药物分析--吩噻嗪类含量测定.ppt

第十一章吩噻嗪类抗精神病药物的分析 第四节含量测定 性质 弱碱性 紫外光吸收特性 金属离子配合呈色测定方法 酸碱滴定法 分光光度法 高效液相色谱法和液相色谱 质谱联用技术 一 酸碱滴定法 一 非水溶液滴定法结构 母核上10位取代基的烃胺 NR2 哌嗪基及哌啶基具有碱性1 HClO4非水溶液滴定法基本原理 当HA酸性较强时 反应不能定量完成 必须除去或降低HA的酸性 使反应顺利地完成 因此 要根据不同情况采用相应测定条件 10ml 30ml 若供试品为氢卤酸盐再加5 醋酸汞的冰醋酸液3ml 5ml 碱性溶液pKb 10 冰醋酸中滴定突跃不明显 需加入醋酐 使碱性增强 突跃更明显 2 一般方法 供试品 以消耗标准液体积计算 溶剂 HAc 一般用量10 30ml 滴定剂 0 1mol LHClO4无水HAc溶液 指示剂 电位法 HClO4在冰醋酸溶液中 具强氧化性 可氧化吩噻嗪类药物产生红色的氧化物 干扰指示剂终点的观察 排除方法 1 改用中性溶剂 2 加抗坏血酸 3 电位法指示终点 4 适用范围主要用于Kb 10 8的有机碱盐的含量测定 对碱性较弱的杂环类药物 只要选择合适的溶剂 滴定剂和终点指示的方法 可使pKb为8 13的弱碱性药物采用本法滴定 Kb为10 8 10 10时 宜选冰醋酸作为溶剂 Kb为10 10 10 12时 宜选冰醋酸与醋酐的混合溶液 Kb 10 12时 应用醋酐作为溶剂 冰醋酸中加入不同量的甲酸 也能使滴定突跃显著增大 示例11 31 盐酸氯丙嗪测定ChP 2010 取本品约0 2g 精密称定 加冰醋酸10ml与醋酐30ml 溶解后 照电位滴定法 用高氯酸滴定液 0 1mol L 滴定 并将滴定的结果用空白试验校正 每1ml高氯酸滴定液 0 1mol L 相当于35 53mg的C17H19N2ClS HCl 提取后HClO4非水滴定法 取本品约0 15g置分液漏斗 加氨水碱化 乙醚提取6次 合并 水浴加热挥干乙醚 残渣 丙酮溶解 HClO4非水滴定法 溴甲酚绿 结晶紫指示液 紫红色 蓝紫色 示例11 32 盐酸氯丙嗪注射液测定JP 15 每1ml高氯酸滴定液 0 05mol L 相当于17 77mg的C17H19N2ClS HCl 二 乙醇水溶液的氢氧化钠滴定法 本类药物的盐酸盐的水溶液显酸性 在乙醇 水溶液中 可用NaOH滴定剂滴定 电位法指示滴定终点 V1 V2 等当点 突跃体积 滴定体积 V V1 V2 二 分光光度法 一 直接分光光度法在254nm的波长处 C17H19ClN2S HCl的吸收系数 为915计算 二 提取后分光光度法 排除辅料干扰 示例11 36 盐酸氯丙嗪口服液USP32 NF27 对照品 50同法测定As 萃取 除去抗氧剂的干扰 三 提取后双波长分光光度法 提取后分光光度法能够除去一些干扰物质 但却不能除去吩噻嗪类药物的氧化物 提取时 氧化物随游离碱进入有机相 测定时 因结构相近 氧化物在吩噻嗪类药物的测定波长处产生吸收 干扰测定 定量依据样品在二波长下吸收度差值 A 即 吸收度差值 A 仅与待测组分的浓度有关 而与干扰组分无关 干扰组分的干扰被消除 示例11 37 盐酸氯丙嗪注射液的含量测定 USP32 NF27 测定波长 254nm 最大吸收波长 277nm 等吸收波长 空白对照液 0 1mol L盐酸溶液 计算公式 式中 C mg ml 为对照品溶液的浓度 V ml 为所取供试品的体积 括号内的公式分别为供试品溶液 U 和对照品溶液 S 在下标所示波长处的吸光度差 五 钯离子比色法 吩噻嗪类药物在pH2 0 1的缓冲溶液中 与钯离子 Pd2 形成红色配合物 在500nm波长附近具有最大吸收 由于钯离子仅与未被氧化的硫元素配合显色 消除了药物中氧化物对测定的干扰 比色液的浓度 50 250 g mL 显色稳定性 10分钟后可稳定约2小时 示例11 38 盐酸异丙嗪注射液USP32 NF27 精密称取适量置分液漏斗 依次加氯化钾氢氧化钠碱化甲醇 合并正庚烷提取液 正庚烷提取3次 盐酸酸化 合并盐酸提取液并定容至50ml 对照品0 124mg ml 称取标准品和对照品溶液各2ml PdCl2显色 测A470 三 高效液相色谱法 一 反相高效液相色谱法 RP HPLC 固定相 十八烷基硅烷键合硅胶 ODS 流动相 水 甲醇或水 乙腈系统 极性较强极性较强的组分在分离时先流出柱子 极性较弱的组分后流出柱子 适合于共存组分极性差异较大样品的分析 杂环类药物分析一般在流动相中加入含氮碱性竞争试剂 扫尾剂 醋酸铵 三乙胺 二乙胺 乙腈等 以抑制碱性药物与未硅烷化的硅醇基作用 二 离子对高效液相色谱法 Ion RP HPLC 常用的离子对试剂 烷基磺酸盐阴离子对试剂 如戊烷磺酸钠 庚烷磺酸钠 十二烷磺酸钠等 影响离子对形成的条件 反离子的性质与浓度流动相的组成pH离子强度等 影响待测组分的保留 四 液相色谱 质谱联用技术 液相色谱 质谱联用技术集HPLC的高分离效能和MS的高专属性及高灵敏度于一体 已经成为目前测定复杂生物样本中微量药物的首选方法 同时也是进行药物及有关物质定性分析的常用方法 色谱图 图11 4血浆中7种抗抑郁类和5种