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Bio Rad凝胶成像分析仪 2013 07 主要内容 仪器组成成份介绍软件操作界面介绍软件应用介绍 1 仪器基本组成 仪器各组成部分介绍 镜头及滤光片位置 控制面板 紫外透射平台 1 1控制面板 1 2背面开关及保险丝 UniversalHood电源开关 1 3镜头 相机镜头 滤光片 2 基本软件操作界面 软件操作界面 主窗口工作列 分析工具列 状态列 程序桌面 启动精灵 2 1主窗口工具列 2 2显示工具列 图像显示设定 放大 缩小 全窗口大小 亮度明暗度转换 改变图像色彩 转换3D成模式像 图像信息 2 3分析工具列 图像工具 泳道及条带工具 分子量工具 自动定量工具 注释工具 手动定量工具 3 软件基本程序应用 3 1建立图像获取程序 双击 选择 新建实验协议 3 1 1在应用程序下 选择各种成像模式 包括核酸凝胶 蛋白质凝胶 印迹及自定义等 3 1 2在成像区域项下 选择凝胶的类型及图像区域 3 1 3在图像曝光 显示选项下 可以手动或自动设置曝光时间 是否高亮显示饱和像素及显示图像色颜色 3 2 1将凝胶放入仪器盘里 关好仪器门 点击 放置凝胶 通过照相机缩放调节图像的大小或打开仪器门 挪动电泳胶 使其处于合适的成像位置 点击运行实验协议即可成像 3 2成像 3 2 2此时可以点击主窗口工具栏的 快照 或 保存 分别保存照片和软件格式 一边日后查看或分析 3 3图像分析 3 3 1自动分析点击左侧 分析工具箱 下方的 自动分析 进行 检测设置 和 分子量分析设置 点击 确定 完成对图像的自动分析 3 3 2手动分析3 3 2 1点击左侧 分析工具箱 下方的 图像工具 可以对图像进行 水平 和 垂直 的翻转 向左90 向右90 和 自定义 的旋转 以及 裁切 逆变数据 合并 等操作 3 3 2 2点击 泳道和条带 在 泳道 选项下可以进行泳道检测器的 自动 和 手动选择 可以对 所有泳道 或 单个泳道 进行相关的操作 在 条带 选项下 可以进行 条带的检测 以及条带的 添加 删除 调整 3 3 2 3分析完毕后 点击主窗口工具栏的 分析表 显示分析结果 同时 分析表 上方的选项可以调整 分析表 的显示项 及保存成Excel或文件的格式等 显示数据选项 更改分析表方向 将分析表复制到剪切板 将分析表导出到文件 将分析表导出到EXCEL 3 3 2 4分子量分析点击 分析工具箱 中的 MW分析工具 在标准项下 点击 更改 选择所需的 分子量标准 选择 标准泳道 点击 分析表 即可查看所要检测的蛋白的分子量 通过 主窗口工具栏 的 标准曲线 查看标准曲线 报告栏 查看报告 3 3 2 5定量工具 定量工具包括 相对定量 和 绝对定量 在 相对定量 里我们选用泳道5的1号条带为参考条带 其被定义为 1 其余条带依次得出相对结果 3 3 2 5定量工具 绝对定量 通过选择已知标准品浓度的条带 至少两个以上 以R表示 并设定合适的回归参数计算所得之标准曲线来推算目标条带的绝对浓度 具体数据可以查看分析表 3 3 2 6注释工具 可以通过注释工具增加文字批注及箭头批注 并可调整批注相对位置 文字属性 颜色及旋转方向等参数 3 3 2 7手动定量工具 体积工具 按下 矩形 圆形 徒手画 选择较合适的条带型态 选取想要定量分析的条带位置 并在条带上点击左键两下可将样品定义为标准品 未知样品或背景空白 并分别定义其定量依据 如kb ppm mg ml 背景扣