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检测生与物组织中的蛋白质思考题1、蛋白质双缩脲试剂发生颜色反应的原理是什么？答：双缩脲是由两分子尿素缩合而成的化合物，将尿素加热到180度，则两分子尿素缩合成一分子双缩脲，并放出一分子氨。双缩脲在碱性溶液中能与硫酸铜反应产生红紫色络合物，此反应称为双缩脲反应。蛋白质分子中含有很多和双缩脲结构相似的肽键，因此也能起双缩脲反应，形成红紫色络合物。2、你认为那些材料可以做该实验的材料？试一试：用浸泡与未浸泡的种子进行实验操作。效果一样吗？答：可以做该实验的材料：大豆、黄豆、鸡蛋、豆浆、牛奶 效果不一样，浸泡过的种子的实验效果更好。浸泡后，种子充分吸水，磨成豆浆时更容易。更有利于实验的进行。3、事先需要留出一些黄豆组织样液的目的是什么？ 答：为了与实验组进行对照4、把蛋清稀释成不同浓度的设计目的是什么？ 答：为了形成对比，以便于观察不同浓度的蛋白质溶液的双缩脲反应的现象，并进行对比，这样可以观察不同浓度梯度的蛋白质溶液的双缩脲反应的颜色变化，5、双缩脲试剂A和双缩脲试剂B的用量及加入的顺序可以改变吗？答：用量：双缩脲试剂A的成分是氢氧化钠的质量分数为0.1 g/mL的水溶液； 双缩脲试剂B的成分是硫酸铜的质量分数为0.01 g/mL的水溶液。 加入的顺序不可以改变，因为在双缩脲反应中，先加CuSO4溶液后加NaOH溶液，产生的Cu(OH)2的蓝色会掩盖紫色反应。双缩脲试剂使用时，先加入NaOH溶液（2mL），振荡摇匀，造成碱性的反应环境，然后再加入34滴CuSO4溶液，振荡摇匀后观察现象。(不加热）6、鉴定蛋白质时为什么要写先滴双缩脲A，再加双缩脲B，为什么不可以直接写滴加双缩脲试剂么？答：科学讲究具体准确，如果说“滴加双缩脲试剂”那么就有歧义：1，先滴双缩脲A，再加双缩脲B。2，先滴双缩脲B，再加双缩脲A。3，双缩脲A和双缩脲B同时滴加！生物讲究科学的，不允许有歧义的语言！，所以说“滴加双缩脲试剂”是错误的！7、斐林试剂和双缩脲试剂的区别？ 答：斐林试剂和双缩脲试剂斐林试剂和双缩脲试剂都由NaOH溶液（斐林试剂中还有酒石酸钾钠）和CuSO4溶液组成，但二者有如下三点不同： （1）溶液浓度不同 CuSO4溶液称为斐林试剂乙，其浓度为0.05 g/mL； CuSO4溶液（双缩脲试剂B）的浓度为0.01 g/mL。 （2）使用原理不同 斐林试剂是新配制的溶液，它在加热条件下与醛基反应，被还原成砖红色的沉淀，可用于鉴定可溶性还原糖的存在。用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时，溶液的颜色变化过程为：浅蓝色棕色砖红色（沉淀）。 鉴定生物组织中是否含有蛋白质时，常用双缩脲法，使用的是双缩脲试剂，发生的是双缩脲反应。具有两个或两个以上肽键的化合物皆可与双缩脲试剂产生紫色反应。蛋白质的肽键在碱性溶液中能与Cu2+络合成紫红色的化合物。颜色深浅与蛋白质浓度成正比。 （3）使用方法不同 斐林试剂使用时，先等体积混合甲、乙两液，而后立即使用，反应需要加热（有时不加热也反应）；
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