能“插入”到羊的染色体内,原因是_。解析本题考查基因工程的基本操作工具。在基因工程中用到的工具酶有限制性核酸内切酶和dna连接酶,在对载体和目的基因进行切割的时候,一般要用同一种限制性核酸内切酶,才能切出相同的黏性末端,当插入目的基因时常用dna连接酶把二者之间的磷酸二酯键连接上。答案(1)限制性核酸内切酶dna连接酶 (3)人与羊的遗传物质(基因)都为dna,其物质组成和空间结构相同8(10分)(10分)如图是从酵母菌中获取某植物需要的某种酶的基因的流程,结合所学知识及相关信息回答下列问题:(1)图中cdna文库_基因组文库(大于、等于、小于)。(2)过程提取的dna需要_的切割,b过程是_过程。(3)为在短时间内大量获得目的基因,可用的技术是_,其原理是_。(4)目的基因获取之后,需要进行_,其组成必须有_及标记基因等,此步骤是基因工程的核心。(5)将该目的基因导入某双子叶植物细胞,常采用的方法是_,其能否在此植物体内稳定遗传的关键是_,可以用_技术进行检测。解析本题考查基因工程操作的基本过程。弄清cdna文库和基因组文库的差别、基因表达载体的构建、目的基因的获取途径和导入受体细胞的方法等是正确解答本题的前提。(1)基因组文库是指将某生物的全部基因组dna切割成一定长度的dna片段克隆到某种载体上形成的集合;cdna文库是由mrna经逆转录形成的基因组成的,由于基因的选择性表达,cdna文库小于基因组文库。(2)从供体细胞的dna中获取目的基因,首先应用限制酶将目的基因从其所在的dna分子上切割下来;b过程是以mrna为模板合成dna的过程,应为逆转录过程。(3)pcr技术是一种体外扩增dna的方法,其原理为dna复制,能将得到的目的基因在细胞外大量扩增。(4)基因表达载体包括目的基因、标记基因、启动子和终止子,其构建是基因工程的核心。(5)将目的基因导入某双子叶植物细胞常采用的方法是农杆菌转化法,目的基因只有整合到植物细胞的染色体上才能在植物体内稳定遗传,可通

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