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文档简介

实验七不同条件对淀粉酶产生菌生长及产酶影响试验 学习液体摇瓶培养技术了解不同培养条件对微生物生长及酶活力的影响 一 实验目的 细菌生长曲线 二 实验原理 细菌的摇瓶发酵 种子斜面种子 一级种子 二级种子 培养基液体摇瓶 装量 1 5 培养条件碳源 氮源 温度 pH 各组同学自己分离到的产淀粉酶细菌1株液体摇瓶培养基 摇床离心机 离心管 电炉 恒温水浴 试管架 分光光度计 三 实验材料 四 实验步骤 提前24h平板菌种接液体试管活化 并接种一支斜面试管保藏 提前3 5h按0 5 1 接种量分别转接如下五种液体摇瓶发酵培养基 1牛肉膏蛋胨30 2牛肉膏蛋胨室温3牛肉膏柠檬酸钠4牛肉膏硝酸钠5牛肉膏蛋胨pH4 不同条件对淀粉酶活性的影响测定 每组倒制淀粉培养基平板一块 培养基倒入量要求不要太多 尽量薄一点 铺满平板底部即可 用小滤纸片分别蘸取各瓶培养物少许 要求 不要蘸太多 保证每片所蘸培养物尽量一致 如右图所示 将小滤纸片贴在淀粉培养基表面 并分别在底板上做上标记 将平板置于30 培养箱培养1h 然后将碘液铺在平板上 分别测量水解圈的大小 不同条件对菌体生长量影响的测定 将3 5小时后液体摇瓶培养物分别取出3mL于比色杯中 在721型分光光度计600nm波长下测定吸光度 如果菌液浓度过大 可做适当稀释后再进行测量 分别记录各种不同培养基和不同培养条件下OD600值大小 评价对菌体生长量的影响 下次实验准备 每组包黄 蓝 白小枪头各1包 6支 每组包平皿1包 6个 每组装小离心管1瓶 若

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