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文档简介
第2讲微生物的培养和利用(时间:30分钟) 一、选择题1(2013东城区检测)欲从土壤中分离出能分解尿素的细菌,下列实验操作中不正确的是 ()。a将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释b同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板c可将未接种的培养基在相同条件下培养作为对照d用加入刚果红指示剂的培养基可筛选出分解尿素的细菌解析本题考查微生物的分离与培养,意在考查考生的实验分析能力。为了获得单个菌落,应将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释,a正确;为了使结果更加准确,同一浓度的土壤稀释液至少要涂布3个平板进行重复实验,然后计算平均值,b正确;加入刚果红的培养基用来筛选纤维素分解菌,d错误。答案d2(2013广东深圳一模,2)某学者欲研究被石油污染过的土壤中细菌数量,并从中筛选出能分解石油的细菌。下列操作错误的是 ()。a利用平板划线法对细菌进行计数b用以石油为唯一碳源的培养基筛选c采用稀释涂布平板法分离菌种d称取和稀释土壤时应在火焰旁解析平板划线法能对细菌分离纯化,但不能对细菌进行计数,稀释涂布平板法可以分离菌种还可进行计数,a项错误。答案a3(2013成都模考)分离土壤中分解尿素的细菌,对培养基的要求是 ()。加尿素不加尿素加琼脂不加琼脂加葡萄糖不加葡萄糖加硝酸盐不加硝酸盐a bc d解析土壤中分解尿素的细菌能够利用尿素作为氮源,因此若培养基中氮源只有尿素,分解尿素的细菌能生长,其他微生物不能生长;分离微生物要用固体培养基,必须加入琼脂;土壤中分解尿素的细菌属于异养型微生物,需要加葡萄糖作为碳源。答案b4(2013成都模考)关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述错误的是 ()。a操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌b将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯c等培养基冷却至50 左右时进行倒平板d待平板冷却凝固510 min后将平板倒过来放置解析操作顺序为先灭菌再倒平板;牛肉膏会黏附在称量纸上,应该将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯;培养基冷却至50 左右既没有凝固,同时又不烫手,可以进行倒平板;为了防止冷却过程中培养皿盖上凝集的水珠对平板的污染,培养基冷却凝固后就要将平板倒过来放置。答案a5(2013淮阴期末质量调研,14)如图是微生物平板划线示意图。划线的顺序为12345。下列操作方法正确的是()。a操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌b划线操作应在火焰上进行c在5区域中才可以得到所需菌落d在12345区域中划线前后都要对接种环灭菌解析本题考查平板划线操作方法。在每次划线前后都要对接种环进行灭菌,接种环的灭菌方法应是在火焰上灼烧,接种时划线操作是在火焰旁进行。在5个区域中,只要有单个活细菌,通过培养即可获得所需菌落。答案d6(2012东城区检测)下列关于微生物分离和培养的叙述,错误的是 ()。a微生物培养前,需对培养基进行消毒b测定土壤样品中的细菌数目,常用菌落计数法c分离土壤中不同的微生物,要采用不同的稀释度d分离能分解尿素的细菌,要以尿素作为培养基中的唯一氮源解析微生物培养前,需对培养基进行灭菌,而不是消毒;测定土壤样品中的细菌数目,常用菌落计数法;分离土壤中不同的微生物,要采用不同的稀释度,因为不同的微生物在土壤中的含量不同;分离能分解尿素的细菌,要以尿素作为培养基中的唯一氮源。答案a7(经典高考)下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述,其中错误的是 ()。a用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基,经高温、高压灭菌后倒平板b取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 ml,分别涂布于各组平板上c将实验组和对照组平板倒置,37 恒温培养2448 hd确定对照组无菌后,选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数解析本题以“检测土壤中细菌总数”实验为命题点,考查考生对基础知识的识记情况。在细菌计数时,为保证结果准确,一般选择菌落数目在30300的平板进行计数。答案d二、非选择题8(203潍坊三模a卷)白僵菌高孢粉是国家林业局推广的高效生物杀虫剂之一,应用于多种林木和农作物害虫的防治。白僵菌分生孢子在寄主表皮、气孔或消化道上,遇适宜条件开始萌发,生出芽管。同时产生脂肪酶、蛋白酶、几丁质酶等溶解昆虫的表皮,通过芽管入侵虫体,在虫体内生长繁殖,消耗寄主体内养分,产生各种毒素,形成大量菌丝和孢子,布满虫体全身。请回答下面的问题:(1)从自然菌样中筛选较理想的生产用菌种的一般步骤是:采集菌样富集培养_性能测定。白僵菌的菌样应从_采集。(2)分离白僵菌菌种的培养基属于_培养基。在配制白僵菌培养基时常加入蔗糖、硫酸铵、硝酸钾等成分,蔗糖属于_营养物质。(3)白僵菌纯化培养常用的接种方法是_和_。(4)分离与培养过程中,培养基和接种工具都要进行_处理,利用高温可以使微生物的_等物质发生变性。答案(1)纯化分离感病昆虫(2)选择碳源(3)平板划线法稀释涂布平板法或稀释混合平板法(4)灭菌蛋白质和核酸9(2013山东潍坊一模,34)某实验小组欲从土壤中筛选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌,设计实验步骤如下,请给予合理的补充。(1)采样与培养:将采集的土样混匀后称取1 g,置于经过_法灭菌处理的_(填“固体”或“液体”)培养基中,28 振荡培养。(2)接种与选择:为避免培养液中菌体浓度过高,需将培养液进行_处理之后,将菌液涂布接种于以_为唯一碳源的固体培养基上,30 条件下培养。为避免污染,需将培养皿呈_状态放置。(3)筛选与纯化:将适量的碘液滴加在平板中的菌落周围,如果菌落周围的现象是_,则说明此种菌能够_。从平板中挑取实验效果明显的目的菌株,采用_法接种于新的培养基平板,可对菌株进行进一步的纯化。答案(1)高压蒸汽灭菌液体(2)系列稀释(或“梯度稀释”)淀粉倒置(3)出现透明圈分泌淀粉酶使淀粉发生水解 (平板)划线10(2013枣庄一模)为验证某种中药牙膏是否像其广告宣传的一样具有较强的抑菌功效,某生物兴趣小组的同学设计了如下实验(符合无菌操作要求)。请分析下述实验过程并回答下列问题。用无菌水漱口,向漱口液中加入适量的该中药牙膏;配制牛肉膏蛋白胨固体培养基;将上述样品接种到培养基上,在适宜条件下进行培养;一段时间后,对培养结果进行观察并进行菌落计数(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的一般步骤是:计算、称量、溶化、灭菌、_;培养基在分装前往往要进行_。(2)本实验样品接种时最好采用_法。培养一段时间后,培养基表面长出菌落,每一个标准菌落来源于样品中的_。(3)食品安全检测时通常采用大肠杆菌作为致病微生物的指示菌,为测定哪些菌属于大肠杆菌,可选用_培养基对菌落进行鉴定,大肠杆菌的菌落在该培养基上呈现黑色。(4)本实验设计中的一个明显错误是_,请加以改正_ _。(5)证明所用培养基已经彻底灭菌的方法是_。答案(1)倒平板高压蒸汽灭菌(2)稀释涂布平板一个活菌(3)伊红美蓝(4)没有设置对照实验应将漱口液分为两份,一份加牙膏,一份不加牙膏分别接种培养(5)对未接种的培养基进行培养,如无菌落出现,则证明培养基已彻底灭菌11(2013淄博二模)生物乙醇是以生物质为原料生产的可再生能源,工业上利用微生物将木屑、废纸(主要成分为木质纤维)转化为乙醇的基本工艺流程如图所示,请回答:(1)筛选微生物x菌种的培养基中,应以_为唯一碳源,在培养基中加入_,并根据水解圈的大小来筛选微生物x。(2)微生物筛选常用的接种方法有_和_。(3)下表为筛选时,同一培养基上的单细胞形成的菌落情况:菌落编号菌落直径/mm水解圈直径/mm菌落特征27菌丝较粗而长,菌落干燥呈绒毛状或棉絮状,有霉味1225313311微生物x应是_,筛选时应挑选_号菌落,理由是_。(4)微生物y主要是_。答案(1)纤维素刚果红(2)平板划线法稀释涂布平板法 (3)霉菌生长速度快,纤维素酶产量(活性)高 (4)酵母菌12苹果醋具有营养丰富,增加机体免疫力,护肤养肝等多种功效,以鲜苹果汁为原料利用发酵瓶制作果酒和果醋的过程简图如下,请分析并回答:(1)过程甲中使用的微生物是_。将鲜苹果汁装入发酵瓶时,要留有大约_的空间,经过1012天后,在酸性条件下用重铬酸钾检测样液,如果颜色变为_色,说明产生了酒精。(2)过程乙中使用的微生物是_,可以从食醋中分离纯化获得,步骤如下:第一步:配制_(填“固体”或“液体”)培养基。第二步:对培养基进行高压蒸汽灭菌。第三步:接种。微生物常用的接种方法有稀释涂布平板法和平板划线法。第四步:培养。温度控制在_范围内。第五步:挑选符合要求的_。(3)在_的条件下,如果缺少糖源,乙中的微生物将甲过程的产物变为_,再将其变为醋酸。解析(1)制作果酒应选用酵母菌。将鲜苹果汁装入发酵瓶时,要留有大约的空间。重铬酸钾溶液与酒精反应呈灰绿色。(2)制作果醋应选用醋酸菌;分离纯化菌种需要固体培养基;醋酸菌生长的最适温度为3035 。(3)氧气充足时,如果缺少糖源,醋酸菌会将乙醇变为乙醛,再将其变为醋酸。答案(1)酵母菌灰绿(2)醋酸菌固体3035菌落(3)氧气充足(有氧)乙醛13(2013西安统考)35%40%的甲醛水溶液(福尔马林)可作为防腐剂,其防腐的原理是使蛋白质变性。自然界中有能分解甲醛的细菌和真菌。下图为分离和纯化分解甲醛细菌的实验过程。请分析回答:(1)过程的目的是_,过程培养出的是_。(2)上述实验中,不需要进行灭菌处理的是_,培养基灭菌的常用方法为_。(3)由的接种可选用_法,通过培养能获得_。经过过程后,取样测定甲醛浓度,选出_,再分离、培养菌株。此菌种异化作用的类型是_。(4)为研究甲醛初始浓度对菌株降解甲醛能力的影响,进行了相应实验并得到如下结果。由图可知,当甲醛的初始浓度小于1 200 mg/l时,菌株
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